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紫杉醇诱导成骨肉瘤细胞凋亡及Caspase-6基因对成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用

丁勇  
【摘要】: 紫杉醇是新型广谱高活性抗癌药,其独特的作用机理是促进微管聚合并 稳定微管结构,诱导肿瘤细胞凋亡。本文应用形态学观察,MTT分析法, DNA梯状电泳,流式细胞术检测术,研究了紫杉醇对成骨肉瘤细胞系 SOSP-9607的细胞毒效应。结果发现,紫杉醇对SOSP-9607的细胞毒作用 主要是通过诱导凋亡实现的。并且证实紫杉醇在体外对成骨肉瘤细胞株 SOSP-9607有较强的杀伤作用。 哺乳动物体内发现了多种半胱氨酸蛋白酶,这些结构特点相似的酶构成 了一个蛋白酶家族,称之为Caspase家族。它在细胞凋亡过程中起着重要作 用,根据Caspase在级联反应中的作用和活化的先后,Caspase的14个成员分 为启动性和效应性Caspase。启动性Caspase在细胞凋亡信号和调节因子的作 用下首先活化,再激活效应性Caspase、活化的效应性Caspase作用于相应的 箩四军医大学博士学位论文 底物导致凋亡。Caspase-6是一种效应Caspase分子,研究表明o甲ase的表 达水平与肿瘤组织细胞凋亡有关。 本实验应用 RT—PCR方法检测了成骨肉瘤细胞株 SOSP—9607 中 Caspase-6的表达,发现其无表达。构建T Caspase七转基固腺病毒叫6载 体,月质体法转染 SOSP—9607,RT—PCR法证实转染后 SOSP—9607 中 Caspase表达明显。进一步通过MTT法W实转染Ca叩ase-6对SOSP-9607 的生长有抑制作用,通过形态学观察及DNA电泳证实这种作用主要是通过 促进细胞凋亡而实现的。


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