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大鼠脊髓内5-HT1A受体的分布及其在痛信息传递中的作用

王文  
【摘要】: 脊髓背角是外周伤害性信息初级传入纤维的终止部位,也是下行抑制系 统的主要作用部位之一,在外周伤害性信息的传递及调控中具有重要作用, 脊髓前角则与运动功能密切相关。 5-羟色胺(5-HT)是中枢神经系统内重要的神经递质,在多种功能活动 中发挥着重要的作用,这些功能活动都由其受体介导。迄今已发现5-HT受 体有7种类型14个亚型,它们在神经系统中的分布各具特点,且与自身介 导的功能密切相关。目前,5-HT受体在神经系统中的分布只有一些配体结 合的放射自显影及少量原位杂交和免疫组织化学研究的结果。5-HT_(1A)受体是 发现较早的5-HT受体亚型,药理及生理学研究证明它与感觉、运动和植物 神经功能等有密切关系。5-HT_(1A)受体在脑内的分布较广泛,但对其在脊髓中 的分布状况缺乏详细的形态学资料。既往用放射自显影方法的研究结果证实 5-HT_(1A)受体主要位于脊髓背角。还有研究结果提示5-HT_(1A)受体阳性神经元 主要位于脊髓前角,这些结论间存在着矛盾。同时,对于5-HT_(1A)受体在脊 髓中的作用也众说纷纭。本研究采用原位杂交组织化学技术、反义寡脱氧核 苷酸方法及行为药理学方法,对5-HT_(1A)受体在脊髓中的分布及其在伤害性 信息传递过程中的作用进行了探讨,研究内容包括以下两方面: 1.大鼠脊髓内5-HT_(1A)受体mRNA阳性神经元的分布 合成针对大鼠5-HT_(1A)受体mRNA的寡核苷酸探针,用3’末端标记法 第 四 军 医 大 学 硕 士 学 位 论 文 及b-‘勾dATP标记,进行原位杂交反应,用放射自显影方法使结果可视化。 结果显示:5-HTIA受体mRNA阳性神经元见于脊髓灰质各层,以脊髓背角 浅层(I、11层)最为密集。 2.5-HTI^受体反义寡脱氧核昔酸探针降低大鼠脊髓5-HTIA受体的表达并减 弱足底注射蜜蜂毒诱导的自发痛行为反应 鞘内注射针对5-HT;^受体亚型mRNA的反义寡脱氧核苦酸(ASO人 以 WestCth BIOt方法检测给予 5-HTIA受体 ASO不同时间后,脊髓 5-HTIA受 体的表达变化;用行为学实验观察鞘内给予5-HTIA受体ASO对足底注射蜜 蜂毒(BV)引起大鼠痛行为反应的影响。Western Blot结果显示鞘内注射 5-HTIA受体ASO降低了脊髓5-HTIA受体蛋白的表达,连续给予4天后降低 至最低值;鞘内注射5卫T[A受体正义寡脱氧核昔酸侣O)则对脊髓5爿T;A 受体蛋白的表达无明显影响。缩足反射是动物的一种自发痛行为反应,行为 学实验观察到鞘内注射5-HT*受体ASO门次/天,4天)使BV诱导的缩足 反射次数明显减少,即ASO显著降低BV引起的自发痛反应。而注射生理 盐水及5-HTIA受体SO对大鼠足底皮下注射BV引起的原发性和继发性痛敏 没有明显影响。鞘内注射5书T IA受体ASO对大鼠足底皮下注射BV后,伤 害性机械性刺激和热刺激引起的双后肢缩足潜伏期的变化(痛敏)没有影响。 上述结果表明鞘内注射5-HTI^受体ASO可抑制BV引起的大鼠自发痛反应, 但对BV诱发的原发性、继发性热和机械性痛敏无明显影响。上述作用可能 与脊髓5E 受体ASO明显减少5羽 受体蛋白的表达有密切关系,提 示脊髓背角的5-HTIA受体可能参与痛信息的传递过程。


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