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体内自降解防硬膜外粘连及其复合药物缓释膜的研究

吕宏  
【摘要】: 背景:椎板切除术是脊椎外科常用的手术方式之一。椎板切除造成的局部缺损是通过纤维结缔组织增生来修复的,经历着炎症反应、肉芽组织产生、瘢痕组织形成等基本病理过程,其基础是炎性细胞和修复细胞的一系列活动。椎管内瘢痕组织增生与粘连形成是引发腰椎手术失败综合征的重要原因,严重影响脊椎外科手术的治疗效果。研究开发出预防术后椎管内瘢痕组织增生与粘连形成的材料与方法是脊椎外科领域亟待解决的课题。国内外学者在基础实验和临床实践方面进行了大量而有益的研究,取得了一定的进展,但有肯定效果、广泛用于临床的材料与方法并不多。脊髓损伤的病人,在手术后往往需要进行药物治疗,长时间的局部肌肉注射不仅增加病人的痛苦,同时降低药物的吸收,影响治疗效果。目前尚无一种既能够防止硬膜外粘连,又同时起到药物缓释作用的材料。 目的:研制一种新型的体内自降解防止椎板减压术后硬膜外粘连且具有局部药物缓释作用的生物膜。 方法:分为以下四个方面进行研究: 一、DL-PLA/CHI生物膜的体外降解研究 实施方法:将定量的DL-PLA微粉溶于丙酮溶剂中,分别加入经计量的CHI粉末,以获取不同比例的三种DL-PLA/CHI复合物(DL-PLA:CHI比例分别为(9:1)(8:2)(7:3)),充分搅拌后倒于平底容器中,丙酮挥发后形成0.5mm厚的片材,最后裁成40mm×20mm×0.5mm的样条供实验。同样方法制备纯DL-PLA样条供实验用。将片材浸泡在30ml生理盐水中,放置在37℃恒温箱内,浸泡2Ws-16Ws,测定降解液的pH值;试件的外观形态改变;失重率的的测定;DL-PLA分子量的测定。结果:1)PH值:从表1-1中可以看到DL-PLA降解液的PH值在12周以前基本平稳,无明显变化,第12周后PH值迅速降低,至16周时降至2.68。而对于DL-PLA/CHI复合物,在前12周,与纯DL-PLA相比,其降液的PH值却略有升高,并且随CHI含量增加而增高。降解至12周后,降解液的PH值也迅速下降,至第16周时降至2.74~3.24。2)失重率:从实验结果可以看到纯DL-PLA失重率随着时间的变化最少,DL-PLA/CHI复合材料 第二军医大学博士论文 中文摘要 随着Cth的增加,失重率随着时间的变化增大。3)分子量:复合物中的DL-PLA 在降解的各个时期的My都比同时期的纯DL-PLA的高,而且CHI的含量 越高,其DL-PLA的My越高,说明复合物中DL-PLA的降解速度比纯DL PLA的慢。纯DL-PLA分子量降解半衰期约4周,而复合材料中的DtrPLA 分子量降解半衰期约为4~8周,Cffi在不同程度上对DL-PLA的降解有抑制 作用。 二、生物膜作为载体的药物缓释研究 实施方坛:将定量的DL-PLA微粉溶于丙酮溶剂中,分别加入经计量的CHI 粉末,避光加入甲钻胺对照品,以获取不同比例的 DL.PLA/ Cffe甲钻胺复合物 以及纯DLPLA/甲钻胺复合物。充分搅拌后倒于平底容器中,丙酮挥发后形成。 0.smm厚的片材,最后裁成 20 rum X 20mm X 0.5 mm的样条供实验。同样方法 制备纯 DL-PLA/甲钻胺复合物样条供实验用,大小为 20 mm X 20mm X 0.5 mm 的样片约966ngclnZ 卜每片甲钻胺含量是0.sing供实验。将含甲钻胺0.sing 的纯PLA/甲钻胺和PLA/CHI/甲钻胺复合物(PLA:CHI分别为 9/l、8/2、7/3) 片材放于20ml生理盐水中,在光照条件下温浴,每天对溶液用分光光度法测量 光度值,每次测量后重新更换浸浴的20ml生理盐水,连续测量30天,对测量 值进行统计学分析。结果:DL-PLA/ Cffo甲钻胺复合膜中 DL-PLA所占越低, 甲钻胺的释放速率就越快,DLgrLA/ Cffi比例为 7/3的复合膜甲钻胺的每天释 放浓度明显减少,在第 20天的时候用分光光度法已检测不出;DL.PLA/ Cffi比 例为出2的复合膜甲钻胺的每天释放浓度降低较慢,在第24无时用分光光度法 检测不出;DLFLA/ CHI比例为 9/l的复合膜甲钻胺的每天释放浓度降低更加 缓慢,在第 29天时用分光光度法检测不出。而 DL-PLA/甲钻胺复合膜中甲钻 胺的每天释放浓度的降低最慢,在检测的30天内缓慢降低。说明DL-PLA/CHI 的比值越高,甲钻胺的释放速度越快;DL-PLA:Cffi的比值越高,甲钻胺的释 放速度越快;DLPLA/CHI的比值越低,甲钻胺的释放速度越慢。 三、DL.PLA/Cffi防粘连膜的生物学评价 实施方法: -2- 第二军医大学博士论文 中文摘要 1.细胞毒性试验:本试验采用 DL-PLAj CHI复合物(DL-PLA:CHI比例为 8/2) 的浸提液,按下面两


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