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免疫活性载体抗肿瘤活性研究

王永奎  
【摘要】:目的:研究高效、特异、简便的肿瘤主动免疫治疗方法,同时活化 CD8~+CTL和CD4~+Th淋巴细胞增强机体的抗肿瘤免疫,达到清除手术后残余 肿瘤细胞的目的,探索恶性肿瘤综合治疗的新方法。 方法:用在BALB/c小鼠容易成瘤的MM45T.Li细胞系(小鼠肝癌细胞 系)接种同源小鼠,建立肿瘤模型。通过RT-PCR方法体外合成MHC-Ⅱ cDNA,以复制缺陷型重组腺病毒载体介导将MHC-Ⅱ 基因导入肿瘤细胞, 采用理化方法抽提肿瘤蛋白,物理吸附于灭活的肿瘤细胞表面,制备全 细胞肿瘤疫苗。用制备的疫苗对实验小鼠预防接种并在小鼠转移性肿瘤 模型上进行实验,实验小鼠分成3 组。1.预防组:先用疫苗免疫后再接 种肿瘤细胞;2.治疗组:先接种肿瘤细胞,待成瘤后(模拟转移性肿瘤) 再接种疫苗:3.对照组:与治疗组同时接种肿瘤细胞,但不做任何处理。 肿瘤生长的观察:有无肿瘤生长、肿瘤生长速度等。同时采用MTT 比色 法检测疫苗蛋白刺激免疫小鼠 T细胞增殖能力、Dot BIot 法检测免疫小 鼠血清中有无抗疫苗蛋白特异性抗体产生,验证疫苗对易感宿主的保护 作用以及对已形成的转移性肿瘤的治疗作用。 结果:在对照组小鼠,肿瘤细胞接种后12天左右,接种点全部有肿 瘤结节形成,生长速度快,在接种后第8周前后有2只小鼠因肿瘤生长 而死亡。治疗组小鼠与对照组小鼠同时成瘤,但经疫苗接种后4-8 周肿 瘤结节直径增长较对照组显著减慢。在预防组小鼠中,即使接种的细胞 数量远远超过肿瘤形成所需细胞数,经长期观察也无肿瘤结节形成。MTT 法检测发现肿瘤蛋白能体外刺激预防组小鼠T细胞增殖。Dot Blot法检 测见预防组小鼠血清与肿瘤蛋白间有较强的抗原-抗体反应,治疗组小鼠 血清与肿瘤蛋白间也似乎存在抗原-抗体反应,而对照组无阳性发现。 结论:表达 MH-Ⅱ分子的肿瘤细胞吸附肿瘤蛋白抗原制备的肿瘤疫 — ————— 苗能增加暴露于兔疫系统的抗原数量和抗原提呈,同时活化CD41h 和 CDS℃TL细胞,增强机体的抗肿瘤细胞免疫及体液免疫功能。免疫接种后 对易感宿主有很好的保护作用,并能使某些已经形成的转移性肿瘤生长 速度延缓,延长平均生存时间。对疫苗加以改进以应用于人类转移性肿 瘤的治疗,将成为一种特异性高、疗效好的治疗手段得到广泛应用。


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