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乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞的研究

杨瑞宁  
【摘要】: CD5~+B细胞由早期的前体B细胞发育而来,不依赖骨髓,是近年来证实的 一类具有重要功能的B细胞亚群。这种CD5~+B细胞能产生很多自身抗体,在自 身免疫性疾病的发病中起重要作用。国外最新研究提示,HBV、HCV感染患者 外周血CD5~+B细胞显著升高,循环中CD5~+B细胞的增加常伴随病情加重。这些 新发现表明,CD5~+B细胞可能在肝病及相关疾病的急性和慢性病理反应中发挥 重要作用。 我国是乙型肝炎高发区,CD5~+B细胞是否参与了慢性肝病的发病以及乙肝 患者外周血CD5~+B细胞百分率的高低与病情发展的关系如何,值得探索和研究。 本项研究利用磁式细胞分选器分离B淋巴细胞,应用免疫组化技术检测了 50例乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞,在总B细胞中所占百分率分别为:急性 乙型肝炎(24.6±4.2)%;慢性乙型肝炎(38.8±8.0)%;慢性重症乙肝(44.4 ±8.4)%;乙肝后肝硬化(64.7±7.5)%。10例正常对照组为(23.0±3.1)%。 结果显示,急性乙肝组与正常对照组无显著性差别,其余各疾病组均显著高于 对照组。将各疾病组CD5~+B细胞百分率与肝功能指标进行相关性分析,发现慢 性乙型肝炎和慢性重症乙型肝炎患者外周血CD5~+B细胞百分率与谷丙转氨酶 (ALT)和总胆红素(TB)呈正相关,乙肝后肝硬化患者外周血CD5~+B细胞百 分率与ALT、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酸基转移酶(γ-GT)、TB和直接胆 红素(DB)的升高呈正相关,提示CD5~+B细胞百分率的增高与肝功能的损伤有 密切的伴随关系。故检测CD5~+B细胞对乙肝的发病及慢性化发展判断有一定的 参考价值。 为了探讨乙肝患者B细胞CD5在基因水平上的变化,在分离B细胞的基 础上,建立了RT-PCR半定量方法检测急性乙肝、慢性乙肝、慢性重症乙肝、乙 肝后肝硬化患者外周血CD5mRNA的表达水平,CD5mRNA与管家基因β-actin 的比值分别为0.27±0.16;0.76±0.18;0.80±0.20和1.82±0.25。而正常人外周 血CD5mRNA的表达水平为0.25±0.12。提示CD5mRNA水平随乙型肝炎病情 第二军医大学学位论文 的发展逐步上升。 本研究采用间接 ELISA法检测了乙肝患者抗心磷脂抗体(ACA)、抗核抗 体(ANA)、类风湿因子(RF)、抗钙调素抗体(抗CaM)、抗亲环素A抗体(抗 CyPA人抗肝细胞膜特异性脂蛋白抗体(抗LSP)等自身抗体,发现CDS8细 胞百分率和CDS mRNA水平在慢性乙肝思者、慢性重症乙肝、肝炎后肝硬化患 者中与ACA、抗CaM水平呈正相关,肝炎后肝硬化患者与抗CyPA水平呈正相 关,但CDS8细胞百分率、CDS mRNA与抗LSP无相关性。上述研究结果表明 CDS卫细胞可能与乙肝患者的某些自身抗体的出现相关。


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