生长抑素和生长激素对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

【摘要】：目的： 探讨生长抑素联合生长激素治疗大鼠重症急性胰腺炎时对胰腺细胞凋亡和凋亡调控基因Bax和Bcl-2的影响及大鼠重症急性胰腺炎病情的变化。 方法： 30只雄性S-D大鼠，质量300-400g，以牛磺胆酸钠诱导制作重症急性胰腺炎模型并随机分三组，对照组(NS)10只，生长抑素治疗组(SST)10只，生长抑素联合生长激素治疗组(SST+GH)10只。生长抑素用法在建模1h后经股静脉注射，每天84μg／kg；生长激素用量每天0.5μg／kg，经皮下注射；对照组生理盐水注射。 各组均在治疗3h后经心腔穿刺抽血，进行淀粉酶检测；经原切口入腹取胰腺组织，立即10％(100mL／L)中性缓冲甲醛液固定后，石蜡包埋，每蜡块行4μm厚连续切片。HE染色光镜下观察胰腺的病理变化。 应用TUNEL染色法进行细胞凋亡检测，光镜下计算细胞凋亡指数(Apoptotic index,AI)，AI计算方法：分别计数四个高倍视野凋亡细胞数和总细胞数，AI=凋亡细胞数／总细胞数×100％；免疫组化SABC法检测胰腺组织中基因Bax、Bcl-2蛋白表达。 结果： 1、HE染色后各组均可观察到胰腺组织中细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩，染色质凝集，核破裂及凋亡小体形成等；对照组间质水肿出血明显，SST组间质水肿减轻，个别可看到出血，SST+GH组间质水 肿减轻明显，无出血灶; 2、SST+GH组和SST组血清淀粉酶较对照组有明显的降低，SST+GH 组血清淀粉酶也明显低于SST组。统计学处理各组间有显著性差异 (尸a仍); 3、TUNEL染色结果表明SST+GH组和SST组凋亡指数明显高于对 照组，统计学处理各组之间有显著性差异(尸a仍); 4、免疫组化SABC法结果显示Bax蛋白表达在胰腺腺泡细胞浆中， SST组和SST+GH组表达明显增强，SST+GH组高于SST组，SST组与 对照组之间无显著性差异，其余各组间有显著性差异(尸a仍)。Bd一2 蛋白表达在胰腺导管细胞中，对照组表达明显增强，各组之间有显著性 差异(尸a仍)。 结论: 1、生长抑素联合生长激素治疗大鼠重症急性胰腺炎可以明显地改善 大鼠病变的胰腺组织形态和降低血淀粉酶的水平; 2、大鼠重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡可以影响重症急性胰腺炎的病 变程度和类型; 3、生长抑素和生长激素联合治疗重症急性胰腺炎的机制之一可能是 诱导损伤的胰腺细胞凋亡。生长抑素的作用机制可能与抑制Bd一2的表 达有关而与促进Bax的表达无关;生长抑素与生长激素联合作用的机制 可能与促进Bax的表达同时抑制Bd一2的表达有关。