收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

劳力性热射病致脑损害的临床分析及相关机制的实验研究

刘云松  
【摘要】:研究背景和目的 随着全球气候变暖以及热浪袭击频率和强度的逐年增加,热射病(heatstroke, HS)的发病率明显增加。热射病如未得到正确救治,可能导致严重的多脏器损害,病死率高达10%~50%。脑损害表现是热射病早期的临床特征,患者可有不同程度的脑损害表现,最常见临床表现为昏迷、抽搐、谵妄等。部分幸存者会遗留永久性中枢神经系统损害,发生率可达20-30%。 目前,热射病导致脑损害的病理生理机制尚不完全明确。在遭受热打击后的狒狒和大鼠的脾脏、淋巴组织和肠道等部位发现大量细胞凋亡。细胞实验观察到了热刺激后神经元凋亡的证据。热应激诱导的氧自由基(reactive oxygen species, ROS)水平爆发性增加诱导细胞凋亡已在细胞实验中被证实。但目前对于高热诱导ROS如何介导神经元凋亡的中间机制没有进一步深入的研究报道。核因子κB (Nuclear factor κB, NF-κB)家族参与了多种凋亡相关基因的转录调控。KIM等研究发现大鼠大脑皮层和海马神经元内含有高活性的NF-κB。NF-κB是否也参与了高热导致大脑氧化应激反应以及氧化应激反应诱导的神经元凋亡过程,有待深入研究。 鉴于以上现状,本研究首先对近十年我院收治的劳力性热射病患者的临床资料进行回顾总结,通过分析其脑损害临床特征、神经影像学表现以及其它临床特征,总结热射病脑损害的规律,探讨临床策略。此外,通过建立热打击中暑小鼠动物模型和神经元热打击模型,探讨高热与神经元凋亡的相关性及相关信号通路,以进一步揭示热射病脑损害的机制,为寻找新的防治方法提供理论依据。 第1部分劳力性热射病致脑损害的临床分析 方法 回顾性分析广州军区广州总医院重症医学科2004年5月~2013年9月收治的劳力性热射病病例。根据预后分为存活组及死亡组,前者按出院时是否遗留脑损害后遗症分为痊愈组及后遗症组两个亚组。记录各组患者的人口学资料、起病后最高体温、降温至38.5℃以下所耗时间、脑损害临床表现、头颅MRI或CT检查发现、出院时遗留的脑功能缺陷以及起病早期和入院72小时内其它重要脏器损害情况。 采用SPSS17.0统计软件包对数据进行统计分析。组间计数资料比较采用Kruskal-Wallis H检验,计量资料比较使用方差分析并用Levene法进行方差齐性检验。使用Kaplan-Meier法计算生存组和死亡组30天生存率,组间生存曲线比较采用log-rank检验。P0.05为有显著性差异。将两组间单因素分析有意义的指标引入多因素COX回归,筛选预后危险因素。 结果 共纳入劳力性热射病126例,死亡19例(12.3%),生存107例,其中有15例(11.9%)出院时遗留脑损害后遗症。三组患者入院前最高体温差异无统计学意义(P0.05);死亡组延迟降温(降温耗时:2-4小时)及严重延迟降温(降温耗时4小时)的比例最高,其次是后遗症组,三组患者降温速度差异有统计学意义(P0.05)。不同降温速度对住院30天生存率影响有统计学差异(P0.05)。 三组患者起病后原发意识障碍程度的差异无统计学意义(P0.05),轻度意识障碍、中度意识障碍及重度意识障碍患者住院30天生存率总体比较差异无统计学意义(P0.05)。95例(75.4%)在24小时内神志恢复,18例(14.3%)在2-5d内神志恢复,13例(10.3%)原发意识障碍程度逐渐加重。痊愈组、后遗症组和死亡组意识障碍持续时间差异有统计学意义(P0.05),原发意识障碍持续时间24小时与原发意识障碍持续时间24小时患者住院30天生存率差异有统计学意义(P0.05)。头颅MRI/CT检查发现19例出现脑部病变,其中9例为弥漫性病变,均为死亡组,包括弥漫性脑肿胀7例、大脑半球梗塞并脑疝1例、小脑及脑干梗塞1例。出现局灶性脑内(顶叶、颞叶、小脑)出血6例。出现脑内局灶性点状或片状异常信号4例,均在T2加权成像、FLAIR序列和DWI加权成像呈高信号,点状病变位于侧脑室前角旁白质和放射冠,片状病变位于海马回、海马旁回和岛叶。 起病24小时内发生血小板减少的28例(22.2%),其中死亡组14例,早期出现血小板减少与未出现血小板减少患者生存率总体比较有显著差异(P0.05)。入院72小时内发生弥散性血管内凝血(DIC)26例(20.6%),其中死亡组14例,入院72小时发生DIC的患者较未发生DIC患者的生存率总体比较有显著差异(P0.05)。入院72小时内发生急性肝功能衰竭53例(42.1%),其中死亡组10例,肝脏衰竭对热射病患者住院30天生存率无明显影响。入院72小时内发生急性肾功能衰竭41例(32.5%),其中死亡组8例,肾功能衰竭对热射病患者住院30天生存率无明显影响(P0.05)。入院72小时内发生肺衰竭22例(17.5%),其中死亡组中9例,肺衰竭患者30天生存率明显低于无肺衰竭的患者(P0.05)。24例(19.0%)患者入院前曾有低血压,其中死亡组7例,入院前发生低血压对住院30天生存率有显著影响(P0.05)。入院72小时内22例(17.5%)患者出现休克,其中死亡组12例,发生休克患者30天生存率低于未发生休克患者(P0.05)。入院72小时内发生横纹肌溶解症108例(85.7%),其中死亡组19例,发生横纹肌溶解对住院30天生存率无显著影响(P0.05)。 多因素COX模型分析结果显示影响热射病患者30天生存的危险因素包括休克(RR3.219;95%CI:1.097~9.444;P=0.033).原发意识障碍持续时间24h(RR5.247;95%CI:1.419~18.473;P=0.027)和降温时间(RR3.241;95%CI:1.407~7.466; P=0.0061 结论 热射病患者原发意识障碍程度无明显差别,多数患者会在起病后24小时内意识恢复。原发意识障碍持续时间24h是影响热射病患者30天生存的危险因素。 少部分热射病患者MRI检查发现脑部病变,可分为弥漫性病变(包括弥漫性脑肿胀和广泛的脑梗塞)、脑内出血和局灶性点状或片状变性。点状异常信号位于侧脑室前角旁白质和放射冠,片状异常信号位于海马回、海马旁回和岛叶,这些部位是热射病脑损害的易感部位。 影响热射病患者30天生存的危险因素还包括休克和降温时间。 第2部分高热诱导大脑皮层神经元凋亡的实验研究 方法 1、动物实验 6-8周龄SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组(30只)和热打击组(60只)只。对照组动物始终置于常温下,热打击组置于仿真气候舱内,舱内温度(35.5±0.5)℃,湿度(60±5)%,每30min用肛温表测小鼠直肠温度,当小鼠体温达到41.5℃时,每10min测小鼠直肠温度,小鼠体温达到42℃即停止热打击,置于常温下复温。热打击组按复温时间Oh、3h、6h、12h每次随机抽取12只小鼠分别编为复温Oh、3h、6h、12h组。各组在达到复温时间点后随机抽取6只小鼠处死,于冰上取大脑脑组织,行组织切片及神经损伤病理评分,提取组织总蛋白用于免疫组织化学检测各组小鼠大脑皮质组织内caspase-3的表达、Western Blotting检测各组小鼠大脑皮质组织内p-NF-kB65和活化caspase-3的表达、荧光分光光度计法检测各组小鼠大脑皮质组织ROS含量。各组其余6只小鼠用2.5%戊二醛行活体内固定,固定成功后于冰上取大脑脑组织,用于透射电子显微镜观察。 2、细胞实验 将神经元细胞分为对照组和热打击组,对照组将细胞置于标准37℃、5%C02细胞培养箱,热打击组将细胞置于39℃、41℃、43℃细胞培养箱中进行热打击2h,热打击后继续标准37℃、5%C02细胞培养箱孵育12h。CCK-8法检测各组神经元存活率(热打击组分为39℃、41℃、43℃、45℃组);Hoechst33258荧光核染色法和Annexin V/PI流式细胞术两种方法检测各组神经元凋亡情况;Western Blot分析热打击后神经元细胞活化的caspase-3和p-NF-KB65蛋白表达;DCFH-DA探针标记联合流式细胞仪分析细胞内ROS水平。为了进一步观察NF-κB在热打击诱导细胞凋亡中的作用,研究中使用NF-κB活性抑制剂PDTC(20fμl)预处理细胞,观察PDTC对热打击诱导神经元细胞凋亡的影响,同时分析了PDTC对热打击诱导caspase-3蛋白活化的影响。为证实ROS在热打击诱导细胞凋亡中的关键作用,使用ROS特异性清除剂MnTMPyP预处理细胞,分析MnTMPyP对热打击诱导细胞凋亡、p-NF-KB65蛋白和活化caspase-3蛋白表达的影响。 3、统计学处理 使用Graphpad Prism及SPSS17.0统计软件进行统计分析。服从或近似正态分布的计量资料采用x±s表示,组间比较采用单因素方差分析。计数资料以百分率表示,采用x2检验。P0.05认为差异有统计学意义。 结果: 1、动物实验 1.1光镜下观察各组小鼠大脑皮质组织病理学变化:对照组及热打击后复温0h组,小鼠大脑皮质内神经元形态正常,细胞排列较为整齐、形态完整;复温3h后小鼠大脑皮质出现散在的细胞体积缩小、细胞深染与皱缩,细胞核固缩深染;复温6h和12h后大脑皮质出现多数细胞排列散乱,细胞核染色质固缩深染、核固缩深染。神经病理损伤评分,对照组比较和热打击组复温0h神经元损伤评分均较低,两组间比较无统计学意义;随着复温时间的延长,6h和12h神经元损伤评分逐步增高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。 1.2透射电子显微镜下观察:对照组和热打击复温0h组,小鼠大脑皮质内神经元未检测到凋亡现象,神经元结构清晰完整,核膜完整,核染色质颗粒细致、分布均匀;热打击复温3h、6h及12h组检测到了凋亡现象的存在,凋亡细胞染色质固缩,呈斑状块状聚集于核膜周边,胞浆浓缩,核膜皱折。 1.3免疫组化定位观察各组大脑皮质中caspase-3:对照组与热打击后复温Oh组小鼠大脑皮质caspase-3表达无明显差异;热打击后复温3h组开始出现caspase-3阳性表达,复温6h组其表达明显增多,且持续到复温12h组(P0.05)。 1.4Western Blotting检测各组大脑皮质中活化caspase-3和p-NF-kB65表达:发现对照组小鼠大脑皮质caspase-3基本没有出现活化条带,复温0h开始出现,随着复温时间的延长caspase-3活化呈时间依赖性增强(P0.05);与对照组比较,p-NF-kB65蛋白表达在热打击后3h明显增强,6h表达达到峰值,到复温12h表达有所下降。 1.5各组大脑皮质ROS含量:热打击组复温0h、3h、6h、12h组ROS含量较对照组明显升高(P0.05),其升高趋势在热打击后复温3h达到峰值,随着复温时间的延长在6h和12h有所下降。 2、细胞实验 2.1CCK-8法检测各组神经元存活率:与对照组相比,39℃热打击对神经元活力无影响;但随着热刺激温度的增高(41℃-45℃),神经元的活力呈现进行性下降,与对照组(37℃)比较差异有统计学意义(P0.05)。 2.2热打击对神经元凋亡的影响:Hoechst33258荧光核染色法检测各组神经元凋亡表达,与对照组相比,39℃热打击对神经元凋亡无明显影响,随着热打击温度的升高(41℃-43℃),染色阳性的细胞核逐渐增加;Annexin V/PI流式细胞术检测,发现39℃热打击对神经元凋亡无明显影响,随着热打击温度的增加神经元凋亡逐渐增多,41℃凋亡率为10.19%,43℃凋亡率急剧上升到43.02%,与对照组37℃比较有统计学意义(P0.01)。 2.3Western blot检测凋亡关键蛋白caspase-3及p-NF-KB65的表达:与对照组相比,39℃热打击对其表达无明显影响,随着热打击温度的增加caspase-3及p-NF-KB65蛋白的表达逐渐增强,其表达趋势与神经元凋亡一致。 2.4DCFH-DA法检测各组神经元内ROS表达:与对照组37℃比较,热打击39℃对细胞内ROS水平无影响,随着热打击温度的增加,细胞内ROS水平明显增加,41℃和43℃热打击分别增加了近7倍和15倍。 2.5NF-κB活性抑制剂PDTC对热打击诱导凋亡的影响:与43℃热打击组(41.67%)相比,PDTC预处理+43℃热打击组神经元细胞凋亡率(11.20%)明显减少,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。Western blot检测发现,PDTC预处理后明显抑制了热打击诱导的活化caspase-3蛋白的表达(P0.01)。 2.6ROS特异性清除剂MnTMPyP对热打击后诱导凋亡的影响:与43℃热打击组(47.42%)相比,MnTMPyP预处理+43℃热打击组神经元凋亡率(18.45%)明显减少,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。Western blot检测发现,MnTMPyP预处理后明显抑制了caspase-3及p-NF-KB65蛋白的表达(P0.01)。 结论: 1、热打击可以诱导神经元发生凋亡;神经元凋亡发生与热打击强度及神经元损伤持续时间相关。 2、热打击诱导神经元内ROS爆发性增高作为上游信号,通过中间枢纽NF-κB信号通路,介导了神经元凋亡的发生。 3、热打击后脑神经元发生凋亡可能是介导热射病脑损害的后续发展并导致脑损害后遗症发生的机制之一。 总结: 通过对126例劳力性热射病病例进行回顾性分析后发现:热射病患者原发意识障碍程度无明显差别,多数患者会在起病后24小时内意识恢复。原发意识障碍持续时间24h、休克和降温时间是热射病患者30天死亡的危险因素。少部分热射病患者MRI检查发现脑部病变,可分为弥漫性病变(包括弥漫性脑肿胀和广泛的脑梗塞)、脑内出血和局灶性点状或片状变性。点状异常信号位于侧脑室前角旁白质和放射冠,片状异常信号位于海马回、海马旁回和岛叶,这些部位是热射病脑损害的易感部位。 在建立热打击中暑小鼠动物模型和神经元热打击模型基础上研究发现:热打击诱导神经元内ROS爆发性增高作为上游信号,通过中间枢纽NF-κB信号通路,介导了神经元凋亡的发生。神经元凋亡的发生与一定程度的热打击强度相关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈建,施金龙,施炜,毛伟峰,徐水珠;大鼠创伤性脑损伤后iNOS表达与神经元凋亡[J];中华神经外科杂志;2004年06期
2 何娅;刘文超;赵英贤;;促红细胞生成素对神经系统作用的研究进展[J];陕西医学杂志;2006年07期
3 臧林泉;苏兴文;邱鹏新;伍宇平;颜光美;;一种神经元体外缺氧诱导凋亡模型的建立[J];中国病理生理杂志;2007年06期
4 徐庆怀;何学松;刘冈祝;刘擎;刘雄英;蒋丽丹;吴浩;;亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护研究[J];神经疾病与精神卫生;2008年05期
5 方露玫;张明明;丁悦敏;方玉婷;姚春蕾;张雄;;木犀草素对缺血再灌损伤神经元的保护作用及机制研究[J];中国中药杂志;2010年08期
6 迟先煊,郭畹华,庆宏,陈培熹;过氧化氢诱发小脑皮质神经元凋亡[J];神经解剖学杂志;1998年01期
7 脱厚珍,王天佑,薛启蓂,王德新;神经酰胺诱导小鼠皮层神经元凋亡[J];中国实验动物学报;1999年01期
8 ;脊髓疾病[J];国外科技资料目录(医药卫生);1999年04期
9 戴毅;;红细胞生成素可阻断神经元凋亡[J];国外医学情报;2001年12期
10 万跃明,徐明,蒋从斌,夏春明,何振华,樊启涛,张长云,石浩,余鹏,陈刚;大耳白兔蛛网膜下腔出血神经元细胞凋亡的研究[J];武警医学;2004年03期
11 朱元贵;陈晓春;陈志哲;曾育琦;陈丽敏;彭旭;;第三丁基过氧化氢损伤皮层神经元线粒体并诱导凋亡[J];中国病理生理杂志;2005年10期
12 王虔;程焱;吴伟;梁浩;张瑞珠;;脑源性神经营养因子对谷氨酸损伤神经元保护作用的研究[J];中华老年心脑血管病杂志;2006年01期
13 孙林光;银巍;黄奕俊;苏兴文;邱鹏新;颜光美;;大鼠神经元Arnt2基因cDNA序列的分析[J];中国现代医学杂志;2006年07期
14 薛文;孙正义;王栓科;;缺氧诱导乳鼠脊髓神经元HIF-1α表达和凋亡的体外实验研究[J];中华显微外科杂志;2006年02期
15 郑关毅;陈晓春;杜建;刘昌云;方芳;张静;黄天文;曾育琦;;赤芍801可能通过下调nNOS及iNOS的表达抑制缺血性神经元凋亡[J];中国药理学通报;2006年08期
16 安玉会;毛红丽;马红霞;郭茂锋;;酸性肽对神经元凋亡的抑制(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年17期
17 孔庆霞;孙圣刚;李宪章;曹学兵;何华;;戊四氮诱导大鼠癫痫发作的mGLuR1α表达与神经元凋亡[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2008年03期
18 丁磊;马玉林;马国强;罗小军;殷刚;刘秉锐;马宗军;;甘草酸二铵对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后运动神经元Caspase-3表达的影响[J];中国脊柱脊髓杂志;2008年10期
19 陈江君;刘宁;陈军;谷有全;陈孝伟;;阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌注后NF-κB、表达及神经细胞凋亡的影响[J];中国康复;2009年02期
20 周丽莎;朱书秀;望庐山;;草苁蓉提取物对AD模型大鼠学习记忆能力及神经元凋亡的影响[J];时珍国医国药;2009年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨金升;王彦平;范磊;张明磊;司江华;曲传勇;;艾芬地尔对脑缺血再灌注大鼠AIF表达及神经元凋亡的影响[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
2 涂献坤;杨卫忠;石松生;倪天瑞;陈春美;王春华;文帅;;缺血预处理通过抑制炎症反应和神经元凋亡减轻缺血性脑损伤的初步研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
3 刘曙东;喻良;孙红斌;;EES对SE后海马神经元c-jun表达的影响及c-jun与海马神经元凋亡相关性的研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
4 陈应柱;顾永健;;刺五加皂甙抗一氧化氮介导的谷氨酸毒性神经元凋亡[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
5 王晓良;刘斌;袁辉;石桥桥;王玲;马士平;;中枢钾通道在神经元凋亡、损伤中的作用[A];2008年全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文集[C];2008年
6 刘永红;万琪;李力;;小鼠皮质神经元类缺血/再灌注后氟桂利嗪对胞质内游离钙离子和神经元凋亡的实验研究[A];中国康复医学会脑血管病专业委员会第八次全国学术研讨会论文集[C];2004年
7 王宏涛;孙建宁;徐秋萍;陈国强;;异亚丙级莽草酸对局灶性缺血再灌注损伤致大鼠神经元凋亡的保护作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
8 王宏涛;孙建宁;徐秋萍;陈国强;;异亚丙级莽草酸对局灶性缺血再灌注损伤致大鼠神经元凋亡的保护作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集(第二部分)[C];2002年
9 吴明;朱元贵;潘晓东;林楠;张静;陈晓春;;雷公藤氯内酯醇通过激活Wnt/β-catenin通路减轻寡聚态Aβ1-42诱导的神经元凋亡[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
10 朱从丽;戴冀斌;;鸡胚发育过程中端脑神经元凋亡分布的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨静文;3,5,3’-三碘甲状腺原氨酸对有丝分裂后神经元的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
2 钱巍;APC-Cdh1在体内外神经元缺氧损伤中的作用[D];华中科技大学;2010年
3 孙红振;火器性周围神经损伤后神经元凋亡的特点及CIDE-B基因对神经元凋亡的影响[D];第三军医大学;2004年
4 陈奕芝;β-细辛醚对谷氨酸所致神经元损伤的保护作用[D];广州中医药大学;2007年
5 吕欣;磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C和膜整连蛋白β4调节神经元存活与凋亡的机理研究[D];山东大学;2008年
6 高玲;神经钙调蛋白在促炎细胞因子诱导神经元凋亡中作用机制[D];吉林大学;2005年
7 金宏伟;电压依赖性钾通道在老年痴呆相关的神经细胞凋亡中的作用研究[D];中国协和医科大学;2002年
8 徐震;MAPK信号通路在NO介导的脊髓继发性损伤中的作用[D];第四军医大学;2006年
9 周晓琳;78kDa葡萄糖调节蛋白的神经元保护作用研究[D];上海交通大学;2007年
10 崔梅;缓激肽受体在脑缺血再灌流中的作用研究[D];复旦大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 熊盼;Cdk5对CLIC4的磷酸化调节机制及其在神经元凋亡中的作用研究[D];厦门大学;2014年
2 吴宜娟;一氧化氮和谷氨酸在内皮素-1诱导神经元凋亡中的作用[D];暨南大学;2003年
3 苏红玲;Rb/E2F1调控B[a]P致神经元凋亡的机制研究[D];山西医科大学;2014年
4 苗海锋;内皮素-1诱导培养大鼠大脑皮质神经元凋亡的初步研究[D];暨南大学;2002年
5 李亚娟;Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对甲醛炎性痛大鼠脊髓神经元凋亡及痛觉过敏的影响[D];河北医科大学;2010年
6 楼敏;地塞米松对大鼠脑缺血再灌后神经元凋亡的影响[D];浙江大学;2001年
7 黄世文;牛磺酸对锰致大鼠前额皮质及海马神经毒性损害的干预机理研究(一)[D];广西医科大学;2007年
8 黄小平;黄芪总苷和三七总皂苷配伍抗脑缺血再灌注后神经元凋亡及线粒体途径机制的研究[D];湖南中医药大学;2010年
9 杜晓萍;细胞周期抑制剂对癫痫大鼠神经元凋亡及星形胶质增生的影响[D];山西医科大学;2007年
10 廖常莉;p63与大鼠全脑缺血后神经元凋亡的关系及肢体缺血后处理的干预[D];泸州医学院;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;黄芪有抗大鼠急性脑缺血后神经元凋亡作用[N];中国中医药报;2005年
2 王 键 郜 峦;不同中医治法对脑缺血-再灌注损伤大鼠自由基和神经元凋亡的动态比较研究[N];中国中医药报;2004年
3 ;老年痴呆症研究成热点[N];中国医药报;2002年
4 罗翌 叶烨 梅广源;益气活血法治疗急性缺血性脑卒中[N];中国医药报;2005年
5 马彦红;中风患者何时施针灸[N];家庭医生报;2007年
6 仲海亮;积雪草可治肌萎缩侧索硬化症[N];中国医药报;2006年
7 马艳红;探索AD分子机制 全面开展“靶点”研究[N];中国医药报;2003年
8 冯琳 王伟;口腔颌面部战创伤研究获突破[N];中国医药报;2005年
9 罗刚;小儿惊厥预后并非绝对良好[N];健康报;2003年
10 徐亚静;首都医科大学研究发现:HBO对半胱天冬酶-3有影响[N];中国医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978