收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱动态变化的研究

刘成龙  
【摘要】: 脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是骨科临床工作中常见的伤病,致残率很高。但迄今为止,有关脊髓损伤的研究尚无突破性进展,临床上对脊髓损伤患者的治疗收效甚微,绝大多数患者仍无法逃脱肢体伤残的命运。目前的研究一般将脊髓损伤分为原发性及继发性损伤两个阶段,前者是指脊髓在暴力作用瞬间所受伤害,这是依客观而定,无法随主观改变的一个阶段;后者系在此基础上发生的一系列复杂的生理生化过程,进一步加重了原有的组织损伤,导致了脊髓损伤的难治性。 目前尽管存在着多种理论或假说,但它们都只是从某一个或几个方面来阐述继发性脊髓损伤的机制,虽有不同作者提出了许多相应的实验性治疗措施,其效果是有限的,尚无实质性的突破。究其原因,可能是研究方法、研究对象的局限性与疾病发展过程中多因素参与的复杂性之间的矛盾所致,以上所述的各种理论可能是疾病发生过程的各个方面,它们应该构成一个相互联系的有机整体,而以整体的观念来探讨继发性脊髓损伤的发生机制,可能给我们的临床研究以新的启发。在人类基因组计划的不断深入开展过程中,科学家们日益迫切的需要一种能以大规模、高通量的方式,来研究数以万计的基因在各种生理状态下表达的状况,而基因芯片技术的诞生为我们提供了理想的研究工具。 利用基因芯片可对来源于不同个体(正常人与患者)、不同组织、不同病变、不同刺激(包括不同治疗手段)的组织细胞内的mRNA或其逆转录产物cDNA,通过以不同的荧光标记(如将来源于正常组织的cDNA标记为绿色,病变组织的cDNA标记为红色),不同的cDNA结合到芯片的不同位点时,将表现出绿或红色的信号,如两类cDNA结合到芯片的同一靶位时则可表现出黄色信号,且根据两类cDNA量的差异,所得信号的色彩深度亦有不同,这些信息都可通过专用的荧光扫描仪及相应的计算机软件分析获得,从而探知不同状态下组织细胞的基因表达谱。基因表达谱是基因功能的具体形式,通过对基因表达谱的研究可揭示基因与疾病发生、发展的内在联系。本题拟用基因芯片的实验方法检测大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱的变化,了解脊髓损伤后发生差异表达的基因,在基因水平上了解继发性脊髓损伤的发生、发展规律。 本研究分为以下几个部分: 一、表达谱基因芯片的制备:经过cDNA文库中克隆挑取、PCR扩增制备 探针,然后将探针点样于硅化玻片上,再经过点样后水合、紫外交 联等步骤,制成表达谱基因芯片。 二、动物实验:封闭群健康成年SD大鼠27只,随机分为:无损伤组及 损伤后2、48h组,每组3只(实验重复3次)。依Nystrom法后路 压迫脊髓(35.0gx 10min),建立脊髓损伤模型,无损伤组仅行脊髓 暴露而不致伤脊髓。 三、依不同的实验分组,腹腔麻醉、无菌操作下取出伤段或相应部位脊 髓组织,经过RNA提取、荧光标记制备探针、芯片杂交和洗片、芯 片扫描及计算机软件分析等过程,测定脊髓损伤后不同时期组织基 因表达谱。 结果: 与正常组比较,在脊髓损伤后2h,共有45条基因的表达发生了明 显变化,其中表达升高的有22条,表达下降的有23条;而在损伤后48h, 共发现差异表达基因185个,其中表达升高的有35条,下降的有150条, 发生差异表达的基因主要编码细胞内信号传导、蛋白翻译合成、能量代 谢相关蛋白等方面。 结论: 1基因芯片技术在继发性脊髓损伤的研究中具有可行性。 2脊髓损伤后不同时期均有多种基因发生差异表达,证实了继发性脊髓 损伤的发生、发展是一个多基因参与的过程。 3脊髓损伤后,以编码细胞信号传递蛋白、蛋白翻译合成及能量代谢相 关蛋白的基因发生差异表达为主。 4脊髓损伤后表达抑制的基因多于表达升高基因。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 Bohlman HH;张志玉;;脊髓损伤的前路减压和融合术[J];国际骨科学杂志;1982年04期
2 黄晓琳;;脊髓损伤综合康复的临床疗效观察(附2例报告)[J];中国康复;1988年04期
3 方华才;;脊柱骨折193例临床分析[J];交通医学;1991年03期
4 何扬子;电针治疗颅脑脊髓损伤51例临床观察[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);1994年02期
5 胡侦明,劳汉昌,张宝华,舒钧;三七总皂甙治疗早期脊髓损伤的实验研究[J];中华骨科杂志;1996年06期
6 胡文辉,刘娜,孙秀君,任军,杨慧芬,任民峰;L-NAME加重强啡肽致脊髓损伤作用[J];中国神经科学杂志;1997年03期
7 曹晓建,罗永湘;神经生长因子对脊髓损伤后脊髓组织c-fos蛋白表达的影响[J];南京医科大学学报;1998年03期
8 陶之理,李瑞午,王进堂,蔡虹,冯世平;电针及药物治疗大鼠脊髓损伤的研究[J];中国针灸;1998年09期
9 何仲佳,刘伟民,莫新发;胸腰椎骨折合并脊髓损伤37例诊治体会[J];广东医学;1998年12期
10 ;脊髓[J];国外科技资料目录(医药卫生);1998年02期
11 孔抗美,周强,齐伟力;慢性脊髓损伤动物模型的研制(摘要)[J];河南医科大学学报;1999年01期
12 曹晓建,罗永湘;大鼠脊髓损伤后一氧化氮合酶含量的变化及其意义[J];南京医科大学学报;1999年03期
13 胥少汀!100700,刘树清!100700,孙天胜!100700,刘智!100700;扩大半椎板切除术治疗颈脊髓损伤[J];中华外科杂志;1999年10期
14 ;不完全性脊髓损伤的主要特征[J];现代康复;1999年09期
15 干阜生;李超;赵致良;乔济民;张以恺;;颈前路减压治疗脊髓损伤36例临床分析[J];工企医刊;1999年03期
16 蒋赞利,陈君长,王坤正,赵明;亚胺环己酮与甲基强的松龙治疗大鼠脊髓损伤的初步研究[J];西安医科大学学报(中文版);2000年02期
17 秦晓东,王道新,李翔,金正帅;急性无骨折脱位型颈髓损伤的机制与治疗[J];临床骨科杂志;2000年02期
18 王艳,黄淑兰,郭嫦凤;腰椎骨折脊髓损伤手术的护理配合[J];齐齐哈尔医学院学报;2000年03期
19 孟宪文;综合治疗腰椎骨折合并脊髓损伤的临床体会[J];现代康复;2000年14期
20 兰丽康,季乃军,李颖异;颈椎管狭窄60例分析[J];右江民族医学院学报;2001年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈亚平;杨延砚;吴同绚;张巧云;;脊髓损伤的综合康复治疗疗效分析[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
2 王兴盛;;初探手术加补脑膏治疗脊髓损伤5例[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年
3 景小花;张云;;探讨运动疗法在脊髓损伤术后康复中的临床意义[A];首届全国中西医结合骨科微创学术交流会暨专业委员会成立大会论文汇编[C];2011年
4 周治来;陈银海;闵少雄;;康复训练对脊髓损伤大鼠外源性移植的骨髓源性神经干细胞影响的实验研究[A];中国康复医学会运动疗法分会第十一届全国康复学术大会学术会议论文摘要汇编[C];2011年
5 王璐;王吉兴;;神经干细胞移植与氯化锂联合干预修复脊髓损伤的研究[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
6 彭敏;邹育庭;廖公平;;探讨康复对脊髓损伤患者生活自理能力的影响[A];中国康复医学会第七次全国康复治疗学术会议主题报告、学术交流论文汇编[C];2010年
7 吴军发;胡永善;吴毅;;脊髓损伤的康复治疗进展[A];中国康复医学会第四届会员代表大会暨第三届中国康复医学学术大会论文汇编[C];2001年
8 卢爱兰;张夏军;许美飞;;高压氧对脊髓损伤肌张力控制的临床对照研究[A];2011年浙江省物理医学与康复学学术年会暨康复新进展学习班论文汇编[C];2011年
9 胡孝义;;脊髓损伤治疗的研究进展[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
10 张玉琴;张培元;;儿童无骨折脱位型脊髓损伤诊断的诊断及治疗[A];中国康复医学会第十一次全国颈椎病学术会议论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 程映华;神经干细胞修复脊髓损伤的组织工程学研究[D];苏州大学;2002年
2 刘成龙;大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱动态变化的研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
3 王干;应用组织工程学方法修复脊髓损伤基本问题的研究[D];清华大学;2010年
4 冯大雄;静脉移植骨髓间充质干细胞治疗脊髓[D];四川大学;2005年
5 谭太贵;多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤[D];天津医科大学;2006年
6 王诗波;骶神经前根电刺激重建脊髓损伤后排尿功能的实验研究[D];第二军医大学;2005年
7 赵宁辉;低氧诱导因子1α及其目的基因在实验性脊髓损伤中表达的研究[D];四川大学;2002年
8 陈仲;血红素氧合酶基因表达翻译特征及在脊髓损伤中的作用[D];第一军医大学;2002年
9 张国福;补阳还五汤联合骨髓间质干细胞移植治疗脊髓外伤性截瘫的实验研究[D];福建中医学院;2005年
10 蒋晖;新型神经营养因子TAT-BDNF治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究[D];第一军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王春源;磁性纳米脂质体跨脊髓损伤大鼠血脊髓屏障的研究[D];天津医科大学;2010年
2 孙振刚;ATP通过激活Akt/mTOR/STAT3信号转导通路促进脊髓损伤修复[D];兰州大学;2010年
3 刘暾;小剂量局部电离辐射对嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤实验的影响[D];苏州大学;2010年
4 魏学磊;FK506对犬急性脊髓损伤神经保护作用的实验研究[D];大连医科大学;2004年
5 朱纯姣;脊髓损伤早期康复的疗效观察[D];中南大学;2010年
6 杨弋;自主性早期运动对大鼠脊髓损伤的影响[D];吉林大学;2004年
7 丁华;骨髓间充质干细胞移植联用褪黑素对大鼠脊髓损伤修复的影响[D];江苏大学;2010年
8 陈惠;微囊化许旺细胞移植脊髓损伤大鼠bFGF表达及后肢运动功能变化[D];南昌大学;2010年
9 施婵宏;神经干细胞及bFGF对脊髓损伤的修复作用研究[D];苏州大学;2004年
10 李晓斐;大鼠皮质脊髓束与红核脊髓束定位损伤后的蛋白组学研究[D];山西医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 林琳 寒冰;美将进行治脊髓损伤新药临床试验[N];中国医药报;2005年
2 本报记者 吴玲娟;脊髓损伤患者的心理康复[N];保健时报;2006年
3 郑颖璠;脊髓损伤研究的困惑与希望[N];健康报;2006年
4 贾燕;脊髓损伤 康复从何时开始[N];保健时报;2005年
5 记者 何少强 通讯员 杨聘英;脊髓损伤性截瘫的难题有望攻克[N];广东科技报;2003年
6 记者 于亚军;首届全国脊髓损伤外科治疗与康复研讨会在我市召开[N];呼和浩特日报(汉);2009年
7 本报记者杨波;脊髓损伤能治好吗?[N];健康时报;2003年
8 记者 潘照春;南宁市脊髓损伤者“中途之家”成立[N];广西政协报;2010年
9 王海义;脊髓损伤治疗的新发展[N];健康报;2003年
10 ;胚胎干细胞药物有望明年上临床[N];医药导报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978