双参宁心胶囊干预心肌缺血的分子机制研究

【摘要】：心肌缺血引起的心血管疾病是当前死亡率最高的疾病之一。目前临床上用于治疗心肌缺血的药物有多种,但存在着这样或那样的问题。因此,利用现代心血管生命现象研究的成果,对中药治疗心血管病的药理作用进行深入研究,寻找新的作用靶点,探讨其作用机理,对中药现代化进程及中药新药研制,具有十分重要的理论意义和实用价值。 双参宁心胶囊(SSNX)是提取人参总皂苷、丹参总酚酸、元胡总生物碱三种有效组分配伍而成,本室已建立了该方的体外及血液中单一化学成分的含量测定方法和所测化学成分的指纹图谱方法,药效学研究表明,该方能明显减轻急性心肌缺血犬和大鼠的心肌损伤程度,对缺血心肌有保护作用。但SSNX抗心肌缺血的物质基础和机理尚不清楚,因此开展复方物质基础研究和机理探讨有助于为其临床应用提供理论和实验依据。 本文首先探讨了SSNX干预心肌缺血的物质基础,结合血清药物化学研究成果,建立了心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,对SSNX的全方、组分、成分分别进行了药理学研究。 在此基础上,我们又研究了SSNX全方及其有效成分对心肌细胞钙超载的影响,观察了胞浆钙离子浓度、钙泵、L型钙通道电流(I_(Ca-L))、L型钙通道mRNA表达等指标,从钙超载角度,进一步阐明了SSNX干预心肌缺血的分子机制。实验结果如下: 第一部分 双参宁心胶囊干预心肌缺血的物质基础研究 1 双参宁心胶囊及其成分对大鼠心肌细胞活力的影响 应用MTT法,观察双参宁心胶囊成分、组分及全方对乳鼠心肌细胞活力的影响。结果表明:在实验剂量范围内(1-1000mg/L),SSNX对心肌细胞活力无影响(P0.05)。而其3个组分人参总皂苷、丹参总酚酸、元胡总生物碱高剂量时(1000mg/L)均表现出了对心肌细胞活力的抑制作用(P0.001)。其成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱(在100μmol/L以内)对心肌细胞活力无影响(P0.05)。 2 双参宁心胶囊及其成分对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,观察了双参宁心胶囊成分、组分及全方对细胞培养上清LDH活性的影响。结果表明:人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱均可抑制缺氧/复氧损伤造成的心肌细胞LDH的漏出(P0.05),其中丹酚酸B、延胡索乙素作用显著(P0.01)。而人参皂苷Re对LDH的漏出无影响(P0.05)。 SSNX的3个组分人参总皂苷、丹参总酚酸、元胡总生物碱均可抑制缺氧/复氧