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细胞因子、基质金属蛋白酶3和9以及Bcl-2和Bax在溃疡性结肠炎表达的研究

张文俊  
【摘要】: 目的:测定血清中几种细胞因子的含量,并分析这些细胞因子与溃疡性结肠炎病变范围、病变程度和复发与否的关系,以及治疗后的变化。研究溃疡性结肠炎肠黏膜基质金属蛋白酶3和9,以及细胞凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax表达。 方法:收集2001年5月~2001年11月在我院就诊经内镜证实的溃疡性结肠炎患者的血清,储存于-70(C的深低温冰箱中待测。肠镜活检标本固定于40%的甲醛溶液中,石蜡包埋固定。采用ELISA法测定血清中IL-1(、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12P40和TNF-(的含量,IL-1(、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12P40和TNF-( ELISA试剂盒购自法国Diaclone公司。采用免疫组织化学的方法检测基质金属蛋白酶3和9,以及调控细胞凋亡的蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。计量资料采用t检验,计数资料百分率采用(2检验,p0.05为有统计学差异。 结果:共收集溃疡性结肠炎患者血清64份,患者年龄18~65岁,平均43.5(11.9岁,其中男24例,女40例。全结肠病变13例,左半结肠病例7例,直乙状结肠病变19例,直肠病变13例,愈合期病例12例。粘膜病变0级12例,1级14例,2级19例,3级19例。留取了31例患者炎症区肠黏膜的活检标本,其中10例患者同时留取了非炎症区的肠黏膜标本,用于免疫组织化学研究。 IL-1(的含量溃疡性结肠炎患者为10.8(14 pg/ml,正常对照为1.8(0.57 pg/ml,两者比较有显著性差异p0.01。不同病变范围的IL-1(变化为愈合者为6.4(8.6 pg/ml,直肠病变为9(11 pg/ml,直乙状结肠 WP=6 为8.3(7.8 pg/ml,左半结肠为19.8(14.6 pg/ml,全结肠为15.5(23.3 pg/ml,有逐渐增加的趋势,左半结肠病变与愈合期者比较有统计学差异(p0.05)。不同病变程度IL-1(含量:0级为6(8.3 pg/ml,1级为6.2(6.2 pg/ml,2级为11.2(12.6 pg/ml,3级为16.9(19.7 pg/ml,2级和3级较0级和1级有明显增加(p0.05)。0级者亦高于正常对照(p0.02)。初发患者IL-1(含量为16.1(18.2 pg/ml,明显高于复发患者的8(9.2 pg/ml(p=0.31)。其中有19例患者在经正规的5-氨基水杨酸制剂治疗2个月前后测定了IL-1(含量,治疗前为11.9(11.8 pg/ml,明显高于治疗后的7.4(7.8 pg/ml(p=0.017)。 IL-2的含量溃疡性结肠炎患者为14.2(3.6pg/ml,正常对照为12.3(2.1 pg/ml,两者比较有显著性差异p0.01。不同病变范围的IL-2变化愈合者为14.6(1.8 pg/ml,直肠病变为12.8(1.5 pg/ml,直乙状结肠为13.8(1.8 pg/ml,左半结肠为13.1(14.6 pg/ml,全结肠为16.7(5.6 pg/ml,其中已直肠病变者为最低,全结肠病变最高(p0.05)。不同病变程度IL-2含量:0级为14.5(1.7 pg/ml,1级为12.1(2.1 pg/ml,2级为13.7(2.3 pg/ml,3级为16(5.2 pg/ml,2级和3级较1级有明显增加(p0.01)。0级者亦高于正常对照(p0.01)。初发患者IL-2含量为14.6(4.3 pg/ml,与复发患者的14(3 pg/ml(p=0.52)无差异。其中有19例患者在经正规的5-氨基水杨酸制剂治疗2个月前后测定了IL-2含量,治疗前为14.4(2 pg/ml,与治疗后的12.8(2.4 pg/ml(p=0.025)有明显差异。 IL-6的含量溃疡性结肠炎患者为24.4(48.6pg/ml,正常对照为 WP=7 2(0.45 pg/ml,两者比较有显著性差异p0.01。不同病变范围的IL-6变化愈合者为3.8(2.4 pg/ml,直肠病变为16.6(46 pg/ml,直乙状结肠为26.8(47 pg/ml,左半结肠为41.7(56 pg/ml,全结肠为36.6(66 pg/ml,其中以左半结肠病变最高,与愈合期者比较有显著性差异(p0.05)。不同病变程度IL-6含量:0级为3.6(2.4 pg/ml,1级为19.8(44.7 pg/ml,2级为26(49 pg/ml,3级为39.2(62 pg/ml, 3级较0级有明显增加(p0.05)。0级者亦高于正常对照(p0.01)。初发患者IL-6含量为26.4(53 pg/ml,与复发患者的21(43 pg/ml(p=0.68)无差异。其中有19例患者在经正规的5-氨基水杨酸制剂治疗2个月前后测定了IL-6含量,治疗前为28(48 pg/ml,与治疗后的16(39 pg/ml(p=0.026)有明显差异。 IL-8的含量溃疡性结肠炎患者为685(790pg/ml,正常对照为25(21 pg/ml,两者比较有显著性差异p0.0001。不同病变范围的IL-8变化愈合者为289(373 pg/ml,直肠病变为499(736 pg/ml,直乙状结肠为686(755 pg/ml,左半结肠为1407(846 pg/ml,全结肠为815(926 pg/ml,其中以左半结肠病变最高,与愈合期和直肠病变者比较有显著性差异(p0.01)。不同病变程度IL-8含量:0级为267(364 pg/ml,1级为332(418 pg/ml,2级为999(943 pg/ml,3级为894(851 pg/ml,2级和3级较0级和1有明显增加(p0.01,0.05)。0级者亦高于正常对照(p0.01)。初发患者IL-8含量为758(833 pg/ml,与复发患者的696(803 pg/ml(p=0.77)无差异。其中有19例患者在经正规的5-氨基水杨酸制剂治疗2个月前后测定了IL-8含量,治疗前为983(737 WP=8 pg/ml,与治疗后的342(433 pg/ml(p=0.0002)有明显差异。 IL-12p40的含量溃疡性结肠炎患者为149(77pg/ml,正常对照为59.8(31.5 pg/ml,两者比较有显著性差异p0.01。不同病变范围的IL-12P40变化愈合者为121(33 pg/ml,直肠病变为152(78 pg/ml,直乙状结肠为136(62 pg/ml,左半结肠为158(53 pg/ml,全结肠为185(119 pg/ml,有逐渐增加的趋势


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