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肝癌氩氦冷冻治疗的实验与临床研究

彭秋平  
【摘要】: 目的:探讨影响新型冷冻机(氩氦刀)疗效的因素及提高冷冻疗效的联 合模式;观察氩氦刀其独特冷冻热疗方式的抗肿瘤免疫效应。 方法:(1)通过氩氦刀对体外培养的人肝癌QSG-7701细胞予不同 速度(快冻或慢冻)、低温(-40℃以下或以上)和冻融周期(1个或2 个周期)冷冻处理,观察冷冻后即刻细胞死亡率和48小时后细胞生长抑 制率。(2)对H22鼠肝癌皮下移植瘤行根治性冷冻(Ⅰ组)、姑息性冷冻 (Ⅱ 组)、单纯高渗盐水注射(Ⅲ组)、姑息性冷冻联合高渗盐水治疗(Ⅳ 组),观察术后皮下瘤大小、小鼠生存期。(3)对H22鼠肝癌皮下移植 瘤行冷冻热疗、手术切除,检测术后1周脾细胞增殖指数,观察对侧再 接种成瘤情况。(4)对32例不能手术切除的肝癌患者予1—3个周期肝 动脉栓塞化疗后,行经皮穿刺冷冻治疗,观察联合治疗后肿瘤大小、血 肿瘤标志物值、外周血T细胞亚群及NK细胞水平、1年生存率及不良 反应。 结果:(1)冷冻温度低于-40℃时,细胞死亡率可达100%。冷冻温 度为-20℃—-40℃时,细胞死亡不完全;快速冷冻细胞死亡率较慢速冷 冻高;重复冻融后细胞死亡率增加;冷冻后即刻台盼蓝法检测的细胞死 亡率比冷冻后48小时MTT法检测的细胞生长抑制率高。(2)术后第28 天,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肿瘤体积抑瘤率分别为99.7%、83.6%、78.9%、 99.3%,均能显著抑制肿瘤生长。Ⅰ、Ⅳ组分别与Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ(肿瘤对照) 组比较均有显著性差异(P<0.05),但Ⅰ、Ⅳ两组间无显著性差异(P>0.05)。 按肿瘤接种后第90天计算,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组平均生存期为87.3、 63.3、60.1、81.1、52.8天。(3)处理后1周,冷冻热疗组脾细胞增殖指 数明显高于手术切除组和肿瘤对照组。再接种10~5个癌细胞/只时,冷 冻热疗组成瘤率明显低于手术切除组、肿瘤对照组,有显著性差异 (P<0.05和P<0.01)。(4)临床上综合治疗后1个月,综合治疗的肝肿 块50%以上缩小率为36.3%(12/33),单纯肝动脉栓塞化疗的肝肿块 50%以上缩小率为25.0%(2/8)。血AFP和CEA值均有不同程度下降。 冷冻后 1周,外周血 CD4、CD4/CDS比值及NK细胞水平升高,CDS 值下降。术后不良反应轻。l年生存率为600%(l/30人 结论:(厂40’C以下低温可完全杀灭人肝癌细胞,快速冷冻、重复 冻融有利于提高冷冻细胞死亡率。(2)冷冻联合高渗盐水注射可提高肿 瘤根治率。(3)氖氦刀冷陈热疗可诱导机体的抗肿瘤免疫力。(4)经皮 穿刺冷冻联合肝动脉栓塞化疗是不能手术肝癌的一种有效、安全的综合 治疗模式。


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