收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用基因芯片技术筛选早期乳腺癌的差异表达基因

李秀勤  
【摘要】:研究背景 乳腺癌是女性中常见的恶性疾病,近年来乳腺癌的发病率逐渐升高,逐渐成为威胁广大女性健康的恶性肿瘤。乳腺恶性肿瘤是一种全身性疾病,有了癌肿细胞早期扩散的微小浸润或隐形扩散这一特点的存在,虽然临床治疗的药物和方案的不断更新,但仍不能更好的控制乳腺癌的发病及预后,临床数据显示,乳腺癌是目前威胁女性生命健康的主要恶性肿瘤之一,逐渐成为女性肿瘤疾病死亡率最高肿瘤病型。早期诊断是提高乳腺癌治愈率和生存率的关键,但是乳腺癌肿瘤细胞的生长和进展过程中牵涉到较为复杂的生物学过程。病理组织诊断是目前临床诊断乳腺癌所用的主要方法,一次只能进行单个指标的检测是病理诊断最主要的缺陷,不能达到良好的诊断效果,这一传统的诊断方法对于乳腺癌的分子分型及用药指导缺乏准确性、特异性,因此临床上需要一种特异性的诊断和判断乳腺癌患者的方法,这种方法对于乳腺癌个体化治疗极为重要。 如今临床上以病理类型、临床分期、雌激素受体、孕激素受体、HER-2等判断预后[1,3]。随着生物基础研究和临床研究的不断的改进和发展,对乳腺癌的治疗也有着不断的更新,治疗手段也有着一定的不同,随着新的药物、新的治疗不断的出现,使得乳腺癌的治疗效果也有着很大的提高和改变,但是仍有一些患者尽管临床分期及其病理分型相同,应用同样的治疗药物和方法后,预后则较差。与此同时临床上对于早期乳腺癌是否需要化疗目前仍无定论,缺乏相应的指导标准。同其他实体瘤相比,临床上在乳腺癌的治疗效果上所取得一定的成绩,提高了一部分病人的生存率,但并不是意味着任何一种效果好的治疗方案适合所有的患者,往往临床病理分型相同的乳腺患者经过同样的治疗方法治疗后,结果却不相同。如何才能找出一种治疗方案的适合的患者入群,进而取得最佳的治疗的效果,成为今天广大临床医师们不断追寻的目标。 乳腺癌患者死亡的主要原因是由于肿瘤细胞的远处器官扩散和转移,尽管病理类型和临床分期相同的患者也有着迥然不同的预后,因此,依照现有的临床分期和组织学病理特征很难对不同进展能力的乳腺癌患者进行精确的判断和预测预后。我们通过肿瘤细胞的高表达和转移这一特性获取一系列转移相关基因的异常改变。因此通过传统病理或影像形态来诊断早期乳腺癌的观念现已发生了改变。早期乳腺癌患者经过根治性手术治疗和规范性化疗后,仍有部分患者会复发及转移[2],因此对早期乳腺癌患者进行准确的预后预测,可为个体化治疗乳腺癌,延缓复发提供依据。众所周知,乳腺癌是一种多样化的疾病,免疫组化、分子特征、病理分型及基因不同,预后往往不同,有些病理类型和临床分期相同的乳腺癌患者,预后也会不同,治疗也具有一定的差异性。肿瘤的发生和进展是在基因水平上发生的多基因的疾病,所以,乳腺癌的基因异质性是导致相同病理分型和相同临床分期的患者对同样的临床治疗有不同的反应及预后[5,6]。国外研究表明:基因的异型性及多样性是病理类型和临床分期相同、但预后不同的主要原因[7],而且基因组的分析是标准化的预后工具,比临床病理参数更能准确的预测评估早期乳腺癌的复发风险,为临床治疗提供参考[8]。 乳腺癌不论是在免疫表达分型、生物学行为、组织病理学形态以及对疗效的反应都有着显著的区别,研究者们认为这种区别是因为乳腺癌的分子差异所导致的。不断的研究表明,乳腺癌远期生存和预后同许多分子标志物是分不开的,因此,对于标志物基因分型的探究成为了分子生物学的基础。与此同时,基因芯片和组织微阵列等高通量研究技术的出现,基因分型不但能反映不同乳腺癌具有各异的临床表现和预后,为进一步的研究乳腺癌基因分型的提供了理论和技术的支持。以肿瘤基因表达差异为基础的乳腺癌基因分型的提出对于解决肿瘤的异质性、分期的合理性、预后判断的准确性及乳腺癌治疗方案的个体化等将提供重要依据[4-7]。肿瘤的发生是多种基因联合、循序的发生变异地结果,其中包括癌基因和抑癌基因。 随着人类基因组计划的研究的不断的探索,至2003年以来研究者们已经可以检测出人类自身的基因组序列。今天,已迈入了后基因组时代。探索人类全部基因的构型和其表达调控已成为当今研究者不断研究和探索的一个重要的内容,对于基因表达的检测和发现显然成为了基因功能研究的一个关键方面。生物芯片技术是运用缩微技术,依据不同分子之间特异性地相互作用的特性,将生命科学中不连续的表达过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以达到对蛋白质、细胞、基因和其它生物组成的快速、准确、大信息量的检测。根据芯片上集成的分子成分的不同,将生物芯片分成蛋白质芯片、基因芯片、组织芯片和细胞芯片。生物芯片技术和以往仪器检测的方法比较起来,存在微型化、高通量、成本低、自动化、防污染等方面的优势。依照生物芯片的合成技术的不同,可将生物芯片区分为原位合成和微矩阵芯片。由于生物芯片技术研究的不断飞跃,美国科学促进会把生物芯片评为1998年的十大科技突破之一,并一致同意生物芯片技术将是人类又一次影响深远的科技革命的说法。当今,最具有应用价值的生物芯片是将基因序列为研究对象的“微阵列(microarray)",也称之为基因芯片(Gene chip)即DNA芯片(DNA chip)。根据载体上的DNA的不同,把基因芯片分为寡核苷酸和cDNA两种芯片。根据用途的不同可将基因芯片可分成指纹图谱芯片、表达谱芯片、毒理芯片诊断芯片、测序芯片等等。30年前,Bains等人就用生物杂交的方法对集成在支持物上的短DNA片段进行序列测定。由于激光聚焦显微技术、照相平板刷印技术、探针固相原位合成技术、双色荧光探针杂交系统的引入,使得基因芯片技术从实验室走向商业化。同时基因芯片技术的提高和进步也得益于分子生物学相关学科的进步和发展以及人类基因组计划(Human Genome Project, HGP)。1992年,Affymatrix公司Fodor领导的小组运用半导体照相平板技术,对原位合成制备的DNA芯片作了首次报道,这是世界上第一块基因芯片。1995年,Stanford大学的P.Brown实验室发明了第一块以玻璃为载体的基因微矩阵芯片。标志着基因芯片技术进入了广泛研究和应用的时期。 由于基因芯片技术的不断的进展,更进一步的发现和揭示了乳腺癌中的分子缺陷,乳腺癌的探究已由原来的细胞水平迈进了分子生物学的范畴,分子诊断逐渐发展成乳腺癌早期诊断的一个尤其重要的内容。利用基因芯片检测不同乳腺癌患者肿瘤组织的基因分型,进而可以从基因水平上鉴别不同乳腺癌患者之间的差异,根据已经得到的乳癌基因表达的情况筛选出有意义的基因组合,从而为乳腺癌的个体化治疗提供新的参考和依据。 因此,利用基因芯片技术分析不同预后早期乳腺癌的差异表达基因,寻找能准确预测乳腺癌预后的基因分型,根据基因分型的不同,可以预测不同乳腺癌患者的预后,尤其是针对早期乳腺癌患者不同的预后,及时的寻找出相应的诊断、治疗和预防的方法,尽最大限度的降低早期乳腺癌患者的死亡率,延长生存时间。本课题对47临床分期相同的早期乳腺癌患者5年的随访,根据预后结果,用Agilent4x44K人全基因组Oligo芯片筛选出不同预后患者差异表达基因,筛选出部分可以预测早期乳腺癌预后的基因,根据预后不同的基因,为临床个体化诊断治疗提供重要的指导和理论基础,可以早期的预测乳腺癌患者个体预后的不同,选择合适的放化疗及生物治疗的方法,进而提高早期乳腺癌患者的生存率。 目的 比较相同病理类型和临床分期预后不同的早期(Ⅰ、Ⅱ期)乳腺癌样本的基因表达差,寻找有显著差异的基因,探索与早期乳腺癌预后有关的基因分型。 方法 用Agilent4x44K人全基因组Oligo芯片对47例早期乳腺癌患者的组织样本,结合其预后好、坏数据,分为对照组和实验组,进行差异基因表达分析;采用Real-time PCR技术,对两组乳腺癌样本中差异表达的基因进行验证。 结果 基因芯片检测分析发现,实验组(预后差)样本比对照组(预后好)样本有差异表达基因126个,其中60个基因显著上调,66个基因显著下调(差异均在2倍以上)。 结论 不同预后的早期乳腺癌样本中,基因表达存在显著差异,早期乳腺癌的预后与这些基因的表达有关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 胡明,李聪前,范慧光;Ⅲ、Ⅳ期晚期乳腺癌手术治疗探讨[J];广州医学院学报;2000年02期
2 沈兴华,方淑珍;炎性乳腺癌八例诊治体会[J];临床外科杂志;2000年01期
3 曾晓华,周洪伟,余永康,刘长安;乳腺癌组织中多药耐药基因产物的表达及其相互关系[J];重庆医学;2002年11期
4 胡国兰,高红芝;无瘤术在乳腺癌术中的应用[J];中国现代医学杂志;2002年12期
5 李翔;乳腺癌手术治疗的进展[J];大理学院学报;2003年03期
6 郭纯先;手术治疗乳腺癌156例疗效评价[J];华夏医学;2003年06期
7 许晓萍;乳腺癌手术患者健康教育的应用及体会[J];河北医学;2003年12期
8 王巍,李现桥,吕志晖;浅谈乳腺癌术后的辅助内科治疗[J];邯郸医学高等专科学校学报;2003年04期
9 陈嘉琦,刘新淑;乳腺癌术后复发44例分析[J];黑龙江医学;2003年01期
10 袁文琴,郑建妹;乳腺癌手术患者的情绪调查及护理对策[J];杭州医学高等专科学校学报;2003年03期
11 金哲洙;乳腺癌血管侵袭的研究进展[J];吉林医学;2003年06期
12 文明星;乳腺癌外科治疗[J];临床外科杂志;2003年03期
13 续哲莉,邢华;乳腺癌的手术治疗[J];中国社区医师;2003年07期
14 单毅;乳腺癌的外科治疗[J];中国乡村医药;2003年02期
15 王海燕,郑春京,孙莉;乳腺癌术后恶心呕吐的预防[J];中国医刊;2003年03期
16 郑宇辉 ,杨发端 ,官国先;乳腺癌血管形成及与侵袭、转移的关系[J];福建医药杂志;2003年06期
17 吴宗平;乳腺癌外科治疗的现代观[J];四川省卫生管理干部学院学报;2003年04期
18 徐匹夫,许人立,王泰来;乳腺癌手术治疗62例报告[J];咸宁学院学报(医学版);2004年02期
19 徐晓军;乳腺癌的外科治疗及进展[J];淮南职业技术学院学报;2004年03期
20 陈小平;乳腺癌的微创诊断与治疗研究进展[J];中国微创外科杂志;2004年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 许锐;;乳腺癌患者的生育问题[A];第十一届全国中医及中西医结合乳腺病学术会议论文集[C];2009年
2 任国胜;;乳腺癌的诊断和治疗进展[A];第十三届中国科协年会第18分会场-癌症流行趋势和防控策略研究研讨会论文集(补充)[C];2011年
3 张东云;;乳腺癌的饮食指导及康复锻炼[A];肿瘤研究新进展学术会议论文集[C];2008年
4 李泉水;;乳腺癌超声研究的现状与展望[A];中国超声医学工程学会第二次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
5 盛立军;;乳腺癌的诊断和治疗[A];山东省第四届“CSCO——山东”首届肿瘤化疗学习班论文汇编[C];2009年
6 朱雅群;田野;季永领;李先明;刘景杰;余德;;中国东南沿海地区可手术乳腺癌治疗模式:1999年和2006年的抽样调查研究[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年
7 李泉水;;乳腺癌超声研究的现状与展望[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
8 赵祥生;唐金海;蒋谦;徐晓明;龚建平;;从我院乳腺癌收治情况谈乳腺癌“三早”的重要性[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
9 孙燕;;乳腺癌内科治疗进展[A];中国临床肿瘤学教育专辑(2001)——中国抗癌协会临床肿瘤学协作中心(CSCO)第五届年会论文集[C];2001年
10 肖胜洛;程静霞;;综合治疗46例乳腺癌的体会[A];第一届全国中西医结合乳腺疾病学术会议论文汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡薇;乳腺癌N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V的活性和粘蛋白1的表达及意义[D];第二军医大学;2008年
2 苗瑞政;乳腺癌血管生成因子的表达和临床意义[D];山东大学;2005年
3 李海平;乳腺癌和区域淋巴结中肾上腺髓质素表达及干预治疗的实验研究[D];河北医科大学;2006年
4 张子豹;人工流产与乳腺癌关系的病例对照研究[D];复旦大学;2003年
5 胡跃;蛋白质指纹图谱和生物信息学在乳腺癌中的研究[D];浙江大学;2005年
6 王红;钙化型乳腺癌基于蛋白质组学技术的血清诊断模型的建立和钙化机制的研究[D];复旦大学;2009年
7 赵刚;15型17β羟化类固醇脱氢酶和1型5α-还原酶在乳腺癌和癌旁组织中的表达[D];吉林大学;2010年
8 梁燕;基于SELDI-TOF-MS技术的乳腺癌血清蛋白质谱研究[D];第三军医大学;2009年
9 聂刚;乳腺癌分子亚型的相关研究:临床特点,危险因素及生存分析[D];吉林大学;2011年
10 范志民;乳腺癌根治术和改良根治术治疗730例乳腺癌的结果[D];吉林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄宏;中医治疗乳腺癌的历史发展与现代价值[D];浙江大学;2013年
2 肖亚苏;基于阻抗测量的术中乳腺癌灶边缘界定电极结构优化[D];天津大学;2007年
3 贾敏;乳腺癌术后复发的临床因素及再治疗的分析[D];广西医科大学;2009年
4 可可;三阴性乳腺癌的临床特征及预后因素分析[D];大连医科大学;2010年
5 狄根红;雌激素受体-β亚型在乳腺癌的作用及其临床研究[D];天津医科大学;2002年
6 郑希民;环氧化酶-2在乳腺癌组织的表达研究[D];吉林大学;2007年
7 姚若全;哨兵淋巴结活检术对乳腺癌患者腋淋巴转移的临床价值[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
8 李嗣杰;外科治疗乳腺癌二十二年回顾分析[D];吉林大学;2004年
9 倪晓梅;围手术期和化疗期乳腺癌患者情绪、应对方式和生命质量的研究[D];中国医科大学;2008年
10 张建军;维、汉族乳腺癌患者临床病理特征对比分析[D];新疆医科大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 崔立新;心理问题 乳腺癌患者不能承受之重[N];中国人口报;2003年
2 赵宝椿;乳腺癌手术后的康复锻炼[N];家庭医生报;2003年
3 黄馨;乳腺癌术后手臂常举抬[N];保健时报;2007年
4 北京中医药大学东方医院肿瘤科 曹阳;乳腺癌不同时期饮食有别[N];保健时报;2007年
5 姚敏;乳腺癌治疗发布最新研究成果[N];中国消费者报;2007年
6 李洪涛;乳腺癌患者注意调整饮食结构[N];中国消费者报;2008年
7 上海中医药大学博士生导师、教授 何裕民;乳腺癌是可以控制的[N];温州日报;2008年
8 李清晨;治乳腺癌一定要毁形吗?[N];科技日报;2009年
9 洪宋贞 广东省中医院乳腺科副主任医师罗秀丽 湖北省中医院肿瘤科副主任医师李明琪 郑州市第二中医院乳腺科主任林毅 广东省中医院乳腺科主任医师张岂凡 哈医大第四附属医院肿瘤中心主任;乳腺癌不是女人专利[N];中国中医药报;2009年
10 本报记者 衣晓峰 通讯员 陈英云 乔蕤琳;女性要高度警惕乳腺癌[N];中国中医药报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978