收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

联合信号传导通路抑制剂逆转急性髓系白血病耐药及其机制研究

江雪杰  
【摘要】:背景与目的: 急性髓细胞白血病(AML)是成年人常见的血液系统恶性肿瘤之一,目前白血病的治疗仍以化疗为主。尽管联合化疗已明显延长了患者的生存期,但白血病细胞多药耐药(multidrug resistance, MDR)仍为当今血液肿瘤治疗中的一大难题。近来研究认为多通道多靶点信号传导通路异常,细胞信号网络调控失衡,导致细胞增殖失控、凋亡受阻,是白血病细胞耐药的重要机制。当前应用单一细胞信号传导通路抑制剂如Bortezomib、RAD001、LBH589和三氧化二砷等抗肿瘤效果差,而有限的初步研究结果显示联合多靶点信号传导通路抑制剂能够增强抗肿瘤活性,提高细胞对化疗药物的反应性。但是,用于耐药的急性髓系白血病方面研究极少,联合上述药物逆转白血病细胞耐药及探索优化组合方案的研究报道缺乏。 HL-60/ADM细胞是公认的急性髓系白血病多药耐药细胞株,我们前期研究证明Bortezomib联合三氧化二砷可以协同逆转HL-60/ADM和难治性AML原代细胞耐药,增强化疗的敏感性。蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib, Velcade,万珂)可以特异性抑制NF-κB通路蛋白的磷酸化,降低抗凋亡蛋白的活性,具有靶向抗肿瘤效应。体内外研究证明Bortezomib对淋巴瘤、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞均有较好的抗肿瘤效应,还可以克服传统化疗药物的耐药性。RAD001(Everolimus)是新合成的雷帕霉素衍生物,通过抑制mTOR的活性,阻断P I3K/Akt/mTOR信号通路,诱导细胞凋亡。有研究表明,RAD001与细胞毒性药物或P13K抑制剂或组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275联合,可以协同抑制HL-60、Jarket等白血病细胞增殖作用和促进凋亡作用。LBH589是第二代高活性的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC inhibitors, HDACIs),在骨髓瘤细胞中研究表明LBH589可以调节Bcl-2、Bax等多种凋亡蛋白的表达,诱导细胞凋亡,还可以提高马法兰、Bortezomib等药物的抗肿瘤治疗效果。在T细胞白血病/淋巴瘤中的研究发现,组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合Bortezomib作用于细胞信号通路中Akt、NF-kB、JNK、p38MAPK等多个靶点,可以协同诱导caspase介导的细胞凋亡。有研究报道,LBH589联合Akt抑制剂AEE788可以抑制MEK、Akt蛋白磷酸化,可以协同诱导K562、Jurkat和ML-1白血病细胞凋亡。2008年ASH会议上Mamta Gupta等报道,在弥漫大B细胞淋巴瘤中LBH589与雷帕霉素联用也有协同抗肿瘤效果。但在耐药性AML细胞中联合多靶点信号通路抑制剂诱导细胞凋亡、逆转耐药的报道极少。 本课题拟研究联合Bortezomib、RAD001、LBH589抑制急性髓系白血病多药耐药细胞株HL-60/ADM增殖,诱导凋亡及逆转耐药作用,旨在优化分子靶向药物逆转AML耐药的最佳组合方案并探讨其机制,随后通过难治性AML原代细胞验证,为难治性白血病治疗探索一条新途径。 研究方法: 首先选择急性髓系白血病多药耐药细胞株HL60/ADM为研究对象。应用MTT法计算增值抑制率,以24h阿霉素ICso值比较HL-60/ADM和HL-60细胞对阿霉素的敏感性,以耐药倍数大于30倍定义为耐药。此后将HL60/ADM细胞于含有10%小牛血清的RPMI-1640培养基中进行培养,以不同浓度药物处理HL60/ADM细胞12-72h,观察时间-剂量依赖性增殖抑制效应,在0-50nM之间确定LBH589 48h IC50浓度,在0-30nM之间确定Bortezomib 48h IC50浓度,在0-30μM之间确定RAD001 48h IC50浓度。 确定LBH589 48h IC50浓度约为28nM, Bortezomib 48h IC50浓度为16nM, RAD001 48h IC50浓度为12μM。将HL-60/ADM细胞分为LBH589、RAD001、Bortezomib单药处理组、LBH589联合RAD001处理组和LBH589联合Bortezomib处理组,每组处理的细胞数一致,每组均设置空白对照组。各组检测指标相同,即用MTT法检测细胞增殖、AnnexinV-FITC/PI和Hoechst33342染色检测细胞凋亡,并应用流式细胞仪检测HL-60/ADM细胞MRP1表达和摄取阿霉素的情况。根据各组增殖抑制率,利用Calcusyn软件计算药物协同指数(CI)确定优化组合方案。选择难治性AML患者原代细胞,以优化组合方案处理细胞,MTT测定其增殖抑制率,验证其在原代细胞中的有效性。利用优化方案处理HL60/ADM细胞,分别提取细胞总蛋白和核蛋白,Western Blot检测PI3K/Akt/NF-κB信号通路及凋亡蛋白水平变化。对Western印迹胶片用Gel-Pro Analyzer软件进行光密度扫描定量分析,用目的蛋白和β-actin的积分光密度值(IOD)的比值来反映蛋白的相对表达水平,探讨联合多靶点信号传导抑制剂逆转白血病细胞耐药的分子机制。 利用SPSS13.0软件进行统计学分析。不同浓度RAD001增殖活性差异采用单因素方差分析。依据LBH589、RAD001、Bortezomib单药或联合对HL60/ADM细胞增殖活性影响,利用Calcusyn软件计算药物协同作用指数(CI),反映药物之间的相互作用效果。判定标准:CI<1,反映药物之间为协同作用;CI=1,反映药物之间为相加作用;CI>1,反映药物之间为拮抗作用。采用方差分析比较不同处理组细胞凋亡率,两两比较采用LSD法;多样本采用方差分析;对原代细胞的细胞活性差异采用随机区组方差分析,两两比较采用LSD法检验;不同处理组蛋白相对表达水平的比较,采用单因素方差分析。 结果: 1. HL60/ADM细胞的耐药性确定 MTT法检测HL60/ADM细胞阿霉素敏感性显示:阿霉素作用于HL60/ADM细胞的IC50值约为6.833μg/ml,作用于HL60细胞的IC50值仅为0.086μg/ml, HL60/ADM细胞耐药倍数为HL60的79倍,说明HL60/ADM细胞对阿霉素高度耐药,可以作为下一步研究对象。 2.RAD001或联合LBH589对HL60/ADM细胞增殖、凋亡及耐药的影响 MTT法检测细胞增殖活力显示:不同浓度RAD001对HL60/ADM细胞均具有生长抑制作用,随时间延长和剂量增加增值抑制率也逐渐提高,呈明显的时间一剂量依赖关系。不同浓度RAD001作用于HL60/ADM细胞48h和72h,30μmol/L药物浓度均达到最大抑制效果,增加药物浓度至40或50μmol/L时细胞增殖抑制率之间差异无显著意义,P0.05。RAD001和LBH589对HL60/ADM细胞48hIC50值分别为12μmol/L和28nmol/L。以两药1/2IC50、3/4IC50、IC50、1.5IC50、2IC50浓度联合作用于耐药HL60/ADM细胞48h,1/2 IC50、3/4 IC50、IC50联合组细胞增殖抑制率高于各单药组,P0.05。但1.5IC50、2IC50联合组增殖抑制率与RAD001单药组相比变化不明显,P0.05。利用Calcusyn软件计算药物协同指数(CI),不同浓度RAD001联合LBH589时CI值均大于或等于1,说明两药联合没有协同抑制HL60/ADM细胞增殖的作用。 AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡显示:对照组HL60/ADM细胞凋亡率为5.13±0.7%,5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L RAD001处理组细胞凋亡率分别为17.6±1.58%、48.3±5.74%和78.5±8.71%。可见随着药物浓度的增加,细胞凋亡率也随之增加(P0.05)。Hoechst33342染色形态学观察凋亡显示:空白对照组细胞几乎无凋亡现象,不同浓度RAD001处理HL60/ADM细胞48h均可见凋亡小体,表现为核固缩、凝集,明亮的颗粒状蓝染,并且也随着RAD001浓度增加,凋亡细胞也逐渐增多。 流式细胞仪检测细胞MRP1蛋白表达结果显示:HL-60/ADM细胞MRP1阳性率为92.9±3.54%,与HL-60细胞(1.87±0.09%)相比差异显著,P0.01,提示耐药性AML细胞株HL-60/ADM高表达MRP1。10μmol/L RAD001处理HL-60/ADM细胞24h后,MRP1阳性率为79.10±3.88%,显著低于对照组,P0.01。10μmol/L RAD001处理HL-60/ADM细胞24h后,加入终浓度为0.5μg/ml阿霉素,流式细胞仪检测细胞阿霉素摄取率结果显示:RAD001处理组为15.36±1.5%,明显高于对照组(8.53±0.74%),P0.01,提示RAD001可以提高HL-60/ADM细胞阿霉素摄取率。以上结果提示,RAD001处理HL-60/ADM细胞能够下调MRP1的表达,提高阿霉素摄取率,逆转耐药。 3.LBH589联合Bortezomib对HL60/ADM细胞增值、凋亡的影响 MTT法检测细胞增殖抑制率结果显示:LBH589和Bortezomib对HL60/ADM抑制效应显示出剂量依赖性,即随药物剂量增加增殖抑制作用显著增强。LBH589. Bortezomib单药对HL60/ADM细胞48h IC50值分别为28nmol/L和16nmol/L,以HL60/ADM细胞1/2 IC50、3/4 IC50、IC50、3/2 IC50、2 IC50浓度LBH589、Bortezomib单药或联合作用于HL60/ADM细胞48h,各浓度联合组增值抑制率均高于单药组,P值均0.05,利用Calcusyn软件计算药物协同作用指数。不同浓度LBH589联合Bortezomib时CI值均小于1,说明具有协同抑制增殖作用,其中21nmol/L LBH589联合12nmol/L Bortezomib协同作用最为明显,CI值为0.531。 AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测凋亡显示:21nmol/L LBH589、12nmol/L Bortezomib单药或联合处理HL60/ADM细胞48h。对照组细胞凋亡率为5.36±0.47%,而LBH589和Bortezomib单药处理后凋亡率分别为45.6±5.56%,39.4±4.38%,显著高于对照组(P0.01),但单药组之间没有统计学差异(P0.05)。而两药联合处理后细胞凋亡率进一步提高至76.8±9.64%,与单药组之间差异显著,P0.01。Hoechst33342染色形态学观察凋亡显示:空白对照组细胞几乎无凋亡现象,而LBH589、Bortezomib单药组和联合组处理细胞48h均可见凋亡小体,并且在对照组、单药组、联合组中凋亡细胞依秩增多。 4.LBH589联合Bortezomib对HL60/ADM细胞耐药的影响及机制研究 流式细胞仪检测细胞MRP1表达结果显示:21nmol/L LBH589、12nmol/L Bortezomib单药处理HL-60/ADM细胞24h,其MRP1阳性率分别为76.06±4.94%和71.84±5.54%,均低于对照组,P0.05。当上述浓度LBH589和Bortezomib联合时可以进一步降低MRP1的表达,其阳性率为57.78±3.48%,P0.05。流式细胞仪检测细胞阿霉素摄取率结果显示:21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合处理组阿霉素摄取率为64.81±3.31%,高于LBH589(28.96±2.37%)和Bortezomib (37.26±3.66%)单药组,P0.01,而单药组与对照组(8.53±0.74%)之间也存在显著性差异,P0.01。以上结果提示,LBH589、Bortezomib单药或联合处理HL-60/ADM细胞能够下调MRP1的表达,提高细胞阿霉素摄取率,逆转耐药,而两药联合时效果更加明显。 Western blotting检测HL-60/ADM细胞的蛋白水平变化结果显示:LBH589单药处理HL-60/ADM细胞24h和48h Acetyl-Histone3表达高于对照组,当与Bortezomib联合处理时可以进一步提高细胞Acetyl-Histone3的表达水平,P0.05,但Histone3总蛋白表达水平保持不变。分析P53蛋白的结果显示,LBH589、Bortezomib联合处理24h或单药处理48h P53蛋白表达均高于对照组,P0.01,而联合处理48h后P53蛋白水平进一步升高。研究抗凋亡蛋白Bcl-2和XIAP结果发现,LBH589、Bortezomib两药联合处理细胞24h和48h可以降低Bcl-2和XIAP的表达水平。与凋亡相关的Caspase和PARP蛋白在LBH589、Bortezomib单药作用HL-60/ADM细胞24h可以诱导细胞Caspase-8、3和PARP蛋白的裂解激活,产生裂解片段,延长时间至48h或两药联合时可以进一步提高活化作用,P0.05。研究PI3K/Akt/NF-KB信号传导通路中蛋白变化结果显示:LBH589、Bortezomib单药或两药联合处理后总AKT蛋白和总IKKα蛋白水平保持不变。但单药处理细胞48h,可以抑制磷酸化AKT蛋白(p-AKT)、磷酸化IKKα/β蛋白(p-IKKα/β)的表达,当两药联合时效果更加明显,P0.05。研究核转录因子NF-κB P65结果表明:LBH589、Bortezomib单药处理24h或48h,细胞核蛋白NF-κB P65蛋白水平较对照组减低,P0.05,而两药联合处理可以进一步抑制其表达。以上结果提示LBH589和Bortezomib联合处理HL-60/ADM细胞可以明显降低PI3K/Akt/NF-κB信号传导通路活性,上调P53蛋白的表达,抑制Bcl-2和XIAP蛋白表达,促进Caspase-3、8和PARP的裂解激活,诱导细胞凋亡。 5.LBH589联合Bortezomib对难治性急性髓系白血病原代细胞增殖的影响 MTT法检测原代细胞增殖抑制率结果显示:LBH589和Bortezomib对难治性AML原代细胞抑制效应均显示出剂量依赖性,但原代细胞对不同浓度药物的敏感性均低于细胞株,P0.01。LBH589、Bortezomib对HL60/ADM细胞48hIC5o值分别为28nmol/L和16nmol/L,以两药HL60/ADM细胞1/2 IC50、3/4 IC50、IC50、3/2 IC50、2 IC50浓度联合作用于难治性AML原代细胞48h,各浓度联合结果均高于单药组,P值均0.05。利用Calcusyn软件计算药物协同指数,不同浓度药物联合时CI值均小于1,说明均有协同抑制增殖作用。其中,21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合对原代细胞增殖抑制率协同作用也最为明显,CI值为0.498。与HL60/ADM细胞株相比,不同浓度药物对耐药AML原代细胞敏感性均低于HL60/ADM细胞株。研究结果表明LBH589联合Bortezomib可以协同抑制难治性AML原代细胞增殖,但其抑制率低于HL60/ADM细胞。 结论: 1、LBH589、RAD001单药对耐药AML细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用,其抑制作用效果随着时间和剂量的增加而增强。 2、不同浓度LBH589、RAD001联合作用于HL-60/ADM细胞,协同作用指数(CI)均大于或等于1.0,表示两种药物联合时没有协同抑制增殖作用。 3、不同浓度LBH589、Bortezomib联合作用于HL-60/ADM细胞和难治性AML原代细胞,CI值均小于1,说明两药联合具有协同抑制增殖及诱导凋亡作用,其中21nmol/L LBH589和12nmol/L Bortezomib联合时协同作用最为明显。 4、LBH589、Bortezomib能够明显下调HL-60/ADM细胞MRP1的表达,提高细胞阿霉素摄取率,逆转耐药,而两药联合效果更加明显。 5、LBH589联合Bortezomib处理HL-60/ADM细胞,可以降低PI3K/Akt/NF-κB信号通路活性,上调P53蛋白的表达,抑制Bcl-2和XIAP蛋白表达,促进Caspase-3、8和PARP的裂解激活,共同参与逆转AML耐药。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 孙自忠;;CAG方案治疗老年急性髓细胞白血病的临床疗效观察[J];中国实用医药;2009年23期
2 陈为民!350001福州,宋团月!350001福州,伍延安!350001福州,蔡鹏威!350001福州,李丽英!350001福州,李乐!350001福州;急性髓系白血病患者外周血CD_(34)、Fas及P170的表达及其临床意义[J];中华血液学杂志;1999年08期
3 孟景晔;Mylotarg治疗第一次复发的CD33~+急性髓系白血病患者的疗效和安全性[J];国外医学.内科学分册;2003年02期
4 刘涛;刘珍珍;朱平;程克棣;Lars Rnnstrand;;FLT3在急性白血病靶向治疗中的研究进展[J];中国药理学通报;2008年12期
5 夏云金,万楚成,郭仁慈;不同病期急性髓系白血病患者红细胞免疫功能检测及临床意义[J];微循环学杂志;2005年02期
6 崔雯,许议丹,钱林生,丁兆明,郝玉书;六例微分化急性髓系白血病患者细胞化学特点分析[J];中华血液学杂志;2002年01期
7 牛新清;佘妙容;李强;王辉;郭坤元;;急性髓系白血病细胞系中白血病干细胞样亚群的分离和鉴定[J];中国免疫学杂志;2009年11期
8 黄雄,郭坤元,徐安龙;急性髓系白血病患者T淋巴细胞FasL表达及其诱导白血病细胞凋亡功能[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1997年03期
9 刘焕勋,卓家才,陈俊雄,汪明春;MA方案治疗老年急性髓系白血病[J];中华血液学杂志;2000年01期
10 魏艳淋;赵小英;;初发急性白血病患者贫血182例临床分析[J];浙江医学;2007年06期
11 白庆咸,黄高昇,杨平地,张晓晖,杨岚,陈协群;RT-PCR法检测急性髓系白血病细胞中bcl-x基因的表达[J];第四军医大学学报;2000年10期
12 徐浩,陈天荣,张晓玲,蔡益鹏,程月新,董剑明,王九如,方复海;MA方案治疗初治急性髓系白血病34例疗效观察[J];苏州大学学报(医学版);2004年04期
13 安峻峰,陈济民,李秀珍,梅广义,谢燕,高清平,夏宏;G-CSF对急性髓系白血病细胞P-糖蛋白表达的调节作用研究[J];中华血液学杂志;1998年02期
14 肖志坚,卞寿庚,郝玉书,李建波,钱林生,阎嶂松,薛艳萍,赵耀中;Ph染色体阳性的成人急性髓系白血病[J];中华血液学杂志;1999年01期
15 管慧红;环孢素调节高危急性髓系白血病病人抗药性的研究:一项来自西南地区肿瘤学组的研究[J];国外医学.内科学分册;2002年09期
16 张瑞英,杨俊超,潘崚;Nm23-H_1在白血病患者中表达水平及其临床意义的研究[J];邯郸医学高等专科学校学报;2005年05期
17 唐继森, 王辨明,李崇渔;重组人干细胞因子刺激人急性髓系白血病细胞扩增[J];中国病理生理杂志;1995年04期
18 李玲,温丙昭,钟笛,哈丽代·牙生,赵毅,郝建萍,孙亚军;成人急性髓系白血病的免疫学特点及预后[J];白血病.淋巴瘤;2001年01期
19 范春梅,胡建达,郭永建,陈志哲;急性白血病多药耐药相关蛋白基因的表达及其临床意义[J];中华医学杂志;2005年29期
20 陈曙平;吴登蜀;赵谢兰;何群;陈方平;;预激方案与标准化疗方案治疗老年急性髓系白血病的比较观察[J];中国医学工程;2007年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 江雪杰;孟凡义;周红升;王蔷;吴福群;黄凯凯;;LBH589联合Bortezomib逆转髓系白血病耐药及其分子机制研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
2 徐兵;李琳;宋小燕;许文娟;唐家宏;;联合定量检测急性髓系白血病患者MDR1和WT1基因表达水平及临床意义[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
3 李双月;裴仁治;;硼替佐米治疗白血病的研究进展[A];第七届全国血液免疫学学术大会暨2008年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2008年
4 李昆霖;吴国明;戢福云;黄桂君;;人小细胞肺癌多药耐药细胞差异表达基因的克隆研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
5 章美华;范红运;许姗姗;;急性白血病患者PICC置管相关性感染的观察与护理[A];中华护理学会2009全国静脉治疗护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年
6 顾伟英;曹祥山;朱江;王志林;严峰;陈子兴;胡绍燕;王玮;岑建衣;沈慧玲;钱军;;WT1基因在白血病患者中表达及监测微小残留病灶的意义[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
7 张恒;徐慧珍;周剑峰;;159例白血病患者的细胞遗传学及疗效分析[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
8 秦秀丽;王燕;王红;;白血病患者行外周血干细胞移植的护理[A];全国内科护理学术交流暨专题讲座会议、全国心脏内、外科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2008年
9 熊玉芝;房贵菊;;强化护理在急性白血病患者康复中的作用[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年
10 黄仁魏;衣晨;何易;李旭东;王东宁;胡元;王文文;肖若芝;;急性髓细胞白血病患者FOXC1基因异常表达的意义探讨[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 江雪杰;联合信号传导通路抑制剂逆转急性髓系白血病耐药及其机制研究[D];南方医科大学;2011年
2 董嵩;依维莫司联合吉非替尼抑制非小细胞肺癌细胞系的效果和机制[D];南方医科大学;2010年
3 杨杨;骨髓基质细胞在急性淋巴细胞白血病耐药中的作用及机制研究[D];浙江大学;2011年
4 周中军;肿瘤细胞耐药机理及其逆转的研究[D];中国协和医科大学;1993年
5 周春林;AML1选择性剪接体在急性白血病中的表达及其意义的研究[D];中国协和医科大学;2005年
6 来森艳;胃肠道间质瘤伊马替尼继发耐药的机制研究[D];华中科技大学;2012年
7 张巍;calpain及calpastatin在小鼠皮肤切创愈合过程中作用的研究[D];中国医科大学;2009年
8 魏华;氧化应激诱导间充质干细胞凋亡及磷脂类分子调节血管内皮生长因子分泌研究[D];中国协和医科大学;2010年
9 袁霞;新型Bcr-Abl/Src激酶抑制剂FB2抗伊马替尼耐药慢性髓系白血病作用及机制研究[D];北京协和医学院;2010年
10 冯丹丹;白血病耐药及复发相关miRNAs的筛选与功能探究[D];中山大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 樊红琼;抑制细胞外信号调节激酶对三氧化二砷诱导K562/A02细胞凋亡的作用[D];吉林大学;2008年
2 宁澄清;HDAC抑制剂:LBH589类似物的设计、合成及生物活性研究[D];中南大学;2011年
3 刘金花;三氧化二砷对Bcr-Abl耐药突变细胞株抑制作用及其作用机制[D];东北农业大学;2010年
4 潘玉夏;急性髓系白血病患者基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)的表达及其意义[D];河北医科大学;2003年
5 陈琳琳;蛋白酶体抑制剂bortezomib逆转结肠癌细胞获得性TRAIL耐药的机制研究[D];浙江大学;2008年
6 赵晋梅;急性髓系白血病患者C/EBPα基因突变研究[D];山西医科大学;2005年
7 肖佩芳;CREB在儿童急性白血病中的表达及其意义[D];苏州大学;2006年
8 张宣东;饮绿茶与白血病发病风险的病例对照研究[D];浙江大学;2007年
9 黄远玲;急性髓系白血病免疫表型特征及其临床意义[D];福建医科大学;2012年
10 罗秋华;脾胃虚弱型白血病患儿淀粉酶糖链变化及机理研究[D];广州中医药大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 薇莱;法舒地尔或可治疗白血病[N];中国医药报;2011年
2 黄衍强;治疗白血病中药不是“预备役”[N];健康报;2007年
3 记者 余晓洁;王振义:拯救白血病患的仁医[N];新华每日电讯;2011年
4 上海瑞金医院血液科主任 沈志祥;白血病患者化疗须知[N];健康报;2007年
5 主任医师 容小翔;输血会传染上白血病吗[N];卫生与生活报;2007年
6 甘培华 薛文婷 钱华明;用大爱精神点亮生命之光[N];镇江日报;2009年
7 ;我国到底有多少白血病患者?[N];人民政协报;2003年
8 吴志菲;王振义:攻占治“血疑”巅峰[N];中国纪检监察报;2011年
9 本报记者 林艺群 实习生 江艳 ;生命难以承受之痛[N];闽南日报;2007年
10 王珲;中医对白血病的诊断和治疗[N];中国老年报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978