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rhIL-11动员小鼠外周血造血干/祖细胞的实验研究

蒋祖军  
【摘要】: 目的:研究rhIL-11联合rhG-CSF和(或)环磷酰胺对小鼠外周造血干/祖细胞的动员作用。方法:64只C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组(A组 注射生理盐水)、rhIL-11组(B组 250ug.kg~(-1).d~(-1))、rhG-CSF组(C组250ug.kg~(-1).d~(-1))和rhIL-11+rhG-CSF组(D组 剂量同前),皮下注射d1~7;另将48只小鼠随机分为4组:正常对照组(E组)、CTX组(F组)、CTX+rhIL-11组(G组)和CTX+rhIL-11+rhG-CSF组(H组);0天(d0)F、G、H组腹腔注射CTX200mg/kg,d1~15皮下注射rhIL-11或rhIL-11+rhG-CSF,各自剂量和方法同前。观察各组不同用药时间小鼠外周血WBC、Plt计数、CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的数量、CD34~+、CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD22~+细胞比例变化及脾脏CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的数量、CD34~+细胞比例变化。结果:1、B组外周血WBC和Plt计数均于d7达一较高值,明显高于A组(P值分别为0.003、0.001);C、D二组WBC计数于d5达峰值,显著高于A组(P值均为0.001),二组之间也有明显差异(P=0.04);B、D二组Plt于d7比用药前升高约30%,均明显高于A组及C组。2、在d5、d7,B、C、D三组的CFU-GM、CFU-MK、CFU-E数目均高于A组,C组的CFU-GM、CFU-MK和CFU-E、D组的CFU-GM和CFU-E均于d5天达高峰值,与A组相比差异显著(P值均少于0.05),而B、D组的CFU-MK于d7达较高值(P值均为0.001),与C组也有显著性差异(P值分别为0.001、和0.02)。B、C、D三组脾CFU-GM、CFU-E均于第3天达一高值,同时B、D两组脾CFU-MK显著增高,第5天达高峰值。3、A组CD34~+细胞比例为0.16%~0.2%,B组d5、d7分别为0.98%、1.74%;而D组于d5达5.40%的高峰值,显著高于A组(P=0.001),与B、C二组也有明显的差异(P值分别为0.001、0.03)。A组小鼠脾细胞CD34~+细胞比例约为2%,实验结果表明rhIL-11或rhG-CSF都能提高脾细胞CD34~+细胞比例,但随着用药时间的延长,所占比例逐步下降并趋于正常水平。4、B、C、D三组CD3~+细胞比例明显增加,B组在d3达峰值后呈逐渐下降,而C、D二组呈逐步上升趋势,正常小鼠CD4~+与CD8~+的比值为2.63~2.77,而在CD3~+细胞比例提高的同时,B、D二组CD4~+与CD8~+的比值明显下降,随后逐 步回升至同期对照组水平,C组CD4”与CDS+的比值逐步下降,于ds 达最低值,随用药时间的延长有回升趋势。5、正常小鼠WBC中约有 18.18O~19.35O表达 CD22,B、C、D H组CD22“细胞比例都有增高, 于ds 达一高峰值,分别为(21.96土2.71)%、(24.59上2.83)%、 (24.ill3.12)%,与 A组比较 P值均<0.05,C、D h组数值也明显高于 B 组(P值均<0.05)而 C、D二组之间没有显著性差异。6、F、G、H组 WBC计数均于d3降至最低值,G组与F组之问没有显著性差异0二0.325)、 而 H组与 F组之间差异显著(P=0.007),三组 WBC计数恢复至用药前 水平的时间分别为诅、dl和 dg,G、H组快于 F组,而 H组最快并 超过正常水平;F组n于 dll降至最低值,G、H两组于 dg降至最低 值,降低的程度均少于F组①值分别为0.002、0刀03)且低谷持续的 时间短暂。7、F、G、H三组造血集落数量均有所增加,其中H组增加 最为明显,在含有 rhIL-11的两组 CFU-MK数量增加尤为显著,明显高于 同一时间的 E、F组(P值均<0.01)。8、F组在 d7、dg CD34”细胞比例 分别为 0.34%、0.4%,G组为 0.51%、0.81%,而 H组为 1.52%、3%,明显 高于E、F组叩值均州.05),同一时间G、H两组之间也有显著性差异 叩值分别为 0.036、0.003)。 结论:1、rhIL-11 能提高正常小鼠外周血白细胞和血小板总数,加速 环磷酚胺骨髓抑制小鼠外周血白细胞和血小板的恢复;2、rhIL刁 1能动 员小鼠骨髓CD34”细胞进入外周血,提高外周血CD34”细胞比例,明显增 加三系造血集落形成,特别是增加 CFU-MK数量,为移植后血小板的快速 重建提供了实验理论依据;3、rhILll联合 hG-CSF动员的 CD34”细胞 比例和 CFU.GM、CFU-E、CFU-MK的数量明显高于单用 riL-11或 rhG-CSF,说明两者具有协同作用。而 rhIL.11联合 rhG-CSF及 CTh的 动员方案也具较好的动员能力,为临床应用提供了理论依据。4、rhIL* 或叩G-CSF动员小鼠田C的过程是一个将mC先动员进入脾脏再释放入 外周血的过程;5、rhIL-11能促进 CTX骨髓抑制后小鼠 CD4”与 CDS” 比例的恢复,能提高正常小鼠外周血B淋巴的比例,但其作用强度低于 rhG.CSF。


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