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定量检测大肠癌癌胚抗原信使核糖核酸的研究

郝立强  
【摘要】: 目的:建立定量Nested-RT-PCR技术检测大肠癌外周血CEAmRNA方法并测定其敏感性。应用该方法检测大肠癌组织及外周血CEAmRNA的量,探讨其对早期大肠癌诊断的敏感性和特异性,以及预后判断的临床诊治的意义。 材料与方法:利用突变后含有新酶切位点Pst Ⅰ的靶mRNA系列稀释作为内参照竞争模板,建立了定量Nested-RT-PCR技术检测大肠癌外周血CEAmRNA方法。用Lovo细胞株检测其敏感性。应用该方法检测了一部分大肠癌组织淋巴结、部分大肠良性疾病组织和外周血以及部分大肠癌患者治疗前后外周血的CEAmRNA的量。进行对比性研究。 结果:该方法具有很高的敏感性。其敏感性可达5ml血液中只要有5个癌细胞就可检测到,意味着敏感度为1/10~7。病理学淋巴结肿瘤阴性病例中35.7%CEAmRNA呈阳性,存在微转移。大肠癌组织CEAmRNA水平与肿瘤细胞分化程度无关(P>0.05)。CEAmRNA的量达到10~2copies/ugRNA是相对区分大肠良恶性肿瘤的门槛值。大肠癌外周血CEAmRNA阳性率75%,外周血CEA mRNA的检测比血清CEA的检测有较高的敏感性和特异性(P<0.01)。术前与术后CEA mRNA的量有显著差异(P<0.01)。手术切除肿瘤是大肠癌首选的治疗方法。化、放疗后CEAmRNA量有显著降低(P<0.01)。术后联合应用放疗、化疗是增强大肠癌术后疗效最好辅助疗法(P<0.05)。大肠癌肝外腹腔内局部复发患者在放、化疗辅助治疗下的根治性切除是最佳的治疗方案(P<0.001)。 结论:定量检测大肠癌外周血CEAmRNA的量值可以作为大肠癌早期诊断、评价疗效,判断预后及术后监测的重要指标,应用该方法对大肠癌高危人群及大肠癌术后患者进行监测,对早期发现大肠癌,提高疗效有重要指导意义。


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