收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

VEGF及其基因表达载体在TMR中促血运重建的实验形态学研究

张晓东  
【摘要】: 透室壁性激光心肌血管重建术(TMLR)的基础研究已有较大进展, 目前已试用于临床,但其效果不尽人意,争议颇多。特别是TMLR术后 激光心肌管道内的形态学结构及其演变规律、血管的再生与重建、TMR 的作用机制、治疗效果及临床应用价值等一直存在着较大的争议和相互 矛盾,很多基础性问题尚未解决,基础研究明显滞后于临床应用。随着 近年来分子生物学的迅猛发展和基因工程技术的日益成熟,为TMR的进 一步实验研究和临床应用开辟了一个崭新的前景。有关TMR的实验研究 及临床应用,以往均采用单纯性激光打孔方法,本课题在进行激光TMR 的同时,又创建了机械性TMR方法,并在两者的心肌管道内应用了血管 内皮细胞生长因子(VEGF)及VEGFcDNA质粒,促进了管道内新生血管 的形成,并减轻了管道纤维化的程度。从而为探讨TMR管道内血管生成 的形态学依据及其作用机制,为TMR的临床应用提供形态学实验基础和 技术准备。 材料和方法 1.采用成年家兔30只,为A组。利用CO_2激光照射心脏的左室前壁, 形成透室壁性激光心肌管道。应用组织学方法于术后不同时期观察管道 内血管及纤维结缔组织的形成等形态结构的变化,以及管道内组织学和 病理学的演变规律。 2.采用成年家兔24只,为B组。利用空心钻头在左室前壁施行机械 性TMR,术后不同时期与A组进行组织学对照观察。对比两组管道内新 生血管的数量、密度及管道最终纤维化的宽度等形态结构,以便寻求 TMR的最佳方法。 3.采用成年家兔 40只,其中 20只为 C组一另 20只为 D组。两组分 别进行激光TMR和机械TMR的同时,在两组的心肌管道内均注射血管内 皮细胞生长因于(VEGF)。术后不同时期对照观察 VEGF对两组管道内血 管生成的促进作用,包括乙D两组之间和C、D与A、B两组之间的组 织学对照观察。同时对照观察管道内纤维化程度等形态结构的变化。寻 求结合分子生物学技术来促进心肌管道内血管再生与重建的、更为有效 的综合性TMR技术和方法。 4.采用成年家兔24只,为E组。进行机械TMR,同时向机械性心肌管 道内注射VEGFCDNA质粒。术后不同时期与A、B、C、D各组进行组织学 对照观察。通过新生血管数量。密度及其它形态结构等,观察质粒表达 后对管道内血管生成的促进作用及管道纤维化程度的影响。为TMR结合 基因治疗提供形态学实验基础。 结 果 1.激光TMR术后数秒至数十秒内,激光心肌管道便因凝血而闭塞。随 后管道内的血凝块机化,形成了许多新生的毛细血管,并逐渐演变为管 径较大的小血管。术后不同时期,管道内新生小血管的数量和密度均不 同,术后2周为7.23土0.48条/10X4倍,术后4周为4.92土0.24条/10 X4倍,术后6《周为2.22t0.33条八0X4倍。各期之间的血管数量。 密度均具有极其显著性差异(P<0.0001),术后2周是管道内小血管形 成的高峰期。2周后,随着纤维结缔组织的增生,管道内小血管逐渐萎 陷、闭合、消失,激光心肌管道最后以纤维性瘀痕愈合。术后6E周激 光心肌管道纤维化的宽度为 1.73士 0.05mm,恰好等于原始激光心肌管 道与管道周围热损伤带的宽度之和。 2.机械性TMR术后数十秒,管道同样因凝血而闭塞。同激光TMR组相 似,机械性心肌管道同样经历了凝血、机化及纤维化等病理性修复过程, 但在机化的过程中机械性心肌管道内新生血管的数量较多、密度较高。 术后2周为8.41 to.59条/10X4倍,术后6-8周为3.31士0.57条/10 X 4倍,与同期的激光 TMR组相比均具有显著性差异mm.of);术后 6E周,机械性心肌管道纤维化的宽度为 0.67土 0.03turn,且纤维化仅局 限于原始的机械性管道内,未侵及管道周围的心肌组织,与同期的激光 -2- 组相比,具有极其显著性差异O<0.0001)。 3.TMR管道内应用血管内皮细胞生长因子(VEGF)后。血管生成的数 量和密度明显增加。术后2周,檄光组和机械组分别为17.84土0.25条 八0X4倍和24.20士0.98条八0X4倍;术后6-8周,则分别为8.93士 0.24条八0 x 4倍禾11.08士0.96条/OX 4倍。不仅应用VBGF的两组之 间具有显著性差异叩m.01人而且应用VEGF-的两组与同期未应用VmF 的单纯性WR各组之间更具有极其显著性差异仔州.0001人应用VEGF 术后6E周,激光管道和机械管道纤维化的宽度分别为1.66土0.04_n 和 0.66土 0.04M,两组仍具极其显著性差异(P(.001)。 4.机械TMR管道内注射V肛FCDNA质粒后,管道内血管的生成有所增 加。术后2周,新生血管的密度为12,46士0.49条八OX4倍;术后6干 周为6.13土0.24条/10X4倍。与同期的单纯性mR组(A组或B组) 和管道内直接应用V队F组K组或D组)相比,均具有极其显著性差 异性(P<0.0001)。术后6-8周,管道纤维化的宽度为0.69士0.03mm, 与同期单纯性机械WR组闭组)和应用 VmF的机械wR组(D组)相 比,没有差异。 结 论 1.激光T


知网文化
【相似文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张晓东;VEGF及其基因表达载体在TMR中促血运重建的实验形态学研究[D];第一军医大学;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978