大黄（庶虫）虫丸干预肾间质纤维化及TGF-β_1表达的实验研究

【摘要】： 目的及意义： 肾间质纤维化是所有肾脏疾病慢性发展的最终结局，它不仅是终末 期肾病的病理表现，同时也是导致慢性肾衰竭的重要原因。在肾脏疾病 中，出现肾间质纤维化意味着肾脏疾病将慢性进行性发展，而肾小球的 损害并无此预示意义。晚期肾间质纤维化是不可逆的，但在早期及时发 现并治疗，可减轻纤维化程度同时改善肾功能。鉴于肾间质纤维化并无 特异西药治疗，我们应用大黄 虫丸对腺嘌吟肾衰竭大鼠肾间质纤维化 进行治疗干预，同时检测与肾间质纤维化关系最为密切的因素——TGF- β_1在肾组织中的表达，探讨大黄 虫丸对肾间质纤维化的改善作用及作 用机制，为临床应用提供理论依据。 材料和方法： 健康雄性SD大鼠50只，体重225～250g，所用动物适应性饲养一 周后喂食0.5％腺嘌吟饲料，自由饮水。造模8周后统一尾尖取血，检测 血清肌酐、尿素氮，达到氮质血症的大鼠为造模成功。随机分为中药治 疗组、西药治疗组和模型对照组，分别给予大黄 虫丸、氯沙坦和蒸馏 水灌胃。于治疗后的3周、6周尾尖取血检测血清肌酐、尿素氮，代谢 笼收集24h尿并检测24h尿蛋白。PAS、Masson染色，评定肾间质纤维 化程度。原位杂交检测肾组织TGF-β_1mRNA和免疫组化检测TGF-β_1 蛋白表达。 实验结果： 腺嘿吟造模8周后血肌酌达到尿毒症水平，随机分组后中药组、西 药组和模型组血肌酥 尿素氮、24h尿蛋白水平没有显著性差异…＞ 0．05）。中药组和西药组治疗3周、6周后，血肌配 尿素氮、24h尿蛋 白有了不同程度的降低，模型组无明显变化，两治疗组与模型组比较有 显著性差异（P＜0．001），中药组比西药组降低更显著（P＜0．of）。PAS。 Msson染色可见模型组动物肾小管灶性萎缩，细胞外基质明显增加，肾 小球无明显变化。光镜下对肾间质纤维化程度半定量计分，正常组、对 照组、中药组、西药组各组计分分别为0．l士0．l、l．7士0．3、0．4士0。2。 0．6士0．2。模型组与正常组比较，Masson染色可见细胞外基质明显增加， 肾间质纤维化明显（P＜0刀01〕，而中药、西药治疗组与模型组比较细胞 外基质明显减少，肾间质纤维化明显减轻（P＜0刀1）。中药组与西药组比 较细胞外基质减少，肾间质纤维化程度轻（P＜001）。正常对照组＊＊L pl蛋白表达极其微弱，模型组肾小管上皮细胞阳性表达，肾小球细胞 TGF－pl蛋白表达极其微弱；两治疗组肾小管上皮细胞阳性表达，肾小 球表达微弱。半定量结果两治疗组对比模型组TGF－pl i白表达量明显 减少（P＜0刀01），两治疗组间w比中药组减少更明显 0＜0刀1）。＊＊卜 pllnRNA表达位点、表达半定量结果与TGFpl蛋白表达结果相符合。 但两治疗组间无明显差异（P＞0刀5）。 结论： －3。 大黄蟹虫丸能明显改善慢性肾衰竭大鼠肾功能、减少试验性大鼠肾 间质纤维化面积，下调 TGF－pl蛋白和 TGF－pl InRNA在肾组织的表达。 其抑制TGF pl表达的作用可能是抗肾间质纤维化的主要机制，同时减 少尿蛋白，改善肾脏血液循环也可能起了一定的作用。