噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌药物敏感性研究及评价

【摘要】： 目的 利用表型鉴定法噬菌体生物扩增法(Phage Amplified Biologically Assay,PhaB Assay)检测结核分枝杆菌的耐药性，评价该方法用于检测结核分枝杆菌耐药性的应用价值。方法 (1)本研究应用PhaB法检测90株结核分枝杆菌异烟肼耐药株，62株异烟肼敏感株；91株结核分枝杆菌利福平耐药株，50株利福平敏感株；75株结核分枝杆菌氧氟沙星耐药株，58株氧氟沙星敏感株的药物敏感性，每次试验都以H37Rv作为阴性对照。(2)对91株利福平耐药株(其中82株为MDR-TB)，42株利福平敏感株；75株氧氟沙星耐药株，40株氧氟沙星敏感株均进行DNA序列分析法、PCR-SSCP和PhaB药敏试验方法的分析，以资分析与评价PhaB法的临床应用价值。结果 (1)以绝对浓度法药敏试验结果为标准检测异烟肼药物敏感性PhaB法的符合率为93％(141／152)，敏感度为(即检测耐药性的能力)为92％(83／90)，特异度(即检测敏感性能力)为94％(58／62)；检测RFP的药物敏感性PhaB法的符合率为93％(131／141)，敏感度为92％(84／91)，特异度为94％(47／50)；检测OFLX的药物敏感性PhaB法的符合率为94％(125／133)，敏感度为95％(71／75)，特异度为93％(54／58)。(2)以绝对浓度法药敏试验结果为标准，检测133株结核分枝杆菌(其中91株为RFP耐药株，42株为敏感株)对RFP的药物敏感性，PhaB法的符合率为93％，敏感度为92％，特异度为95％；DNA序列分析法的符合率为93％，敏感度为87％，特异度为100％；PCR-SSCP的符合率为90％，敏感度为86％，特异度为100％。检测115株结核分枝杆菌(其中75株为OFLX耐药株，40株为敏感株)对OFLX的药物敏感性，PhaB法的符合率为95％，敏感度为95％，特异度为95％；DNA序列分析法的符合率为80％，敏感度为71％，特异度为98％；PCR-SSCP的符合率为75％，敏感度为63％，特异度为98％。结论PhaB法是一种操作简便，快速，敏感，与绝对浓度法符合率高的药敏试验方法，在48—96小时内可获得试验结果，具有良好的临床应用前景。