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急性髓性白血病多药耐药基因芯片的构建

张锦海  
【摘要】: 急性髓细胞白血病(Acute Myelogenous Leukemia ,AML)治疗的主要手段是化疗,而临床上多药耐药(Multidrug resistance ,MDR)已成为化疗失败的主要原因。目前尝试逆转MDR的结果尚不理想,因此尽早准确预测MDR的发生,及时指导临床调整治疗是MDR研究的主要目的之一。 MDR是多因素多机制共同作用的结果,目前公认的主要机制之一是耐药相关基因的异常表达。例如,MDR1(multidrug resistance gene 1)基因编码Pgp(P-glycoprotein,P糖蛋白),与化疗效果相关,可作为AML等血液肿瘤预测复发和预后,评估逆转MDR策略的重要指标。多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)基因也具有赋予MDR表型的能力,和Pgp的耐药机制有所不同;MRP单独表达对化疗效果和预后的影响还不十分明确,但MRP基因和其它耐药基因联合表达对AML的疗效和预后则是一个很强的不良信号。肺耐药相关蛋白(Lung resistance protein,LRP)可能通过核靶点屏蔽等机制引起MDR,其基因表达水平与肿瘤细胞化疗耐药有关,有研究表明LRP在AML中也是一个影响化疗敏感性和预后的独立因子,在体外预测MDR比Pgp和MRP都要好。乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein ,BCRP)基因过度表达可导致临床化疗耐药,是AML患者预后的重要不良因素。B细胞淋巴瘤白血病基因2(B-cell lymphoma-leukemia-2 gene,Bcl-2)是凋亡抑制基因,在肿瘤的发生发展中起重要作用,其高表达与许多抗白血病药物的耐药和临床白血病难治、复发有关,越来越受到学者们的重视。 对MDR相关基因mRNA表达或其表达蛋白的检测,目前主要有原位杂交、免疫组化、RT-PCR等方法,但仍存在特异性和敏感性方面的问题,且一般只能粗略反映某一基因的表达水平。免疫细胞化学结合流式细胞仪的方法近年来为国内外研究人员所推荐,但难于适应同时进行多通道大样本量的临床实践检测需要。 使用基因芯片可以解决上面提到的难题。基因芯片(Gene chip)的检测原理为将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地排列于支持物上,每平方厘米


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