收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人毛乳头细胞生长相关蛋白生物学活性的初步研究

罗洋  
【摘要】:在组织器官(如牙齿、肠、羽毛等)的发育和再生过程中,上皮细胞和间质细胞的相互作用具有极为重要的意义。研究表明,位于毛囊底部的特殊间质成分——毛乳头在毛囊的形态学发生和毛囊的周期性生长调控中起主导作用。毛乳头细胞作为毛囊的主要间质成分,在毛囊研究中具有相当重要的地位。 在胚胎发育过程中,毛乳头细胞来源于位于表皮基板下方的一群凝集性生长的真皮间质细胞。在鼠触须、鼠体被毛、羊和人皮肤等分离培养毛乳头细胞,培养的毛乳头细胞在形态上类似于真皮成纤维细胞,但一般均表现为凝集性生长方式,在培养皿中形成相互重叠的细胞团,而周围则形成空隙;真皮成纤维细胞则表现为平铺式的融合性生长。在培养情况下,毛乳头细胞的凝集性生长特性将随着细胞传代次数的增多而逐步丧失,一般情况下,第6代以后细胞不再表现凝集性生长。 凝集性生长是毛乳头细胞的重要生物学特性之一,凝集性生长与毛乳头细胞的功能和分化状态有关。但是毛乳头细胞凝集性生长的分子机制不明,同时凝集性生长状态下毛乳头细胞所分泌的蛋白在毛囊发育和毛囊周期性生长调控中的作用也少有研究。 毛乳头是一个可诱导毛囊生长的结构,它能发送或接受信号,从而影响毛囊的发育和周期性生长。最近研究发现了许多在毛囊形态学发生和周期性生长中起作用的信号分子,如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors, FGFs)、骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)、神经营养因子、血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor , PDGF)等。这些信号分子大多来源于毛囊上皮细胞,它们构成了一个复杂的网络,尚不能确定其中具有关键作用的因子。研究这些因子可能难以从根本上阐明毛囊发育和周期性生长的具体机制,但是我们对于毛乳头细胞自身分泌的生长相关蛋白在其凝集性生长和毛囊周期性生长调控中的作用知之甚少,因此有人提出,毛乳头细胞自身分泌的生长相关蛋白将是今后毛囊研究的重要内容。 鉴于以上认识,我们认为研究毛乳头细胞凝集性生长状态下所分泌的特异性蛋白有助于阐明毛乳头细胞凝集性生长、毛囊发育及周期性生长调控的分子机制。因此,通过 国家自然科学基金资助课题(编号30200249) 及重庆市科委重点攻关课题(编号2001-8-4) WP=13 收集凝集性生长人毛乳头细胞培养液上清制备成条件培养基,分别作用于传代培养后失去凝集性生长特性的毛乳头细胞和临床斑秃患者,用来阐明毛乳头细胞生长相关蛋白对活力较弱毛乳头细胞的影响和对毛囊生长周期的调节作用,以期为临床治疗秃发性疾病探索一种新的治疗途径。 在本研究中,我们首先从人头皮毛囊分离培养人毛乳头细胞,这些细胞具有周期性凝集性生长特性,而且这种特性随着传代次数的增多而逐步丧失。凝集性生长作为毛乳头细胞的固有特性与其生物学功能密切相关。我们收集凝集性生长人毛乳头细胞培养液上清制备成条件培养基,培养9代毛乳头细胞,发现其能将非凝集性生长的毛乳头细胞转化为凝集性生长状态;我们又将条件培养基培养的9代毛乳头细胞与基础养基培养的9代毛乳头细胞分别作细胞计数,发现条件培养基有明显促进高传代毛乳头细胞增殖的能力;我们再将2代毛乳头细胞与9代毛乳头细胞共培养,发现9代毛乳头细胞有向低传代毛乳头细胞转化的趋势,而2代毛乳头细胞未出现向高传代转化的趋势。这些结果表明凝集性生长毛乳头细胞所分泌的生长相关蛋白与毛乳头细胞的凝集性生长等生物学特性有关。 我们应用3H-TdR掺入技术,发现基础培养基培养的毛乳头细胞,其3H-TdR掺入值随着细胞传代增高而降低,而对应的条件培养基培养的高传代毛乳头细胞其3H-TdR掺入值是相对较高的,这表明条件培养基可促进活力较弱的高传代毛乳头细胞的增殖;我们应用RT-PCR技术,观察分泌性蛋白血管内皮生长因子mRNA的表达状况,发现基础培养基培养的毛乳头细胞,其血管内皮生长因子mRNA的表达随着细胞传代增多而降低,而对应的条件培养基培养的高代毛乳头细胞其血管内皮生长因子的表达是相对较高的,这表明条件培养基可促进活力较弱的毛乳头细胞的分泌性蛋白的基因表达;我们再在电镜下观察条件培养基培养的高代毛乳头细胞,发现其细胞核靠边,细胞内核糖体较多,内质网分泌成池,呈圆形和椭圆形,而用基础培养基培养的高传代毛乳头细胞,其电镜下可见其细胞核居中,细胞内核糖体较少,内质网分泌成星形或条索状,这表明条件培养基可促进活力较弱的高传代毛乳头细胞的分泌。这些结果表明凝集性生长毛乳头细胞所分泌的生长相关蛋白可促进活力较弱高传代毛乳头细胞的增殖和分泌性蛋白的表达和分泌。 我们收集凝集性生长人毛乳头细胞培养液上清制备成毛乳头细胞条件培养液冻干粉,经热源试验、急性毒性试验、细菌培养、真菌培养等检查无异常,经查排除人免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体感染,经本院伦理委员会讨论同意临床使用,并征得患者同意且签署知情同意书的情况下应用于斑秃患者。我们发 WP=14 现在50例毛乳头细胞条件培养液治疗的斑秃患者中,除2例无效外其余均有一定疗效,这与去炎松治疗组比较取得了良好的疗效。毛乳头细胞条件培养液组、去炎松组和空白组治愈率分别为74%、50%、10%,有效率分别?


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 吕中法,刘荣卿,伍津津;毛乳头细胞与毛囊生长周期[J];重庆医学;2000年02期
2 唐步顺;少年白发有因可寻[J];家庭与家教;2004年06期
3 容小翔;;少白发DE原因与治疗[J];人人健康;1996年02期
4 宋志强,郝飞,钟白玉,杨卫兵,麦跃;体外长期培养人毛乳头细胞生长特性[J];临床皮肤科杂志;2003年05期
5 伍津津,刘荣卿,叶庆佾,钟白玉,唐书谦;毛囊真皮细胞的培养和组织化学研究[J];重庆医学;1998年06期
6 ;高效健脑生发器 人为什么会脱发[J];科学养生;2006年05期
7 许永杰;少年白发何其多[J];饭店现代化;2000年01期
8 健文;拔胡子有损健康[J];解放军健康;2003年02期
9 张建刚,刘杰,孙晓玮,王德文,高亚兵;毛乳头细胞分离培养及其体外生长特性[J];中华皮肤科杂志;2004年06期
10 苗勇;胡志奇;孙锡金;谭挺;陈明娟;;受力部位的不同对毛囊单位移植物的影响[J];南方医科大学学报;2009年09期
11 云翔;少白头的来龙去脉[J];饭店现代化;1997年05期
12 鲁元刚,伍津津,赵莉蓉,麦跃;人毛乳头细胞的冻存[J];重庆大学学报(自然科学版);2002年08期
13 张建刚,刘杰,王德文,孙少华;毛囊生物学及其在皮肤组织工程中的应用[J];军事医学科学院院刊;2003年05期
14 罗洋,郝飞;毛囊生长周期与毛乳头[J];西北国防医学杂志;2004年04期
15 钟白玉,杨卫兵,杨希川,郝飞,伍津津;二步酶消化法分离人头皮毛乳头细胞[J];中华皮肤科杂志;2003年07期
16 李宇,林常敏,蔡湘娜,李国强;微囊法体外重建人头皮毛乳头诱导毛囊再生功能的评价[J];中国临床康复;2005年06期
17 宋志强,郝飞;毛乳头细胞生长相关基因的筛选[J];重庆医学;2002年09期
18 程波,刘荣卿,伍津津,麦跃,钟白玉,唐书谦;改良毛乳头细胞培养法[J];中华皮肤科杂志;2001年05期
19 宋志强,郝飞,杨希川,钟白玉,杨卫兵,叶庆佾;应用抑制性消减杂交技术从斑秃脱发区毛乳头中克隆出一条自身抗原基因[J];第三军医大学学报;2004年01期
20 李宇,李国强,纪影畅,蔡湘娜,林常敏;一步酶消化法高效快速分离培养人头皮毛乳头细胞[J];中国美容医学;2004年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 ;米诺地尔、螺内酯对体外培养人毛囊生长的影响[A];第四届华东六省一市整形外科学术会议暨2007年浙江省整形、美容学术会议论文汇编[C];2007年
2 廖传德;蒋淑明;;中药治疗毛发上皮瘤初探[A];2006中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2006年
3 廖传德;蒋淑明;;中药治疗毛发上皮瘤初探[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
4 吕中法;;皮肤淀粉样变?[A];2009年浙江省皮肤病学术会议论文汇编[C];2009年
5 陈志刚;于洋;张忠慧;;真皮下血管网皮瓣法治疗腋臭[A];第二十五届航天医学年会暨第八届航天护理年会论文汇编[C];2009年
6 陈学杰;李爱林;王松山;余墨声;陕声国;龙道畴;;头发移植术后男性型秃发患者头皮性激素受体变化的实验研究[A];第十一次湖北省整形外科学术会议第四次湖北省医学美容学术会议论文汇编[C];2004年
7 田颖;;生发剂概述[A];2006年中国化妆品学术研讨会论文集[C];2006年
8 汪长寿;乌日罕;李衡;吕东媛;杜晨光;王秀梅;赵鹏伟;李淑凤;曹贵方;;绵羊毛囊培养方法的建立及雌二醇对毛囊BCL-2、BAX表达的影响[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2008年
9 范卫新;唐唯佳;;血管内皮生长因子和血管生成素在斑秃皮损中的表达[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
10 徐光勇;周春英;白永晟;;腋窝皱襞微小横切口治疗腋臭79例[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨希川;毛囊生长期毛乳头细胞差异表达基因文库的构建及筛选[D];第三军医大学;2004年
2 罗洋;人毛乳头细胞生长相关蛋白生物学活性的初步研究[D];第三军医大学;2004年
3 杨卫兵;HSPC011和HSPC016基因在毛乳头细胞的表达及其生物学功能的研究[D];第三军医大学;2003年
4 滕晓坤;导致小鼠无毛突变的关键基因的定位和克隆以及在小鼠毛发发育中作用的研究[D];上海交通大学;2008年
5 程波;毛囊细胞间相互作用的研究[D];第三军医大学;2001年
6 李玉荣;内蒙古绒山羊不同时期皮肤中相关基因差异表达及原位杂交的研究[D];内蒙古农业大学;2008年
7 丁国斌;人胎儿表皮干细胞的分离培养、基因转染及向毛囊的定向分化[D];第四军医大学;2004年
8 席海燕;绒山羊皮肤干细胞定位、迁移及次级毛囊生长期差异表达基因文库的构建与筛选[D];内蒙古农业大学;2009年
9 苏蕊;内蒙古绒山羊绒毛生长、脱落期皮肤差异表达基因的研究[D];内蒙古农业大学;2009年
10 刘迎春;成年绒山羊皮肤干细胞的分离、纯化、鉴定与诱导[D];内蒙古农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 易娟;促进毛乳头细胞体外增殖的新方法:P21的基因沉默[D];河北医科大学;2014年
2 位争伟;毛囊真皮成分细胞生物学特性及其诱导毛囊形成的初步研究[D];第三军医大学;2003年
3 李国强;Ⅰ型胶原酶一步消化法高效、快速分离培养人头皮毛乳头细胞及微囊化培养的研究[D];汕头大学;2004年
4 张坤;Wnt10b在小鼠毛囊中的表达及其作用的初步研究[D];第三军医大学;2009年
5 韩萨茹拉;成纤维生长因子5(FGF5)在绒山羊皮肤中的表达及多态分析[D];内蒙古农业大学;2009年
6 赵艳丽;辽宁绒山羊皮肤毛囊活性变化规律与细胞凋亡的研究[D];吉林农业大学;2008年
7 张俊霞;山羊HGT KAP基因家族成员的克隆及其mRNA在皮肤中的表达[D];内蒙古农业大学;2007年
8 崔鸿雁;绒山羊和蒙古羊Hoxd9基因的研究[D];内蒙古农业大学;2008年
9 郭燕燕;c-Myc在毛囊胚胎发育及生长周期中作用的初步研究[D];第三军医大学;2008年
10 陶可;饲粮蛋氨酸水平对长毛兔毛囊发育、产毛性能的影响[D];西南大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 徐宝德;男人的胡须不该拔[N];中国中医药报;2006年
2 浙江省人民医院皮肤科主任医师 潘卫利宋黎胜 整理;树叶落了防脱发[N];健康报;2007年
3 蒋晓梅;“吃”出一头秀发[N];经济消息报;2000年
4 黄爱群;小心,别“拔”出病来[N];中国医药报;2001年
5 张栋;美发从均衡营养入手[N];大众卫生报;2007年
6 戴巧;青年斑秃何其多[N];中国石油报;2001年
7 华平;胡须不宜用手拔[N];大众卫生报;2004年
8 ;烫发后怎么老脱发?[N];健康时报;2005年
9 记者 吴仲国;手腕上长出头发来[N];科技日报;2001年
10 李浩东;远离白发少发的困扰[N];健康报;2006年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978