收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘对大鼠精子的联合毒性研究

黄玉晶  
【摘要】: 持久性有机污染物(Persistent Organic Pollutants),简称POPs,指的是持久存在与环境中,具有很长半衰期,并且能通过食物链积聚,并对人类健康及环境造成不利影响的有机化学物质。POPs对人类和环境带来的危害已成为全球性环境问题。由于目前世界上POPs物质有几千种,在有限的财力、物力、人力条件下,很难全面进行研究。因此,选择本地区需要优先监测和关注的环境及人群体内的优先POPs(priority POPs)进行研究,对于高效率的环境监测、污染治理以及健康防护具有非常重要的意义。 本课题组前期研究发现三峡库区水环境中的污染物以多环芳烃类物质和邻苯二甲酸酯类的检出频率和检出浓度最高。本实验拟以含量较高的邻苯二甲酸二丁酯(DBP)做为邻苯二甲酸酯类物质代表,以毒性较强的苯并[a]芘(Bap)做为多环芳烃类物质代表,对这两类物质联合毒性进行研究。有文献报道,DBP、Bap均具有确切的雄性生殖毒性,但两者低剂量联合作用下雄性生殖毒性特别是针对生精细胞的毒性及机制研究尚未见报道。本研究注重突出联合亚慢性毒性,以DBP与Bap低剂量联合作用于雄性大鼠,从毒性效应和机制两个层次开展研究,观察其联合毒性作用及机制,可为客观评价及预测POPs污染对人群健康的损害、建立环境健康效应的预警体系打下很好的基础。 试验方法 1.实验动物及分组情况 4-5周龄健康雄性SPF级SD大鼠245只,由第三军医大学实验动物中心提供,按随机数字法随机分为7组(每组35只),分别为对照组(玉米油)、Bap低剂量组(Bap 1 mg/kg)、Bap高剂量组(Bap 5 mg/kg)、DBP低剂量组(DBP 50 mg/kg)、DBP高剂量组(DBP 250 mg/kg)、DBP+ Bap低剂量组(DBP 50 mg/kg +Bap 1 mg/kg)、DBP+ Bap高剂量组(DBP 250 mg/kg +Bap 5 mg/kg)。 2.染毒及取材 采取隔天灌胃的方式进行染毒,连续染毒90d。30d、60d、90d时每组各处死8只,处死前称体重,10%水合氯醛腹腔麻醉,采集心脏血后,立即处死剖取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾,称重后将睾丸于冰上迅速切分为约50 mg- 100 mg的小块,分装于冻存管中液氮保存。血液离心后取血清于-70℃保存,用于测定激素。每组留4只90d后与健康雌性SPF级SD大鼠交配,观察生育能力。 每组随机取1只大鼠的左侧睾丸,冰上迅速取材后固定于2.5%戊二醛,然后梯度酒精脱水、环氧树脂渗透、包埋、切片,醋酸铀和柠檬酸铅染色,透射电镜下观察。 随机选取5只大鼠的右侧睾丸,4%多聚甲醛固定液中固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,光镜下观察,拍照,通过计算机图像分析软件(DP72-BSW)测定生精小管和睾丸面积,计算生精小管平均横截面积和生精小管与睾丸面积比。 随机选取8只大鼠单侧附睾,置于0.09%生理盐水内洗去血水,将洗净的附睾置于生理盐水内用眼科剪剪碎,轻压组织碎块,静置2 min- 3 min释放出精子,显微镜下观察精子活性和畸形、计数精子数。 随机选取6只大鼠单侧睾丸(90d时相点对照组和高剂量染毒组(Bap 5组、DBP 250组、B5+ D250组)各多选1只用于蛋白表达分析)用组合酶法分离生精细胞。 生精细胞分化情况分析:将生精细胞悬液用PBS洗2次,加1 mg/ ml RNA酶37℃孵育30 min,加入碘化丙碇4℃染色30 min,通过流式细胞仪进行相关分析(分析软件:Cellquest)。 生精细胞蛋白表达分析:提取生精细胞悬液总蛋白进行等电聚焦和SDS-PAGE,使用软件ImageMaster 2D Platinum 5.0分析各组蛋白表达差异;切下具有表达差异的蛋白点使用MALDI-TOF/TOF质谱仪(Bruker Ultraflex)进行质谱分析(N2激光器(发射波长337 nm),加速电压25 KV),使用软件moverz和peakErazor分析质谱图,通过用mascot收索引擎检索鉴定蛋白。 3.统计方法 使用SPSS软件进行统计,交配实验结果使用卡方检验,其他结果使用单因素方差分析。 结果与讨论 1.邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘对大鼠生长发育的影响 各染毒组与对照组的大鼠体重变化各组之间无显著性差异,说明本实验两种化合物的染毒剂量及染毒时间对大鼠的消化吸收与能量代谢无明显影响,不会对大鼠生长发育没有造成过度的压力而影响实验结果。 各组大鼠的心脏系数、脾脏系数、肾脏系数和睾丸脏器系数各组间无显著性差异(P0.05),可认为本实验两种化合物的染毒剂量及染毒时间不会对大鼠的心脏、脾脏、肾脏和睾丸产生明显毒性作用。 肝脏器系数在染毒30d时低剂量联合组出现明显降低(与其它各组比均有显著性,P0.05),在染毒60d和90d时差异消失(P0.05)。提示肝脏不仅是Bap和DBP的代谢器官,也是其靶器官,低剂量联合染毒可导致肝脏急性损伤,引起脏器系数的降低,这种肝脏毒性可能为短期效应,长期染毒时机体逐渐对其耐受。 染毒90d两者低剂量联合染毒组与对照组相比附睾脏器系数显著性下降(P0.05),可能由于两者低剂量联合染毒对附睾的损伤逐渐超过机体的耐受能力,造成附睾萎缩。 2.邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘睾丸形态学影响 2.1电镜观察 与对照组相比,各染毒组电镜下均可见不同程度的细胞超微结构损伤,主要表现为生精细胞线粒体肿胀、固缩,内质网扩张。 Bap低剂量单独染毒组(Bap1组)前期损伤较小,染毒90d时出现染色质聚集和脂滴。DBP低剂量单独染毒组(DBP50组)在染毒初期和中期超微结构病理改变比较重,90d时开始恢复。Bap和DBP低剂量联合染毒组(B1+ D50组)从超微结构观察整个染毒过程中损伤较小,在60d时有内质网和线粒体肿胀形成髓鞘样结构以及染色质聚集。 Bap高剂量单独染毒组(Bap5组)在整个染毒过程中受影响较大,超微结构观察染毒30d时可见细胞严重损伤,结构破坏,层次不清;60d可见细胞水肿,间隙增大;90d时内质网扩张、线粒体水肿、出现大量脂滴。DBP高剂量单独染毒组(DBP250组)在30d和90d时未出现严重的超微结构病理改变,60d时可见细胞结构破坏、层次不清。Bap和DBP高剂量联合染毒组(B5+ D250组)与DBP类似,30d和90d时超微结构病理改变较小,存在部分线粒体固缩,60d时可见生精细胞从基膜脱落。 2.2光镜观察 光镜观察发现不论是Bap和DBP的单独染毒还是联合染毒,都存在一定层度的生精细胞层数减少、空泡化、生精细胞间隙增大以及生精细胞脱落,有的还能观察到间质细胞增生。与Bap相比,DBP对睾丸组织形态学影响出现的要早,在染毒30d时候就出现生精细胞间隙增大、层数减少;联合染毒组的表现主要在于高剂量联合染毒60d时可见间质细胞增生,而生精细胞本身变化在形态学上并不明显。 2.3计算机图像分析 我们运用计算机图像分析软件在光镜下进行分析,发现: 曲细精管横截面积比较可见各染毒组曲细精管均有不同程度的萎缩。Bap和DBP低剂量联合染毒组出现最早,30d就显著性差异(与对照组比,P0.05),60d时差异不明显(与对照组比,P0.05),90d时又出现显著性差异(与对照组比,P0.05),体现了一个损伤→代偿→失代偿的过程;其次是DBP低剂量单独染毒组,在第60d开始出现曲细精管明显萎缩,与对照组比有显著性差异(P0.05),90d是差异持续存在,是一个逐渐损伤的过程;其他4组(Bap低剂量单独染毒组、Bap高剂量单独染毒组、DBP高剂量单独染毒组、两者高剂量联合染毒组)均在30d、60d与对照比差异不明显(P0.05),90d时与对照组比有显著性差异(P0.05)。与其电镜、光镜观察结果相比较,可以看出一个由超微结构→细胞→组织的损伤或修复的时间顺序。 曲细精管占睾丸体积百分比在60d、90d时各染毒组与对照相比无显著差异(P0.05),在30d时DBP单独染毒组(DBP50组、DBP250组)与其他各组相比均显著升高(P0.05)。通过与曲细精管横截面积变化结果相比较,我们推测30d时DBP单独染毒组其曲细精管占睾丸体积百分比增加可能是由于其间质组织萎缩引起,而90d时各染毒组可能都出现了不同程度间质组织萎缩。 3.邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘对大鼠生殖能力的影响 3.1精子数量和质量分析 临床评价男性生育能力的三个常规指标精子计数、成活率以及活性,染毒90d时各组间无显著性差异(P0.05),提示我们的染毒剂量外推到人群时,该剂量下临床生育能力检查可能不会发现明显改变,不易引起重视。 精子计数结果与90d时附睾脏器系数比较,我们认为两者低剂量联合染毒组90d时与对照组相比附睾脏器系数显著性下降(P0.05),可能不是因为精子数下降而是由于附睾内附睾管上皮细胞减少,这些细胞参与构成附睾内精子成熟、精子运动能力和受精能力的获得和发育所必需的微环境,它们的损伤将会影响精子成熟以及精子运动能力和受精能力的获得和发育,此外作为附睾功能重要调控因素的睾酮在血清中浓度下降将会加剧这种影响。根据文献报道,进入附睾的精子在结构上已经趋于完整,因此这种影响在引起精子畸形方面主要表现为断头畸形的增加,这与我们的精子畸形观察结果一致,我们在试验中发现Bap和DBP低剂量联合暴露引起的精子畸形增加主要表现为断头畸形。 DBP高剂量染毒组在染毒90d时畸形精子的数量明显增加(与对照组比P0.05),低剂量联合组在染毒90d精子畸形率增加更显著,高于对照组、单独剂量组以及联合高剂量组(P0.05),结合附睾脏器系数的改变,我们认为在低剂量时,两者联合后在生殖毒性上显示出加强效应。 3.2生殖相关激素的改变 低剂量联合染毒组血清T水平与对照组、Bap低剂量组相比在30d、90d显著下降(P0.05),而60d时无显著差异(P0.05),呈现出一个典型的损伤→代偿→失代偿的过程。 血清LH水平变化与我们血清T水平的相反,低剂量联合染毒组90d时与对照组相比显著升高(P0.05),推论本试验所用的染毒剂量长期单独或联合暴露染毒对青春期SD大鼠血清LH水平没有直接影响,其LH水平改变可能来源于血清T水平改变引起的负反馈调节,其对睾酮浓度的影响不是通过LH浓度改变,而是在LH之后的途径,例如抑制间质细胞功能、增强肝脏对睾酮代谢等。 3.3对大鼠繁殖能力影响的分析 Bap高剂量染毒和两者高剂量联合染毒会造成死胎和吸收胎出现率显著高于对照和DBP高剂量单独染毒(P0.05)。因此我们认为虽然Bap高剂量单独或两者高剂量联合长期暴露后虽然在一般生长发育指标、生育能力常规指标(精子计数、精子存活率、精子活性、精子畸形)及激素水平上与对照相比均没有明显改变,但是其生育能力已经受到影响。 4.邻苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘对生精细胞分化和蛋白表达的影响 4.1生精细胞分化改变 我们发现Bap和DBP低剂量联合染毒在精子发生上表现出早期兴奋(30d、60d)而后期逐渐失代偿并出现抑制(90d)的效应,主要集中在减数分裂阶段;单独低剂量染毒也早期有类似效应,但出现兴奋的时间要晚于联合染毒(60d),晚期机体逐渐对其耐受,兴奋效应消失(90d),从而在联合效应上出现协同→拮抗→协同的变化。高剂量组Bap单独染毒对精子发生过程始终没有显著影响,DBP高剂量单独染毒和低剂量单独染毒类似,从中期(60d)开始出现兴奋效应;两者高剂量联合在中期开始表现出以DBP效应为主,Bap对其拮抗。 4.2生精细胞蛋白表达改变分析 通过比较各组二维电泳图,我们共得到35个表达差异蛋白点,我们将这35个点通过蛋白质谱鉴定,有5个点未得到结果(无峰),剩下30个点中有11个为阴性结果(分值小于60),最后得到19个有阳性意义的蛋白,对比这些蛋白在各组间的差异,我们发现: 与精子发生密切相关的核内不均一核糖核蛋白在高剂量联合染毒组表达与Bap高剂量单独染毒组相比增强;在精母细胞的分化、精子在附睾内的成熟、精子获能和顶体反应过程中起重要作用的肿瘤拒绝抗原gp96在高剂量联合染毒组中比Bap高剂量单独染毒组表达降低;参与精原细胞有丝分裂和减数分裂并在其中其重要作用的β肌动蛋白在高剂量联合染毒组中比Bap高剂量单独染毒组表达降低。这几种蛋白表达差异可能是造成染毒90d时高剂量联合染毒组中与Bap高剂量单独染毒组相比在光镜、电镜照片中形态学损伤小而在流式细胞计数中却出现明显的精子发生过程受影响、减数分裂受阻的原因。 参与染色质组装或分解、转录、调控转录以及DNA依赖、负调控转录、染色质修饰,与DNA结合、染色质结合、转录抑制因子相关的色素框同源物2在Bap高剂量单独染毒组表达消失(与高剂量联合染毒组、对照组比均有差异),这可能与Bap高剂量生精上皮结构破坏有关。 与减数分裂、精子尾部鞭毛装配、维持细胞核形态等密切相关β-微管蛋白在Bap高剂量单独染毒组中特异性表达(与对照组相比),推测是Bap高剂量单独染毒引起生精上皮结构破坏导致β-微管蛋白过度表达;白蛋白在Bap高剂量单独染毒时候在生精细胞中表达增加(与对照组、高剂量联合染毒组相比),可能是由于Bap高剂量单独染毒引起生精上皮结构破坏,血睾屏障被破坏而致使白蛋白渗漏进生精上皮内部引起。 与铁转运相关的血红素结合蛋白在各染毒组生精细胞中表达与对照组相比均上升,Bap高剂量单独染毒组与对照组相比还存在转铁蛋白表达上升,提示Bap和DBP长期染毒引起睾丸损伤作用与铁有关。 高剂量联合染毒与Bap高剂量单独染毒相比,与线粒体的能动性相关的多毛蛋白表达消失,提示高剂量联合染毒生精细胞内线粒体活动性比Bap高剂量单独染毒要强,这可能是我们在电镜照片下发现90d时高剂量联合染毒组线粒体损伤远低于Bap高剂量单独染毒组的原因之一。 广泛参与体内脂肪族及芳香族醛类代谢的线粒体乙醛脱氢酶在各染毒组生精细胞中均出现线粒体乙醛脱氢酶特异性表达(与对照组相比),推测其可能参与睾丸对DBP和Bap及其代谢产物的生物转化。 高剂量联合染毒组与DBP高剂量单独染毒组相比糖代谢途径限速酶之一的丙酮酸激酶3的2亚型表达消失,提示两者能量代谢系统存在差异。 结论 1. DBP和Bap染毒对大鼠生育能力影响 DBP和Bap长期低剂量联合染毒可引起血清T水平显著下降,同时还损伤附睾内微环境导致精子断头畸形增加。Bap高剂量单独或Bap和DBP高剂量联合长期暴露不会影响一般生长发育指标、生育能力常规指标及激素水平,但能够影响雄性大鼠的生殖能力。 睾丸形态学改变:①Bap低剂量单独染毒前期损伤较小,后期出现损伤;DBP低剂量单独染毒在初期损伤较大,后期开始恢复;②Bap和DBP低剂量联合染毒全程损伤较小,呈现拮抗效应,两者高剂量联合染毒在形态学方面表现以DBP表现为主;②各染毒组曲细精管均有不同程度的萎缩。 2. DBP和Bap染毒对大鼠生精细胞分化及蛋白表达的影响 DBP和Bap低剂量联合染毒主要影响精子减数分裂阶段,表现为早期兴奋而后期逐渐失代偿并抑制;单独低剂量染毒早期有类似效应,但出现兴奋的时间要晚于联合染毒,晚期兴奋效应消失,从而在联合效应上出现协同效应→拮抗效应→协同效应的变化。高剂量组Bap单独染毒对精子发生没有显著影响,DBP高剂量单独染毒和低剂量单独染毒类似,从中期开始出现兴奋效应;两者高剂量联合在中期开始表现出以DBP效应为主,Bap对其拮抗。 二维电泳和质谱分析表明各染毒组与对照组相比均出现血红素结合蛋白表达上升,线粒体乙醛脱氢酶特异性表达;Bap高剂量单独染毒组与对照组相比色素框同源物2表达消失,β-tubulin特异性表达,白蛋白、转铁蛋白表达上升;高剂量联合染毒组与DBP高剂量单独染毒组相比丙酮酸激酶3的2亚型表达消失,与Bap高剂量单独染毒组相比核内不均一核糖核蛋白增强,肿瘤拒绝抗原gp96、β-actin、白蛋白表达降低,多毛蛋白表达消失。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 黄宇烽,徐元诚;精液检验中存在的问题及纠正方法[J];男科学报;1995年02期
2 郭睿;崔慧琳;常冰梅;张悦红;解军;;小鼠曲细精管内生精细胞的分离(英文)[J];山西医科大学学报;2006年06期
3 李欣;颜勇;;肾阳虚大鼠睾丸生精细胞增殖与凋亡的变化[J];承德医学院学报;2007年01期
4 梁佳;姜恩魁;;芹菜素对大鼠生精细胞凋亡作用的影响[J];辽宁医学院学报;2007年02期
5 张先平;才秀莲;王乾兴;刘连;;锰对大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响[J];毒理学杂志;2007年03期
6 黄伟东;;精浆C-反应蛋白测定在临床中的应用[J];实用医技杂志;2007年27期
7 邹焰;李宏彬;陈伟;陆祥;;砷暴露大鼠生精细胞XRCC1蛋白表达的研究[J];遵义医学院学报;2007年03期
8 沈美玲;;人类生精细胞凋亡的调控因素[J];山东医学高等专科学校学报;2009年03期
9 何红云;邓仪昊;杨新文;杨开明;;葛根素减轻乙醇导致大鼠生精细胞的凋亡[J];基础医学与临床;2009年12期
10 孙巧平;钟进义;李蕾;崔静;;萘乙酸诱发小鼠睾丸生精细胞损伤作用的研究(英文)[J];现代生物医学进展;2010年03期
11 周喜民;氨基酸掺入生精细胞的放射自显影的观察[J];国外医学.计划生育分册;1982年02期
12 苏华;支持细胞在睾丸局部调节中的作用[J];生殖与避孕;1989年02期
13 王惟炯;虞枝生;吴萍;;男性不育症88例睾丸活检病理分析[J];皖南医学院学报;1989年04期
14 田健;佘振珏;周孝瑚;张德成;金吉琴;;雷公藤多甙对大鼠生精细胞及其酶活性的影响[J];生殖与避孕;1993年02期
15 曹志刚;李振武;; 睾丸活检对无精子症病因的探讨[J];淮海医药;1993年S1期
16 吴东;无精子症患者两侧睾丸活组织检查比较[J];临床泌尿外科杂志;1994年02期
17 李宏霞,杨在昌,张天宝,曾祥贵;钒对睾丸支持细胞/生精细胞的体外毒性研究[J];癌变畸变突变;1995年04期
18 沙国柱,肖景珠,黄宇烽,张连贵,徐建平,戚大梁,商学军,毛锡智;精液、睾丸针吸细胞学与睾丸活检的相关性[J];男科学报;1996年02期
19 陈国千;生育及不育男性精子形态和生精细胞分析[J];温州医学院学报;1996年02期
20 叶树俊,黄宇烽,崔英霞,商学军,徐建平,王咏梅;精液中生精细胞染色体的直接低渗制备与初步应用[J];临床检验杂志;1997年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴盼;季宇彬;郎朗;;线粒体对生精细胞凋亡的调控[A];中国药理学会第六届生殖药理学专业学术研讨会论文摘要汇编[C];2009年
2 施玉樑;白俊平;王文萍;;人精子膜的离子通道和男性抗生育中药对生精细胞Ca~(2+)通道的抑制[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年
3 刘美玲;;大鼠睾丸特异表达基因LM23的鉴定和分析[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
4 张春影;姜杨;张海峰;袁谭;;壬基酚致大鼠生精细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
5 张燕君;杜一;王登宇;崔海音;孙冰玉;孔维华;;前列腺素E合成酶cPGES在小鼠睾丸中的表达及热激后变化[A];2008年神经内分泌暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
6 卞廷松;赖仁胜;徐福松;朱长乐;;睾丸生精障碍性不育症患者的生精细胞凋亡实验研究[A];新编男科理论与临床——中华中医药学会第七届中医男科学术大会;全国中医男科临床与科研方法高级研修班;2006年云南省中医男科诊疗技术培训班讲义与论文集[C];2006年
7 季宇彬;吴盼;郎朗;;线粒体对生精细胞凋亡的调控[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
8 俞作仁;关纪奎;葛晔华;马静;郭睿;李赛;薛社普;韩代书;;小鼠精子发生不同阶段生精细胞的基因表达谱-精子细胞变态相关基因的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
9 郭睿;俞作仁;关纪奎;马静;葛晔华;李赛;王莎丽;薛社普;韩代书;;小鼠生精细胞阶段特异性表达基因的分析及其组织特异性表达特征[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年
10 杨筱珍;陈耀星;王子旭;;己烯雌酚影响成年仓鼠睾丸一氧化氮生成及其与生精细胞凋亡关系的研究[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王涛;TLR3在小鼠生精细胞中的表达及功能[D];北京协和医学院;2012年
2 徐健;小鼠睾丸生殖细胞凋亡及相关基因调控的研究[D];中国协和医科大学;1999年
3 崔光辉;棉酚与甾体激素联合用药对大鼠生精细胞凋亡相关基因表达及生精干细胞功能的影响[D];中国协和医科大学;2004年
4 乔原;大鼠精子发生相关基因rtSH3p13的功能研究[D];中国协和医科大学;2003年
5 熊伟鹏;Sertoli细胞吞噬凋亡生精细胞的机理和意义[D];中国协和医科大学;2009年
6 张晓艳;Toll样受体在小鼠受损生精细胞诱导睾丸炎症反应中的功能[D];北京协和医学院;2012年
7 刘光伟;低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响及其基因调控[D];吉林大学;2004年
8 俞作仁;小鼠精子发生不同阶段生精细胞基因表达谱的研究[D];中国协和医科大学;2003年
9 祝辉;人精子发生相关基因NYD-SP6的功能研究[D];南京医科大学;2006年
10 王志成;线粒体调控低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的机制[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 裴洪岗;黄芪对隐睾大鼠生精细胞凋亡的作用[D];江西医学院;2004年
2 徐会茹;抗FSH自身抗体对雄性生殖系统的影响及其作用机制的初步研究[D];南京师范大学;2007年
3 李桂玲;槲皮素对己烯雌酚致仓鼠生精损害的缓解作用[D];河北农业大学;2010年
4 孙静波;不同培养方法和细胞因子对小鼠生精细胞的增殖分化效应[D];安徽医科大学;2011年
5 朱勤;两种环境内分泌干扰物对小鼠生精细胞T型Ca~(2+)通道的作用研究[D];南京医科大学;2011年
6 谭俊玲;小鼠生精细胞与支持细胞自噬与自噬诱因的初步研究[D];山东大学;2013年
7 檀大羡;生精细胞体外培养的研究[D];广西医科大学;2004年
8 王晟;菟丝子黄酮在生精上皮组织培养中抗凋亡作用的研究[D];汕头大学;2004年
9 夏长河;丙烯酰胺对大鼠生精细胞XRCC1蛋白表达与凋亡的影响[D];河北医科大学;2013年
10 岳丽琴;环磷酰胺对不同发育时期睾丸生精细胞毒性损伤的动物实验研究[D];重庆医科大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 南京医科大学附属南京市妇幼保健院泌尿男科 潘连军 博士;尿不湿会引发不育?[N];健康时报;2010年
2 蒋明 戴劲松;手机辐射被证实会损伤生殖细胞[N];新华每日电讯;2005年
3 卢佳;中医调摄男性不育症6点建议[N];农村医药报(汉);2006年
4 主任医师 王有国;孕前男女防七害[N];大众卫生报;2002年
5 记者 马霞;含氟牙膏应有警示标志[N];科技日报;2006年
6 张国胜;四大元素男性不可缺[N];医药养生保健报;2007年
7 王有国;优生从孕育胎儿前做起[N];中国医药报;2000年
8 蒋明;湖北攻关课题:发现枸杞子对受损生殖系统保护原理[N];中国医药报;2005年
9 本报记者 韩明华;为了孩子的健康不要吸烟[N];保健时报;2003年
10 辛才林;良好生活习惯促进男性生殖健康[N];家庭医生报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978