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猫持续性植物状态模型制作及其相关基础与治疗研究

肖华  
【摘要】: 引起持续性植物状态(Petsistent vegetative state,PVS)的原因很多,其中脑损伤引起的PVS最常见,脑干损伤又是脑损伤中引起PVS的主要原因。由于传统观念认为PVS病程长、疗效差、预后不好,许多医务人员及患者家属对PVS的治疗态度不十分积极,在该方面的研究也无重大突破,其原因之一是有关PVS的基础研究难度大。 动物模型的建立是基础研究的先决条件。近年来,有关PVS动物模型的报道或因为重复性差,或因为与临床上PVS病情相差较远而无法推广。本实验首先运用颞枕硬膜外水囊法制作脑干伤PVS模型,并在此基础上对PVS动物模型进行一系列相关的基础与治疗研究。 第一部分 猫持续性植物状态模型的制作 本实验采用杂种猫200只,体重约2.26±0.39kg,随机分为正常对照(10只)、假手术处理(10只)和PVS组(180只)。正常组除麻醉外不行任何手术处理,假手组只开颅,不致脑损伤,PVS组于矢状缝 右侧旁开1 .5厘米,人字缝右侧向前0.5厘米处切开头皮、颗肌达颅骨, 牙科钻钻一骨窗,骨窗大小约IXI厘米,将硬脑膜与颅骨内板分离达中 颅凹底,并置入橡胶水囊,注入生理盐水约0.5一2毫升。观察到猫同 侧瞳孔增大而对侧瞳孔未变大为准,维持囊内压力。缝合颗肌及头皮, 无菌纱布包扎,6小时后去除气囊。术后将猫放入动物房,保持呼吸道 通,常规护理和喂养。术中、术后记录猫的瞳孔、颅内压、呼吸、心率 和血压等,并对术后的神经反射等进行观察。 依照1996年我国中华医学会急救分会意识障碍小组在南京制定的 持续性植物状态的标准,根据动物的特点稍加改变为本实验的标准。模 型制作结果为: 1.模型猫PVS观察时间平均为56天; 2.成功制作PVS猫66只,成功率为36.7%(66/180); 3.死亡111只,死亡率为62%(111/180); 4.并发症发生143次,发生率为79.4%(143/l 80),常见并发症 为误吸、颅内出血、麻醉过度、癫痈等。 结论:本实验采用硬膜外水囊的方法,类似临床上硬膜外血肿的 发病机制,即颅内高压、脑移位引起脑庙,导致中脑等损伤而引起昏迷 一持续性植物状态的发生。同其它方法制作的PVS模型相比,本模型成 功率较高,与临床相似,有苏醒可能,能对其进行相关基础与治疗研究。 本模型制作相对简单,重复性较好,利于推广。是一种比较理想的持续 性植物状态动物模型。 第二部分猫持续性植物状态的相关基础研究 随机选择由本实验采用硬膜外水囊方法制作的“持续性植物状态 猫”(10只),假手术对照组(10只),正常对照组(10只),用高效 液相色谱电化学检测器法检测各组动物脑脊液、血液中多巴胺含量变 化,用免疫组化的方法对动物中脑的多巴胺神经元进行形态学研究,并 对各组的脑电图(EEG)、体感诱发电位(SEP)进行检测以及对动物头 颅进行CT和MRI检查等。结果发现: 1、持续性植物状态猫脑脊液中多巴胺的含量(83.34士21.21)普遍 降低,与正常对照组(150.22士25.32)相比相差显著(P(0.01):PVS猫 血液中多巴胺的含量(17.12士3.25)也明显降低,与对照组(95.37士22.34) 相比相差显著(P(0.01),(单位:pg/ml)。 2、与正常对照组相比,PVS猫伤侧中脑TH免疫染色阳性细胞数明 显减少,细胞形态也较小。表明中脑多巴胺能神经细胞受损,多巴胺合 成减少。 3、EEG显示:在PVS状态中,a波、6波和e波增加,日波显著减 少,表明PVS猫脑皮质功能受损。 4、SEP显示:在PVS状态中,多数猫为H或111,提示脑干神经功能 受损。 5、CT和MR工显示:球囊对脑组织明显压迫,中线异位,脑干受压。 结论:本实验对“Pvs猫”的脑脊液、血液中多巴胺检测结果表 明:多巴胺含量普遍降低,与其对照组相比相差显著。经DAB法显色的 抗TH免疫组化染色切片上可见,损伤侧的TH阳性细胞明显少于对照组; EEG显示Q波、6波和。波增加,p波显著减少,SEP检查表明多数猫为 H或m,提示尸VS猫大脑皮层和脑干功能受损。CT和MRI检查发现: 球囊对脑组织明显压迫,中线移位,脑干受压。 第三部分中西医结合对猫持续性植物状态模型的治疗 作用 随机选择由本实验采用硬膜外水囊注射法制作的“持续性植物状 态猫”50只,随机分为PVS组(10只)、治疗对照组(10只)、中药治 疗组(10只)、西药治疗组(10只)和中西医治疗组(10只)。PVS组 不给任何药物治疗。治疗对照组给等剂量生理盐水。药物治疗组,西药 物组:应用美多巴及嗅隐亭。开始剂量为:美多巴每次为Zmg/kg体重, 澳隐亭每次为0.02mg/kg体重,每日3次,以后每周增量(美多巴为 Zmg/kg体重,漠隐亭为0.OZmg/kg体重)。在治疗过程中意识好转,神 经功能改善后,维持该用量2周,然后逐渐减量,减量的剂量、时间与 加量时相同。中药物组给神经再通口服液,剂量为0.sml/kg体重,每 日3次。中西医结合治疗组同时给美多巴、澳隐亭和神经再通口服液。 药物治疗时间共为2月。所有组其他喂养方法和相同。对每组动物在治 疗后抽取脑脊液和血液进行多巴胺的测定,对治疗后的模型进行免疫组 化研究。 经过两个月的治疗?


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