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益气活血治法促缺血心肌血管生成实验研究及其疗效评价

王培利  
【摘要】:目前,血管新生已成为世界医学领域的热点课题,促进缺血区血管生成是一种具有吸引力的、新颖的治疗策略。中医药益气活血、祛瘀生新的治疗法则及其临床有效性,为中医药血管新生的研究提供了理论和临床依据。 本课题研究分为三部分:文献综述、基础研究和临床研究。 1.文献综述:本部分分别从治疗性血管新生和缺血性心脏病、中医药治疗性血管新生研究进展以及中医临床疗效评价研究概况三个方面进行了综述。 2.基础研究:包括以下四个基础实验。 实验一、衰老大鼠心肌梗死模型的建立 目的:复制衰老大鼠心肌梗死模型。方法:皮下注射D-半乳糖500mg/kg·d,连续6周,在此基础上行开胸术,结扎冠状动脉左前降支。观察大鼠基本状态、饮食量、自发性活动、心电图,测定外周血谷胱甘肽过氧化物酶活性和心肌组织脂褐素含量。结果:此实验方法不仅达到了大鼠衰老标准,同时也成功地造成模型动物心肌梗死。结论:D-半乳糖与冠脉结扎制造的复合模型符合衰老与心肌梗死的基本改变。 实验二、益气活血中药对衰老大鼠缺血心肌的促血管生成作用 目的:探讨益气活血代表方当归补血汤对心肌梗死大鼠冠状动脉侧支血管生成的影响及其机制。方法:所有大鼠均运用D-半乳糖皮下注射与冠脉结扎方法制造衰老大鼠心肌梗死模型。64只造模成功大鼠随机分成衰老组、衰老心梗组、倍它乐克组、当归补血汤大剂量组、当归补血汤中剂量组、当归补血汤小剂量组。观察心梗2周后梗死面积,梗死边缘区血管内皮生长因子(VEGF)、Ⅷ因子相关抗原和缺氧诱导因子-1α的表达量,以及血清中VEGF浓度。结果:当归补血汤能够增加缺血心肌微血管密度和促进VEGF以及缺氧诱导因子-1α的表达,并且可提高血清中VEGF的浓度,与倍它乐克作用相当,其中以中、小剂量效果较佳。结论:当归补血汤能够促进衰老大鼠缺血心肌冠脉侧支血管的生成,对缺血心肌具有保护作用。 实验三、益气活血中药对缺血心肌血管新生信号转导途径的影响 目的:探讨益气活血代表方当归补血汤对缺血心肌血管新生信号转导途径的影响。方法:运用Western-blotting蛋白检测方法,对缺血心肌的p38MAPK、P13K以及AKT蛋白进行了分析。结果:当归补血汤具有不同程度地促进P13K以及AKT蛋白表达的作用,以中剂量组效果最为明显。结论:益气活血代表方当归补血汤可能通过激活P13K,从而引起下游蛋白AKT的进一步表达,从而将信号传至核内,引起VEGF mRNA的表达,产生促血管生成效应。 实验四、益气活血中药含药血清对内皮细胞VEGF受体表达的影响 目的:探讨益气活血代表方当归补血汤含药血清对人脐静脉内皮细胞VEGF受体表达的影响。方法:采用H_2O_2制备内皮细胞损伤模型,将按常规培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分为6组:(1)正常对照组;(2)100μmol/L


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