大鼠羊膜上皮细胞体外向类神经干细胞诱导分化及其移植后对视神经再生的作用

【摘要】： 视觉系统一些疾病会造成视神经损伤而引起患者失明,目前临床上尚无良好的治疗方法,而视神经再生的研究将为治疗这些疾病提供实验依据。本研究通过体外培养妊娠晚期大鼠羊膜上皮细胞,予以免疫细胞化学、RT-PCR等方法鉴定后,应用不含血清的神经干细胞培养基诱导大鼠羊膜上皮细胞向类神经干细胞方向分化,并予以免疫细胞化学、RT-PCR等方法鉴定。然后,将Hoechst33342荧光标记的正常羊膜上皮细胞与诱导后的羊膜上皮细胞分别移植入大鼠受损视神经中,应用Hoechst33342荧光追踪移植细胞、视网膜HE染色和尼氏染色计数视网膜节细胞数量、视神经HE染色、免疫组织化学染色等方法初步探讨细胞移植后对视网膜节细胞的存活和视神经轴突再生所产生的作用。结果表明,应用不含血清的神经干细胞培养基可诱导大鼠羊膜上皮细胞向类神经干细胞方向分化；诱导前后的羊膜上皮细胞移植入受损视神经后,能在损伤部位大量存活并向损伤区两端迁移,能提高视网膜节细胞存活率,增加远侧段视神经的细胞数量,促进视神经轴突再生。相对来说,诱导后的羊膜上皮细胞较诱导前的细胞移植对视神经修复作用更强些。从而提示我们诱导后的羊膜上皮细胞经移植后能促进视神经损伤的修复,为临床修复视神经提供新思路。