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消化道肿瘤肿瘤坏死因子受体表达及其释放的研究

高蕾  
【摘要】: 目 的:消化道肿瘤严重威胁人类健康,由于其临床表现不典型,因此不易 早期发现,给早期诊断和及时治疗带来一定困难。目前常用筛检肿瘤的手段 是人群的定期体检,包括胃肠镜、B超、CT等物理检查和各种酶类、肿瘤 标记物等生化检测。TNF在肿瘤中杀伤肿瘤细胞的作用倍受学术界重视, 但有关TNFRs-sTNFRs在肿瘤中表达的研究却甚少,尤其有关热疗、放疗 治疗对sTNFRs的影响等未有系统而详尽的报道。为进一步了解消化道肿瘤 的异常免疫状态,探讨TNFRs-sTNFRs系统水平与肿瘤病人异常免疫状态 间的关系,本文将对此展开系统研究。 方法: (1)ELISA法检测肝癌患者血清、腹水sTNFRs水平、经皮多弹头自动控 制射频热切除术(MARFTA)治疗前后sTNFRs变化及培养上清中sTNFRs 测定; (2)流式细胞仪技术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)TNFRs表 达情况; (3)免疫组化法检测消化道包括肠、胃、肝癌组织中及X线照射前后细胞 TNFRs表达; (4)用5GyX线照射肝癌约胞HepG2和大肠癌细胞Lovo细胞后,HE染 色和FCM检测凋亡率。 结果: (1)肝癌患者血清及腹水中sTNFRs水平均较正常对照组血清中sTNFRs 显著增高。且血清sTNFRs与腹水sTNFRs水平显著相关(γ=1.000, P=0.000)。血清和腹水中sTNFR-p75水平均显著高于sTNFR-p55水平。 MARFTA治疗后sTNFRs均显著低于治疗前sTNFRs水平。 (2)无论正常对照组还是肝癌组在IL-2处理48h后,PBMC TNFRs表达 率均显著高于空白处理组和未培养组(P<0.05),而空白处理组TNFRs表达率 仅略高于未培养组(P>0.05)。肝癌病人未培养组中PBMC TNFR-p55表达率 兄著<于小常人(*0刀5)口经过且一2共同培养硼h后亥I*F卜p5*表达【二岁DfDZ 宇勺研著低刁丁常对只乡,而**FM* 表达与正常组无显著差别。同儿1$ 测士养上清,月癌组1卜2处理48h后S TNTNP卜p55和s TNTNF凡p* 水平均研著 而jn六只照组。当将P**C TNTNP又p55、TN PM* 分别与培养-*肖液’-I’ S厂INFR 一p55丸STNFAp75两不形式p膜1关型走-l司一溶型进千相关分村l队发 现腆型受体与可溶型受体问呈负相关。在IL一2共同培养刺檄厂,1。**C ”I”NFR-p75。STNFR-p75水平显著高十 TNFRp55、STNFR-p55。 门)两巾;I受体 TNFR巾55和 INFRq75在肿瘤组织的表达显著高十在癌旁 纠织’上的表达回 同〕癌旁中表达又显著高于万常乡织口****p55 T匠I*** 1刀5的表达无显著相关性。在大肠癌中TN F*q55表达多少与浆膜浸涧程度 和淋巴结转移中呈负相关,即当肿瘤浸及浆膜或有淋巴结转移时**F*q55 表达低于未浸及浆膜或无淋巴结转移者。而INFR巾75仅与淋巴结转移与否 呈负柏关,即当淋巴结发生转移时TN P*下乃表达相对较少。更有意义的是, *ukSA、B朋飞**k表达显著高于*冰eSC聊上*N厂k表达量。对*N厂仇 在胃癌·。【-。表达进一步研究发现,虽然TN F*s表达与浆腆浸涧及淋巴结转移 未见显著州关,但**F*s表达与肿瘤分化程度却呈显著负州关,以IT*F*- p55及丁入卜卜叶5在高。。P分化胃癌中的表达显著高于在低分化胃癌。上表达。 此纤till与”厂NFRS在大肠癌中表达有共同趋势,即恶性程度高的JJ。!馏,!-ITNFRS 灰达低。 ()应川X线照射*印*2和**v。窒1胞24h后,’r*F*表达最七著较 一上 强,士养上清*1。s IN1NF*显著低于照身肖。*E染色显示X线照 自后Hep*2 *L。v。兰川刀亡细胞数增多。应用流式细厂仪分析至示,X线照 射后1*pC2 和卜。v。纠1胞均出现明显的凋亡峰。 结论: (1)川夹B患者1血清及腹水中s**F*s水平的变化反阶D川茁病人的异常免疫 状态。*AR*TA治疗前后一厂NFRS水“1‘的变化反映病人经y治疗后Jll啊汀山 变化。怕况。加清*TN*mM卜的检测可作为判断***卜TA疗效的指标。 Q)1卜一刀刀以激活*8*C,促进丁**k表达及诱导s丁**k广”十。体外 培养1”**C在门痴组·上其培养__L清叶。增高的。丁溶们Zs*N卜k。-】能火洲H‘ I’BMCJJR]二 TNFRS的脱落口 INFRp75 在介导 TNF在免疫gill厂灿龟LI]川-I-I一什多-IJ -3- 起刃蛮{ 号口1月让体夕肝癌病人**C hhFk及*IN F抽系纣变占悄况可* 以反侧川w.b人体内的异常免疫状态。 (3)*mFm在胃肠组织表达对预测肿瘤发生,判断JJ小短恶性程度、分化积 度、浸涧深度,预测淋巴结转移趋势有一定价值。 (4)X线照财后U…南驯胞TN FRs表达的地强、sl*PR水丫降低,问时什 人扣川包凋广,提示X线照射可能通过增加川脯细胞*TN*R表达同时减少 S”RNFRS产生而介导肿瘤细胞凋亡作用。


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