应用小干扰RNA抑制人瘢痕疙瘩Smad基因表达的实验研究

【摘要】：目的：探讨应用小干扰RNA(small interferencing RNA，siRNA)特异性抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad(Smad2、Smad3)基因表达，明确siRNA转染对细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达的影响。方法：根据siRNA设计原则，针对人Smad基因序列特征分别设计Smad2、Smad3特异siRNA，转染瘢痕疙瘩成纤维细胞；RT-PCR及Western Blot检测靶基因表达。结果：合成并筛选出特异抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad基因siRNA，通过特异抑制Smad基因表达可有效抑制细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达。结论：首次合成并筛选出特异抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2、Smad3特异siRNA。通过抑制Smad2或Smad3基因表达，阻断TGF-β信号转导可以有效降低瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原基因表达。