收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肾移植急性排斥反应尿液中早期标志物研究

贾雄飞  
【摘要】: 急性排斥反应(acute rejection,AR)是影响移植肾长期存活的一个关键因素。也是引起早期移植物损害和长期的移植物功能障碍以及慢性移植物肾病的主要原因,而目前通常诊断肾移植术后发生急性排斥反应方法包括:1.病人临床体征,2.血肌酐、尿素氮等非特异性生化指标检查,3.移植肾影像学检查,4.移植肾穿刺病理活检。前3项检查指标只有当移植肾功能发生明显损伤后才能出现改变,并且这些改变都是非特异性的。组织活检虽然是确诊急性排斥反应的“金标准”,但穿刺活检可能导致严重的并发症,而由于活检取材部位的限制,并不能及时、全面的反应出移植肾的损伤情况。因此,目前临床急需筛选具有前瞻性、非侵入性和特异性的早期诊断AR的方法,以指导临床用药,提高移植肾的长期存活率 尿液可以及时准确地反映整个肾脏的生理状态和功能水平,而且收集简单方便、是非侵入性诊断肾脏疾病的理想标本。器官移植排斥反应的发生是一种复杂的、动态的、多因素的病理过程,很难用传统单一的指标来准确反映。而蛋白质组是动态的,有它的时空性,能够在生命有机体整体水平上阐明生命现像的本质和活动规律。因此本课题以肾移植术后发生AR前、中、后各期的尿液作为研究对象,应用二维凝胶电泳-质谱技术(2-DE-MS)及Westernblot技术等,以期找到一组具有前瞻性和特异性的蛋白分子作为早期诊断的候选标志物。 首先,我们根据尿蛋白的含盐高的特点优化了2-DE过程中等电聚焦程序,与Bio-rad操作手册推荐的等电聚焦方法相比,获得的尿液2-DE图谱点数由476个增加到564个。为充分去除尿液中的盐分,我们建立了尿蛋白丙酮沉淀三步法处理样品,结果显示尿蛋白丙酮沉淀三步法处理得到的样本在上述优化的等电聚焦条件下所获得的分离蛋白点更加清晰且圆,水平条带更少。说明本次研究建立的2-DE技术平台适用于尿蛋白研究。 然后,为了消除尿蛋白样品的个体差异,本研究采取的是移植排斥反应前后患者自身样品的比较,即:排斥前3天相对光密度值与排斥后21天相对光密度值相比,选择表达量变化大于3倍(P﹤0.05),并根据两个体取6个时相点即:-3/-2/-1/7/14/21天相对光密度值做趋势分析,应同时具有明显下降趋势的30个蛋白点进行鉴定。经MADIL-TOF-MS/MS成功鉴定出其中的16个蛋白,经文献复习、生物信息学和蛋白功能检索,从中筛选了与免疫排斥反应相关的3个蛋白,分别为α-1抗胰凝乳蛋白酶(alpha-1-antichymotrypsin ,AACT),锌-α2糖蛋白(Zn-Alpha-2-Glycoprotein,ZAP)和肿瘤排斥抗原gp96(tumor rejection antigen gp96,gp96),进行进一步临床样本免疫印记验证。 对肾移植术后发生AR患者临床确诊排斥前3~5天(n=8)和未发生AR患者术后7天(n=10)尿液蛋白进行Westrenblot验证发现:以肉眼观察印记条带出现有无为判断标准,三个蛋白判定的准确率、敏感性和特异性分别为:AACT, 77.78%/100%/60%;ZAG, 77.78%/100%/60%;gp96, 83.33%/87.5%/80%。将三个蛋白各组的测定值与同组对照的比值,运用LINGO8.0软件进行统计学处理,得到三个蛋白的判断理论临界值[0.15, 0.35, 0.50],以此界值作为判别标准时,单一的ZAG可以将准确率、敏感性和特异性提高到100%/100%/100%,AACT准确率、敏感性和特异性分别达到94.4%/100%/90.00%;gp96准确率、敏感性和特异性分别达到88.9%/100%/90.00%。最后应用统计学建立优化模型对三个蛋白联合进行判别时,与原始病例实际结果的符合率达100%,但其确切的诊断价值还有待多中心大样本的临床试验确认。 综上所述,我们的研究结果提示,联合应用AACT、ZAG和gp96三个蛋白临界值可作为早期诊断肾移植急性排斥反应的指标。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘伟;;肾移植术后环孢素A血药浓度监测及临床意义[J];中国实用医药;2011年15期
2 姚许平;陈实;;重视肾移植术后系统随访[J];现代实用医学;2011年07期
3 丰贵文;尚文俊;乔保平;庞新路;刘磊;王跃;李金峰;;长期存活的肾移植受者个体化治疗91例[J];郑州大学学报(医学版);2011年04期
4 吴斌;吴逢波;卢静;于磊;唐尧;;肾移植术后TOR-I替代CNI免疫抑制治疗的Meta分析[J];中国药房;2011年34期
5 王羽;张静;王璐璐;乔小云;;环孢素血药浓度与肾移植术后病人空腹血糖的关系[J];药学服务与研究;2011年04期
6 马永文;王东文;石韶华;武小桐;;他克莫司与环孢素A在肾移植术后应用的综合评价[J];实用医技杂志;2011年07期
7 张秀琼;;肾移植术后肺部感染病人的护理[J];现代临床医学;2011年04期
8 韦婵;闫鲲;谢飞;李俊贤;党彦龙;王娟;苟亮;;肾移植术后带状疱疹8例分析[J];中国误诊学杂志;2011年19期
9 王灵香;殷淑君;仝杰英;;肾移植术后患者不遵医行为原因分析及对策[J];医学信息(上旬刊);2011年05期
10 姚许平;翁国斌;姜继光;祁洪刚;张曙伟;高文波;任雨;唐莉;楼江涌;翁锡君;魏军军;黄建军;;同种异体肾移植1016例次临床分析[J];现代实用医学;2011年07期
11 陈铸;王光策;何伟;王锁刚;崔勇;;乌司他丁对延迟肾功能恢复DGF移植肾的保护作用[J];中国医药指南;2011年25期
12 梁慧;陈鹏;吕剑波;;经皮穿刺肾盂治疗移植肾输尿管狭窄[J];医学影像学杂志;2011年05期
13 史会平;张勇;何东初;;26例肾移植术后并发肺部感染的治疗体会[J];中外医疗;2011年18期
14 张曙伟;翁国斌;祁洪刚;任雨;翁锡君;;自体输尿管在远期移植肾输尿管狭窄治疗中的应用[J];现代实用医学;2011年05期
15 张燕;;肾移植术后早期发生播散型水痘1例的护理[J];中国误诊学杂志;2011年21期
16 王卓萍;梁木兰;陆丰媚;;心理干预对肾移植术后并发肺部感染患者的影响[J];卫生职业教育;2011年13期
17 王海波;;肾移植76例术后肺感染早期高分辨率CT诊断分析[J];中国误诊学杂志;2011年25期
18 蒋树林;田海;谢宝栋;刘开宇;陈巍;;心脏移植术后急性排斥反应1例临床监测经验总结[J];器官移植;2011年04期
19 司中洲;吴建国;贺志军;李亭;;IL-17与Th17细胞在小鼠心脏移植急性排斥反应中的作用[J];中南大学学报(医学版);2011年07期
20 杨臻峥;;免疫抑制剂Belatacept获准用于预防肾移植排斥反应[J];药学进展;2011年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李旭东;杨宇如;魏强;吴泰相;;肾移植术后两种不同免疫抑制剂抗急性排斥反应的META分析[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年
2 陈莉莉;郭芳;;肾移植术后急性排斥反应肾自发破裂的超声表现[A];中华医学会第六次全国超声医学学术年会论文汇编[C];2001年
3 马无瑕;;1例因沟通失误引起肾移植术后急性排斥反应的护理体会[A];2008年全国中西医结合肾脏病南京论坛论文汇编[C];2008年
4 热衣汉;刘健;桑晓红;;2剂赛尼哌预防肾移植术后急性排斥反应的应用研究[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
5 李旭东;杨宇如;魏强;吴泰相;;肾移植术后他克莫司与环孢素A抗急性排斥反应的META分析[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
6 朱正;;大鼠同基因和同种异基因肾移植急性排斥反应病理初步研究[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
7 朱冬;朱同玉;许明;戎瑞明;王国民;;肾移植术后尿差异性代谢产物分析在诊断急性排斥反应中的作用[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年
8 孙晶;韩国锋;;微乳化环孢素C_2对肾移植术后急性排斥反应的预示作用[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
9 朱同玉;王继纳;许明;戎瑞明;;高龄活体亲属供肾移植14例临床分析[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
10 王苏娅;陈江华;吴建永;王慧萍;寿张飞;黄洪锋;韩飞;王仁定;吴东波;谢文卿;;移植肾不典型急性排斥反应临床研究[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 傅耀文;同种异体肾移植术后急性排斥反应临床诊断及免疫耐受监测实验研究[D];吉林大学;2004年
2 张更;激素抵抗性排斥反应患者1型血管紧张素Ⅱ受体自身抗体的表达及其与RAS基因多态性的关系研究[D];第四军医大学;2007年
3 王亦斌;急性排斥反应过程中外周血穿孔素和颗粒蛋白酶B mRNA表达的研究[D];第一军医大学;2004年
4 彭勇;核因子-κB圈套协同CTLA4-Ig抗大鼠肝移植急性排斥反应的研究[D];重庆医科大学;2005年
5 宋维亮;活体小肠移植的临床及基础研究[D];第四军医大学;2005年
6 王海梁;趋化因子CXC亚族及其受体CXCR3在肝移植急性排斥反应中的作用[D];第二军医大学;2008年
7 周勇安;人IL-10和TGF-β_1基因体外共转染对大鼠移植肺保护作用的实验研究[D];第四军医大学;2005年
8 谭浩翔;受体骨髓间充质干细胞输注在大鼠原位肝移植中的作用[D];南方医科大学;2007年
9 梁绍勇;肝再生增强因子防治大鼠肝移植急性排斥反应实验研究[D];重庆医科大学;2008年
10 田川;BTLA和ICOS早期预测肾移植术后急性排斥反应的临床研究[D];山东大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈蓉艳;运用SELDI-TOF MS筛选肾移植急性排斥反应特异性标志物的初步研究[D];福建医科大学;2009年
2 史文凤;肾移植术后外周血CD3~+/CD8~+T淋巴细胞上HLA-Ⅰ类分子(-A,-B,-C)表达的检测和意义[D];山东大学;2009年
3 孙鹤云;OPN和IL-18在大鼠肾移植急性排斥反应中的表达研究[D];苏州大学;2007年
4 苗强;同种异体肾移植术后移植肾功能延迟恢复的研究[D];吉林大学;2006年
5 张长征;CD4~+T细胞内三磷酸腺苷浓度与肾移植术后免疫状态关系的研究[D];南方医科大学;2010年
6 陈远林;肾移植亚临床排斥反应患者血清细胞因子的水平变化及干预治疗对其影响的研究[D];中南大学;2008年
7 韩伟;肾移植术后急性排斥反应的临床分析[D];新疆医科大学;2008年
8 张艳;104例肾移植临床分析[D];新疆医科大学;2006年
9 钟敏;BAFF分子在肾移植受者外周血单个核细胞的表达[D];苏州大学;2008年
10 李沙丹;CD15s抗原在肾移植急性排斥中的检测和临床意义[D];第三军医大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 雒启东;肾移植术后有哪几种排斥反应[N];家庭医生报;2008年
2 江苏省中医院泌尿外科 卢子杰;中医狙击肾移植术后并发症[N];中国中医药报;2011年
3 史武元;肾移植术后两注意[N];健康报;2004年
4 解小成;张亚东;肾移植术后感染的中医治疗[N];中国医药报;2003年
5 方 宁;肾移植术后并发症的中医治疗[N];中国中医药报;2004年
6 汤水福 刘洲 陈刚毅;肾移植术后并发症的中医治疗[N];中国医药报;2003年
7 记者 方芳通讯员 孟庆玲;全国年龄最小亲体肾移植成功[N];北京日报;2007年
8 陈夏;高荷玲;白虎汤可控制肾移植术后高热[N];中国医药报;2004年
9 彭龙开;肾移植术后要防巨细胞病毒感染[N];大众卫生报;2007年
10 易善永;肾移植后何时才能生育[N];健康报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978