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小檗碱对肠易激综合征大鼠内脏高敏感的影响

唐庆林  
【摘要】:第一部分肠易激综合征大鼠模型的建立及评价 目的:探讨肠易激综合征(IBS)大鼠模型的建立方法并进一步评价该模型。 方法:采用乙酸灌肠法造成IBS大鼠模型组(n=10)和对照组(n=10),造模后通过腹部回撤反应评分(AWR)评价内脏敏感性,通过束缚应激(RSP)实验评价粪便情况;甲苯胺蓝染色观察结肠肥大细胞的表达;应用免疫组织化学染色及计算机图像分析系统半定量分析结肠c-fos表达。 结果:该模型符合IBS特征,与对照组相比,模型组AWR评分明显升高,束缚应激后排便加快、结肠肥大细胞的表达、结肠c-fos表达增多,两组差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:乙酸灌肠法造成IBS大鼠模型内脏高敏感性,肥大细胞、c-fos的高表达可能参与大鼠内脏高敏感的异常调节。 第二部分小檗碱对肠易激综合征大鼠内脏高敏感的影响 目的:探讨小檗碱(BBR)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏高敏感的影响。 方法:应用乙酸灌肠法建立IBS大鼠模型,40只大鼠随机分为对照组、生理盐水组、BBR组、匹维溴铵组,每组10只。对照组正常饲养,生理盐水组乙酸灌肠后予3ml生理盐水灌胃;匹维溴铵组灌肠后予匹维溴铵(150mg/Kg)灌胃;BBR组灌肠后予BBR(50mg/Kg)灌胃,第7天结束并评价实验,予AWR评分评价内脏敏感性,通过RSP评价排便,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠5-羟色胺(5-HT)、血浆白介素-6(IL-6)水平。 结果:与对照组比较,生理盐水组、匹维溴铵组、BBR组AWR评分升高,束缚应激后排便增加,结肠5-HT、血浆IL-6水平升高,组间比较有统计学意义(P<0.05);与生理盐水组比较,匹维溴铵组、BBR组AWR评分降低,束缚应激后排便减少,结肠5-HT、血浆IL-6水平下降,组间比较有统计学意义(P<0.05);与匹维溴铵组比较,BBR组AWR评分降低,束缚应激后排便减少,结肠5-HT、血浆IL-6水平下降,组间比较有统计学意义(P<0.05)。 结论:BBR能影响IBS大鼠的内脏高敏感性,并降低结肠5-HT、血浆IL-6水平。关键词肠易激综合征,内脏高敏感,小檗碱,5-HT,IL-6 第三部分小檗碱对大鼠内脏高敏感影响的机制研究 目的:探讨小檗碱(BBR)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏高敏感(VH)的影响的可能机制。 方法:应用乙酸灌肠法建立IBS模型,随机分为对照组、生理盐水组、氨基胍组、联合处理组和BBR组。对照组正常饲养,生理盐水组灌肠后予3ml生理盐水灌胃;氨基胍组灌肠后予氨基胍(100mg/Kg)腹腔注射;BBR组灌肠后予BBR(50mg/Kg)灌胃;联合处理组:灌肠后予BBR(50mg/Kg)灌胃,同时予氨基胍(100mg/Kg)腹腔注射,第7天结束并评价实验,予AWR评分评价内脏敏感性,通过RSP评价排便、ELISA法检测血浆D-乳酸、蛋白免疫印迹杂交法检测肠粘膜紧密连接蛋白Occludin、ZO-1。 结果:与对照组相比,生理盐水组、氨基胍组、BBR组、联合处理组AWR评分升高,束缚应激后排便增多,血浆D-乳酸水平升高,紧密连接蛋白Occludin、ZO-1蛋白表达下降,组间比较有统计学意义(P<0.05);RSP结果:生理盐水组、氨基胍组排便次数明显多于对照组、BBR组和联合处理组,组间比较有统计学意义(P<0.05);氨基胍组排便减少不明显,与生理盐水组比较无统计学意义(P>0.05)。血浆D-乳酸、紧密连接蛋白Occludin、ZO-1蛋白表达:与生理盐水组相比,BBR组、联合处理组指标明显升高,组间比较有统计学意义(P<0.05),氨基胍组与生理盐水组相比稍升高,组间比较无统计学意义(P>0.05)。 结论:BBR能影响IBS大鼠的VH,其机制可能与一氧化氮有关。


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