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血管内皮细胞生长因子的制备及其治疗股骨头坏死的实验研究

胡志明  
【摘要】:意义:股骨头缺血性坏死是临床多发病和常见病,其坏死的根本原因是血供障碍,并呈进行性发展,引发股骨头坏死,致残率极高。目前,临床对该病还没有一个很好的治疗方法。因此,研究一种新的治疗股骨头坏死的方法和药物具有重大的意义。 血管损伤、炎症导致的血管栓塞和骨内压升高是造成缺血性股骨头坏死恶性循环的重要原因,这是股骨头坏死治疗中的难点。因此,抗炎、减压同时恢复受损血管功能并建立新的侧枝循环是打破股骨头坏死病理恶性循环最有效的手段。新血管的生成与多种生长因子的调节有关,它包括血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、血小板样生长因子(PDGF)等多种蛋白因子。在众多的血管生成刺激因子中以VEGF最为重要,它对血管的生长有很强的诱导作用,是目前所知唯一特异性作用于血管内皮细胞的一种生长因子,由于它还具有增强血管通透性的功能,又被称为血管通透因子。VEGF作为血管生成的一种直接效应分子已被用于冠心病防治的实验研究,近年来的研究还显示VEGF能加速创伤性骨的修复及伤口的愈合,因此,VEGF在缺血性疾病的治疗方面有潜在的临床应用价值。由于VEGF天然来源非常有限,产量甚微,远不能满足临床应用的需要,因此利用DNA重组技术生产VEGF很有必要。 目标:通过建立激素诱导的兔股骨头坏死动物模型,采用脂质体对VEGF_(121)。包裹,制成脂质体VEGF缓释制剂,直接经皮穿刺介入法,将脂质体VEGF缓释制剂注入股骨头坏死部位,促进新血管的生成,同时应用特异性抗炎因子TNF-α拮抗剂TNFR-Fc对坏死股骨头进行消炎,变股骨头坏死的恶性循环为良性性循。为临床股骨头坏死的治疗提供新的治疗策略和方法。 利用RT-PCR技术,从HL60细胞中扩增出hVEGF_(121)cDNA,构建原核表达质粒


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