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严重烧伤致单个核细胞内信号转导机制变化的实验研究

于宝军  
【摘要】:目的:为进一步探讨严重烧伤后SIRS及MODS的发病机制,探讨 外周血单个核细胞内NF-κB及其上游信号分子在炎症级联反应中的作用,加深 对烧伤休克导致SIRS和MODS的发生机制的认识;使临床上能更有效地掌握 严重烧伤病人的全身反应状态,以选择有效的、有针对性的治疗措施,希望在 烧伤后SIRS的发病早期,即在炎症级联反应的起始阶段找到调节或阻断的方法. 方法:分体外和在体实验两部分,体外实验主要为证实PBMC 内各种信号分子 在烧伤血浆作用下的主要变化,应用生物化学方法测定Ca2+、超氧阴离子、过 氧化氢和NO水平。在体实验部分分离出PBMC,提取总RNA和核蛋白,分别 进行RT-PCR和EMSA,测定促炎性细胞因子和Thl/Th2型细胞因子转录水平 的变化,测定细胞核内NF-KB的积聚和活化.同时观察钙通道阻断剂和抗氧化 剂对细胞因子等炎症介质表达和核因子活化水平的调控作用.结果:不同时相 点烧伤血浆可使体外PBMC内Ca2+、超氧阴离子、过氧化氢明显增加,应用NAC、 尼莫通和Dantrium(OR)有一定的抑制作用.在体研究发现烧伤后PBMC核内NF-κB 的积聚和活化明显增加,同一来源的细胞中促炎性细胞因子和Th2型细胞因子 出现高表达,而Thl型细胞因子的表达下降或不表达.应用NAC、尼莫通和 Dantrium(OR)对NF-κB的活化有调节作用,对促炎性细胞因子亦有下调作用.结 论:严重烧伤后PBMC内信号分子明显增高,NF-κB过度活化并易位进入细胞 核内,与PBMC表达促炎性细胞因子和Th2型细胞因子有关,钙通道阻断剂和 抗氧化剂有调控细胞内信号转导的作用,并对PBMC细胞因子mRNA的表达谱 有影响.应用钙通道阻断剂和抗氧化剂可提高机体的免疫功能,抑制过度的炎 症反应,对烧伤后SIRS的可能会有防治作用.


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