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老龄大鼠急性酒精中毒时大脑及肝脏组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制物mRNA表达的研究

拓西平  
【摘要】:研究背景及目的 随着人们生活水平的提高,酒的消费量也稳步上升。虽然少量酒精可使人产生欣快感,长期适量饮酒尚有预防心血管疾病和痴呆的作用,但随着饮酒量的增加,尤其是酗酒,会导致一系列的酒精相关性损害。如高浓度的酒精会导致恶心、呕吐、步态不稳、复视及镇静作用。当血浓度达到3~4g/L时会意识不清且有记忆障碍,浓度超过5g/L时呼吸受抑。长期大量饮酒会导致学习和记忆障碍、酒精性痴呆及酒精性精神病。心血管系统方面大量饮酒会导致心输出增加、心肌病变、心律不齐甚至猝死。酒精还可引起酒精性肝病—肝硬化、酒精性胰腺炎、食道炎、酒精性肾损害、酒精性性功能减退、酒精性血液系统疾病等一系列问题,甚至引发部分社会问题,严重地影响了人们的身心健康。老年人由于各器官功能本身处于边缘状态,在大量饮酒时更容易出现多个脏器功能不可逆转的损害。 人体内天然存在着一个相互对立又平衡的纤溶系统,其中纤溶酶原激活物(plasminogen activator,PA)包括组织型纤溶酶原激活物(tPA)和尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA),参与血栓和细胞外基质成分(extracellular matrix,ECM)的降解。而1型纤溶酶原激活物抑制物(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1) 第二军医大学博十学位论文 中文摘要 是t队和u队的主要生理抑制剂,其含量和活性在肝脏中最高。PAI一1的过度表 达会导致纤溶系统的失衡,对栓塞的形成和纤维化的发展均有促进作用。 我们的前期研究发现大鼠在酒精性肝病早期就有肝脏队I一1 mRNA的表达 增强,提示能够作为早期评价酒精性脏器损害的指标之一。但在老龄动物急性酒 精中毒时的体内表达情况尚不清楚,本研究的主要目的是探讨大鼠随着增龄肝脏 和大脑皮层组织中队I一1 mRNA表达的情况,及急性酒精中毒时老龄大鼠肝脏和 大脑皮层组织中队I一1 mRNA表达的变化,为队I一1 mRNA运用于临床评估酒精 性多脏器损害提供实验研究基础。 材料与方法 将老龄与幼龄雄性SD大鼠分别随机分为酒精灌胃组和对照组。酒精灌胃组 以50%酒精(v/v) 12ml爪g每日灌胃两次,对照组则以等量蒸馏水灌胃。7d后 解剖动物获取肝脏及大脑皮层组织标本,抽提总RNA后,采用单管竞争性 Rl飞PCR法在同一体系中进行队I一1 mRNA和内参照物尽actin mRNA片段的扩 增,扩增产物经电泳分离后,对比分析两者的光密度值,得到队I一1 mRNA相对 于介actin mRNA的相对表达量。 结果 短期大剂量酒精灌胃后老龄酒精灌胃组大鼠的死亡率明显高于其他三组。老 龄酒精灌胃组、老龄对照组、幼龄酒精灌胃组、幼龄对照组肝脏队I一1 mRNA件aetin mRNA的相对表达量分别为0.872士0.075、0.551士0.054、 0.712士0.123、0.437土0.163。无论老龄或幼龄大鼠,短期大剂量酒精灌胃后,队I一1 mRNA相对表达量均较同龄对照组显著增高(尸均0.01);同时老龄对照组大鼠 肝脏PAI一1 mRNA的相对表达量较幼龄对照组明显增高(P0,05);而且老龄酒 精灌胃组肝脏PAI一1 mRNA的相对表达量显著高于幼龄酒精灌胃组(P0.01)。 大脑皮层组织样本的表达情况,老龄酒精灌胃组均表达了PAI一1 mRNA(16/ 16);其余各组队I一1 mRNA的阳性表达样本数分别为老龄对照组7/15、幼龄 酒精灌胃组6/15、幼龄对照组。/15。了检验发现,老龄酒精灌胃组队I一1 mRNA 的阳性表达率显著高于老龄对照组(P0.01)和幼龄酒精灌胃组(P0.01);幼 第二军医大学博卜学位论文 中文摘要 龄酒精灌胃组的阳性表达率则明显高于幼龄对照组(尸0.05);而老龄对照组的 阳性表达率较幼龄对照组也有明显增高(p0.05)。 结论 1.随着增龄,大鼠的肝脏和大脑皮层组织中PAI一1 mRNA表达较为明显, 此现象与临床老年人较多出现肝脏和大脑皮层组织病变,导致相关器官功能下降 相吻合。 2.短期大剂量酒精摄入可诱导大鼠肝脏和大脑皮层组织中高表达队I一1 mRNA,提示PAI一1 mRNA的检测可作为衡量酒精性多脏器损害的实验室研究指 标。 3.老龄大鼠短期大剂量酒精摄入时大脑和肝脏组织中PAI一1 mRNA的高表 达现象更为显著,提示老年人饮酒更应有所节制,以防加速多脏器功能衰退。


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