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补肾壮骨中药治疗糖皮质激素性骨质疏松的实验研究

刘玲萍  
【摘要】: 研究背景: 糖皮质激素(glucocorticoid, GC)由于其重要而有效的免疫抑制及抗炎效果而被广泛应用于抗移植免疫排斥、自身免疫疾病、感染及肿瘤治疗等领域。但是,长时间接受糖皮质激素治疗的病人,超过50%会发生骨丢失,它是继发性骨质疏松也是医源性骨质疏松最常见的原因,其发病率仅次于绝经后骨质疏松及老年性骨质疏松而居第三位,因此,有效防治这一药源性骨病,是现代医学亟待解决的重要问题。目前,西医防治主要应用钙制剂、VitD、二磷酸盐、雌激素、降钙素、甲状旁腺素等,但存在价格昂贵、副作用多的情况,均不适合长期使用,且远期疗效亦不肯定。近年来随着糖皮质激素性骨质疏松在中医病机方面认识的加深,以及对中药调节成骨细胞活性的药物研究,将进一步有助于中医治疗方案的调整和改进。 补肾壮骨中药(仙灵骨葆胶囊)由淫羊藿、生地黄、补骨脂、川续断、丹参、知母等几味中药组成,其可以促进成骨细胞(osteoblast, OB)的分化及矿化,并能促进骨髓基质细胞向OB分化,在基因水平上促进BMP-mRNA及Runx-2基因的表达,从而促进骨形成作用,提高骨密度,改善骨的质和量。临床方面已证实其对绝经后骨质疏松有良好治疗效果,但目前对防治糖皮质激素诱发的骨质疏松尚缺乏证据。今以糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIO)为模型,观察该方对GIO的疗效并初步探讨其作用机理,以期进一步丰富其防治骨质疏松症的理论和实验基础。 目的 运用骨密度、骨生化指标和骨生物力学手段来综合评价补肾壮骨中药对GIO大鼠的防治作用。 材料和方法: 选用40只3.5月龄雌性SD大鼠随机分为4组每组10只,即,自由活动对照组(A组),造模组(B组),中药组(C组)西药组(D组);B、C、D组分别皮下注射甲波尼龙(3.5mg/kg.d,9周),建立骨质疏松模型。C组造模基础上给予仙灵骨葆胶囊(150mg/kg)灌胃,2次/d,D组在造模基础上给予阿伦磷酸钠1.0mg/kg,1次/d,其它两组给予等量生理盐水,实验期9周。9周后测定各组大鼠骨密度(BMD)、骨代谢生化指标及骨生物力学等指标。 统计方法 所有数据采用均数±标准差(x±s)表示,SPSS13.0统计软件分析。各组间比较采用单因素方差分析(One Way-ANOVA),组间差异用LSD法,P0.05作为有显著性差异的检验标准。 结果: 1、糖皮质激素性骨质疏松大鼠模型的建立: 实验9周后,B组大鼠血清骨形成标志物骨钙素BGP (0.92±0.31ng/ml vs. 1.52±0.45ng/ml)、降钙素CT (170.52±29.67pg/ml vs. 211.27±32.31pg/ml)较A组降低(P0.05),血清骨吸收标志物TRACP(27.67±7.99 U/L vs. 13.76±2.31U/L)较A组升高(P0.01);血清Ca (0.98±0.17 mmol/L vs. 1.27±0.25mmol/L)较A组降低(P0.01),血清雌二醇(15.47±2.98pg/ml vs. 21.33±4.17pg/ml)较A组降低(P0.05),血清P(1.27±0.25mmol/L vs. 1.84±0.50 mmol/L)两组间无显著性差异(P0.05);股骨BMD(0.246±0.012g/cm2vs.0.263±0.012g/cm2)、骨矿含量(0.42g±0.44g)较A组下降(P0.05),第5腰椎BMD(0.240±0.013g/cm2vs.0.572±0.011g/cm2)及骨矿含量(0.08g±0.27g)较A组下降(P0.05);股骨三点弯曲实验最大载荷(124.55±14.65N vs.150.04±19.85 N)及刚度(176.39±36.16 N/mm vs. 260.11±71.44 N/mm)较A组下降(P0.05),第5腰椎压缩实验最大载荷(217.43±22.27 N vs. 268.67±15.55 N)及刚度(229.84±80.90N/mm vs. 322.30±38.54 N/mm)较A组下降(P0.05)。表明糖皮质激素骨质疏松模型建立成功。 2、补肾壮骨中药对大鼠糖皮质激素性骨质疏松模型的作用: (1)体重变化:实验第3周B、C、D组大鼠体重与A组比较有显著性差异(P=0.000),B、C、D组大鼠体重较A组显著降低(P=0.000),B、C、D三组间大鼠体重无显著差异(P0.05)。 (2)骨密度测定:四组间股骨及腰椎骨密度有显著差异(F=3.528,5.820;P=0.008,0.003),B组低于A组(P=0.008,0.001);C、D组高于B组(P=0.047,0.007;0.008,0.001),C、D两组间比较无显著性差异(P=0.453,0.567);四组间股骨及腰椎骨矿含量有显著差异(F=7.869,13.088;P=0.000,0.000),B组低于A组(P=0.000,0.000);C、D组高于B组(P=0.001,0.001;0.000,0.000),C、D两组之间比较无显著性差异(P=0.851,0.936)。 (3)骨生化指标测定:反映骨形成指标BGP、CT及血清Ca、E2、TRACP四组间有差异(F=6.542,4.406,18.057,5.880,6.228;P=0.001,0.010,0.000,0.002,0.002),其中B组BGP、CT、TRACP、Ca、E2低于A组(P=0.008,0.004,0.004,0.003,0.002);C组BGP、CT、Ca、E2高于B组(P=0.003,0.012,0.005,0.009);D组TRACP高于B组(P=0.003),与A组无显著差异(P=0.006)。血清P四组间无显著性差异(P0.05) (4)骨生物力学性能测定:主要反映松质骨力学特性的腰椎压缩实验最大载荷和刚度四组间有先显著差异(F=12.227,4.397;P=0.000,0.010),B组低于A组(P=0.000,0.004);C、D组高于B组(P=0.000,0.000;0.005,0.007),C、D两组间比较无显著性差异(P=0.896.0.953);反映皮质骨力学特性的股骨三点弯曲实验最大载荷和刚度四组间有先显著差异(F=5.044,4.967;P=0.005,0.006),B组低于A组(P=0.008,0.003;0.005,0.003);C、D组高于B组(P=0.01.2,0.007),C、D两组间比较无显著性差异(P0.05); 结论: 1、GIO大鼠骨形成降低,骨密度和骨强度下降,骨量减少,骨质量降低,表明已建立糖皮质激素骨质疏松模型。 2、补肾壮骨中药可通过改善骨代谢生化指标及骨生物力学性能,拮抗糖皮质激素性骨质疏松大鼠的骨丢失,起到防治骨质疏松的作用,效果显著。


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