收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

一氧化氮在人骨髓间充质干细胞抑制淋巴细胞增殖中的机制研究

张丹  
【摘要】:大量实验证明骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)能抑制T细胞的增殖、应答,而且在异基因造血干细胞联合MSC移植治疗恶性血液病的实践中,MSC促进移植物的植入,促进受体造血恢复,抑制移植物抗宿主病(GVHD)的发生,降低GVHD的发生率和严重程度。目前,有关MSCs调节免疫方面的报道很多,尤其是MSCs对淋巴细胞抑制效应的研究,但是MSCs免疫抑制的机制仍不清楚。有实验报道小鼠MSC通过产生一氧化氮(nitrooxide,NO)介导其对小鼠脾淋巴细胞的抑制作用,NO抑制T细胞增殖可能是通过影响了JaK3/STAT5信号转导通路中STAT5酪氨酸蛋白激酶的磷酸化而实现的。而在异基因淋巴细胞作为刺激因素的混合淋巴细胞培养反应(Mixedlymphocyte reaction,MLR)中,NO是否在人MSCs(hMSCs)抑制外周血淋巴细胞增殖的过程中发挥作用呢?基于此,我们分离培养hMSCs,建立以异基因淋巴细胞作为刺激因素的MLR,探讨反应体系中NO的产生,及其在hMSC对淋巴细胞增殖、凋亡和淋巴细胞FOXP3 mRNA表达的影响中的作用。 无菌抽取健康志愿者骨髓,制备骨髓细胞悬液,采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓源间充质干细胞,传代培养至P4/P5消化后应用。分别以外周血T淋巴细胞为反应细胞,丝裂霉素C灭活的异基因淋巴细胞为刺激细胞建立混合淋巴细胞培养体系(MLR)。MSC/MLR共培养体系中MSC与反应T淋巴细胞数量比为1:10,在有或无诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂(L-NAME)存在下,以CCK-8法检测T淋巴细胞增殖,Giess法检测各MLR体系上清中NO含量,流式细胞术检测各MLR体系中淋巴细胞凋亡比例,Real-time PCR监测各MLR体系中FOXP3mRNA表达水平。 实验结果显示,1 hMSC对淋巴细胞反应性增殖具有抑制作用,表示淋巴细胞增殖活性的OD值为0.49±0.03,加入L-NAME后,共培养体系中NO产生减少同时淋巴细胞的增殖有所恢复,OD值为0.92±0.03。2 hMSC干预下,共培养体系中淋巴细胞凋亡比例为(20.83±1.69)%。加入L-NAME后,反应体系中的淋巴细胞凋亡比例为(9.56±0.96)%,与hMSC干预组相比有统计学意义(P<0.05)。3hMSC干预下,共培养体系中淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平升高,为(1.56±0.34)%,与对照组(0.74±0.15)%相比,有显著性差异(P<0.05),加入L-NAME后,Foxp3 mRNA的表达水平为(0.81±0.18)%。 通过实验我们得出以下结论,NO在hMSC抑制异基因抗原诱发的淋巴细胞增殖中起重要作用,其机制可能是通过促进凋亡、影响FOXP3的表达进而影响调节性T细胞的功能。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 杜敦峰 ,叶启发 ,宫念樵;羟异黄酮对异种混合淋巴细胞增殖和凋亡作用的实验研究[J];中国现代医学杂志;2002年13期
2 王沂芹;吴玉章;;免疫老化过程中T淋巴细胞增殖老化的研究进展[J];中国免疫学杂志;2006年08期
3 刘艺;张奕华;;新型小肽偶联物的合成及对T淋巴细胞增殖的影响[J];中国天然药物;2007年02期
4 袁卫玲;郭霞珍;马淑然;刘晓燕;顾晓静;;松果腺对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖率季节性变化的影响[J];安徽中医学院学报;2007年05期
5 吉宏;黄花蒿提取物对人体补体、中性粒细胞氧化和T淋巴细胞增殖的作用[J];国外医学(中医中药分册);1997年01期
6 傅佳萍,蔡真,林茂芳;γ射线辐照对T淋巴细胞增殖及活性影响的实验研究[J];中华血液学杂志;2003年08期
7 赵淑梅,张太国,岳启安,臧恒昌,王凤山,王红艳;猪胸腺免疫抑制提取物超滤组分2对淋巴细胞增殖的影响[J];中国生化药物杂志;2003年03期
8 王敏;刘旭平;张建勤;姜青龙;孙午;傅颖媛;;黄芩苷对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响[J];江西医学院学报;2007年06期
9 袁卫玲;马淑然;郭霞珍;李晓君;刘晓燕;顾晓静;徐巍华;赵树宏;;松果腺对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖率季节性变化的影响[J];天津中医药;2008年01期
10 孙鸿丽;薛一峰;沈云峰;周新;;人羊膜间充质干细胞抑制兔淋巴细胞增殖的研究[J];江苏医药;2010年23期
11 吴凡凡;李云;赵品楠;廖晓澄;胡佳哲;;视黄酸受体抑动剂对正常人体T淋巴细胞增殖的影响[J];现代预防医学;2011年02期
12 石玉城,梁光义,倪红梅;刺梨主要成分的淋巴细胞增殖作用[J];贵阳中医学院学报;1991年02期
13 周平;吴嘉惠;;体外锌对淋巴细胞增殖及白介素—Ⅱ产生的影响[J];微量元素与健康研究;1993年04期
14 郝钰,邱全瑛,方素萍;小檗碱抑制淋巴细胞增殖的流式细胞分析[J];中国病理生理杂志;2000年10期
15 林忠宁,董胜璋,董书芸,卢次勇,余贵英;MTT法检测T淋巴细胞增殖功能的方法学探讨与应用[J];中国卫生检验杂志;2000年01期
16 李建明,林志彬;康乐霉素对豆蔻酰佛波醇乙酯和伊屋诺霉素诱导淋巴细胞增殖的作用(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2000年02期
17 钱艳,关永源,王冠蕾,杨晓茹,贺华,丘钦英;刀豆蛋白A促进T淋巴细胞增殖与ClC-3蛋白的关系[J];中国药理学通报;2003年10期
18 吴涛,白海,王存邦,路继红,欧剑锋;骨髓间充质干细胞培养上清对异体淋巴细胞增殖的影响[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年07期
19 白彦萍;陈志华;李红艳;杨顶权;;常用中药静脉注射剂对银屑病T淋巴细胞增殖影响的比较[J];北京中医药大学学报;2007年09期
20 邱一华,彭聿平,程纯,戴丽;应激对T淋巴细胞增殖的抑制作用[J];南通医学院学报;1999年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘拥军;;银消颗粒对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响[A];中华中医药学会皮肤科分会第七次学术年会、2010年重庆四川中西医结合皮肤性病学术年会、全国中西医结合诊疗皮肤性病新进展新技术学习班论文汇编[C];2010年
2 宋朋红;谢海洋;郑树森;吴健;;蛋白酶体抑制剂对T淋巴细胞增殖活化的影响[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年
3 贾永前;曾婷婷;潘晓夫;李亚琼;范家凤;孟文彤;;骨髓间充质干细胞及转基因骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
4 白彦萍;陈志华;李红艳;杨顶权;;常用中药静脉注射剂对T淋巴细胞增殖的影响的比较[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年
5 吴岚;赵丽娟;杨娉婷;鲁静;肖卫国;;红霉素对T淋巴细胞增殖的影响[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
6 朱平;;移植后淋巴细胞增殖病的病因和临床诊治[A];第一届全国难治性淋巴瘤学术研讨会暨第二届全国多发性骨髓瘤学术研讨会(国家级血液系统恶性肿瘤继续医学教育学习班)继续教育集[C];2007年
7 曹秀明;马娇;万晓峰;;N-乙酰氨基葡萄糖激活Ca~(2+)信号通路体外诱导小鼠T淋巴细胞增殖[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
8 丁晨光;田普训;薛武军;潘晓鸣;项和立;李杨;靳占奎;毛天赐;段万里;席敏;田晓辉;;虫草素在体外抑制T淋巴细胞增殖和向Th17分化[A];2012中国器官移植大会论文汇编[C];2012年
9 宋向凤;孙翔;王辉;;雌孕激素对淋巴细胞增殖的影响[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
10 陈樱;邓为民;姚智;李海东;;高糖促进美罗华对人B淋巴细胞增殖的抑制作用及相关机制[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 王瑾;抗β1-肾上腺素受体自身抗体对T淋巴细胞增殖和分泌功能的影响[D];山西医科大学;2011年
2 蒋燕灵;抗B7分子单克隆抗体与免疫抑制剂联用对感染人巨细胞病毒的T淋巴细胞增殖影响及机理初探[D];浙江大学;2007年
3 雒真龙;Galectin-7通过TGFβ/Smad3途径促进T淋巴细胞增殖和向Th1细胞偏移[D];华中科技大学;2013年
4 段秀梅;荧光染料CFDA-SE标记在检测淋巴细胞增殖及细胞介导的细胞毒活性中的应用研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吕婷婷;β_1-肾上腺素受体自身抗体对大鼠B淋巴细胞增殖的影响及其可能机制[D];山西医科大学;2012年
2 禚守蓉;XGD-1对人外周血T淋巴细胞增殖和IL-2R表达的影响[D];昆明医学院;2003年
3 张丹;一氧化氮在人骨髓间充质干细胞抑制淋巴细胞增殖中的机制研究[D];南方医科大学;2008年
4 曾婷婷;小鼠骨髓间充质干细胞在体外对淋巴细胞增殖和细胞凋亡的影响[D];四川大学;2006年
5 刘玉娟;葡多酚对人血淋巴细胞增殖活性影响的实验研究[D];青岛大学;2003年
6 张硕;人骨髓间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖及IL-10、IFN-γ、LFA-1 mRNA表达的实验研究[D];河北医科大学;2010年
7 宫照龙;胸腺素alpha-1基因的克隆、表达及其对淋巴细胞增殖的影响[D];安徽医科大学;2004年
8 柯珍;hsBAFF通过Ca~(2+)-CaMKII信号转导激活mTOR通路促进B淋巴细胞增殖机理研究[D];南京师范大学;2012年
9 于蓝;中药药膳对临床肿瘤病人放射治疗的影响[D];青岛大学;2006年
10 孙鸿丽;人羊膜间充质干细胞分离培养鉴定及抑制异基因淋巴细胞增殖的实验研究[D];苏州大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 郑灵巧;研究显示:饮绿茶可防子宫内膜癌[N];中国中医药报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978