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8-MOP/UVA对人类皮肤光老化形成的影响及芳维A酸乙酯拮抗作用研究

刘仲荣  
【摘要】: 皮肤光老化目前缺乏可靠实用的人体模型。出现皮肤过早老化外观是 皮肤科临床上补骨脂素长波紫外线光化学疗法(PUVA)的主要副作用。8- MOP/UVA的共同作用可能为研究皮肤光老化提供良好的体内外模型,但其 分子生物学机制尚不清楚。本课题以PUVA治疗寻常型银屑病患者背部非 皮损区真皮及培养的胎儿真皮成纤维细胞为对象,采用HE染色、Verhoeff 染色、电镜、酶组织化学、免疫组织化学(ICC)、原位杂交(ISHH)、流 式细胞计数仪(FCM)、三引物PCR、PCR-SSCP技术及PCR产物直接测序等 技术和方法,研究了8-MOP/UVA对皮肤光老化形成的影响及芳维A酸乙酯 的拮抗作用。生物学指标包括:①真皮组织细胞外基质的改变;②细胞衰 老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)的表达;③p16蛋白的表达;④基质 金属蛋白酶MMP-1、MMP-3 mRNA及其天然拮抗剂TIM P蛋白的表达;⑤线 粒体DNA(mtDNA)突变的累积。研究结果如下: 1.8-MOP/UVA作用下,寻常型银屑病患者背部非皮损区真皮中胶原纤 维、弹力纤维变性增多、排列紊乱。 2.8-MOP/UVA作用下,体内外真皮成纤维细胞生物学特性出现具有光 老化特征性的改变:①细胞由具有分裂活性的分裂表型转化为不具有分裂 能力的分裂后表型,形态学出现细胞衰老的相应改变;②SA-β-Gal表达 增加;③p16蛋白表达增加;④MMP-1、MMP-3 mRNA持续表达而TIMP蛋 白表达仅被轻微诱导;⑤mtDNA 4977bp缺失大量累积,培养成纤维细胞 mtDNA复制控制区DLP_6片段414碱基迅速出现大量A→C的点突变。 3.芳维A酸乙酯对8-MOP/UVA诱导皮肤真皮及培养成纤维细胞出现的 具有光老化特征性的改变有明显的拮抗作用。 结论: 1.8十 可诱导寻常型银屑病患者背部非皮损区真皮及培养人类 真皮成纤维细胞迅速出现具有光老化特征性的组织学及生物学特性改变, 以PUVA治疗的非暴露部位皮肤及8-MOP/UVA作用的培养真皮成纤维细胞 作为研究对象建立人类皮肤光老化模型是可行的。 2.8啪 几VA可诱导寻常型银屑病患者背部非皮损区真皮组织及培养 的成纤维细胞迅速产生光老化相关的mtDNA突变,建立迅速产生光老化相 关mtDNA突变的体内外模型,利用该模型进一步研究mtDNA突变在光老化 皮肤中的产生机制及其在皮肤光老化形成中的作用是可行的。 3.芳维A酸乙酯对8仇 几VA引起的寻常型银屑病患者背部非皮损 区真皮及培养真皮成纤维细胞具有光老化特征性的改变有明显的桔抗作 用,对皮肤光老化有防治作用。


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