收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乙型肝炎病毒前S区不同片段的克隆、鉴定及与PreS1基因相互作用蛋白在酵母双杂交系统中的筛选

张伟  
【摘要】: 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Vires,HBV)属嗜肝脱氧核糖核酸病毒。其吸附,入侵肝细胞,是感染肝细胞并引起病变的第一步,病毒对细胞的感染常以病毒分子吸附于宿主细胞表面为先导,即病毒的囊膜蛋白(或无包膜病毒的衣壳蛋白)与细胞表面相应的病毒受体分子结合。这一过程常常成为决定病毒亲嗜范围与发病机理的主要因素。HBV表面抗原前S区具有丰富的生物学功能和较强的免疫原性,前S区与HBV对肝细胞的感染、病毒复制及病毒颗粒的装配密切相关,是HBV重要的保护性抗原。由此可见前S区在参与病毒与宿主细胞的相互作用中发挥着重要功能。目前对前S_1,前S_2抗原及其相关受体的研究成为HBV研究的一个热点。研究结果表明:前S_1(21—47aa)可直接与人肝癌HepG_2细胞特异性结合,前S_2则通过多聚白蛋白(pHSA)与肝细胞结合。对于HBV前S区病毒吸附蛋白及其相应受体的研究必将为我们深入了解HBV前S区的功能及其致病机制提供重要线索。 酵母双杂交是目前一种新的直接在真核细胞内检测蛋白相互作用的新技术。本研究将HBV前S区不同片断进行扩增,克隆入酵母双杂交系统3中的PGBKT7载体,转化酵母细胞AH109,经检测,证实了HBV前S区不同片断对酵母细胞无毒性作用,但是都存在自激活作用。我们通过 第回军巨大学硕士学位论文 对 PreS基因分段截短的方法,获得了对酵母细胞即无毒性作用,又没有 自激活作用的“诱饵”,通过它在酵母双杂交系统中筛选构建于AD载体 的人胎肝。DNA文库。经过高严谨度筛选和进一步鉴定,获得了一些有 t 意义的克隆,并完成了部分克隆的测序工作。为深入研究HBV病毒的嗜 肝性机制和其致病机制提供了一些实验室证据。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘鑫;于洪伟;王凤丹;王建醒;王淑娟;于晓光;;TNF-α转化酶酵母双杂交系统“诱饵”质粒的构建及鉴定[J];中国应用生理学杂志;2008年02期
2 贺凌婕;张澍田;朱圣韬;;COX-2诱饵载体的构建及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测[J];首都医科大学学报;2011年01期
3 马海蓉,李维琪;酵母双杂交衍生系统[J];中国生物工程杂志;2003年02期
4 徐春晓,喻宏,严馨蕊,黄国锦,姚立红,陈爱王君,张智清;应用酵母双杂交系统筛选hTNFα特异性结合肽[J];病毒学报;2005年05期
5 刘敏;张伟;陈天艳;蔺淑梅;刘锦锋;叶峰;赵英仁;张树林;;HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测[J];第四军医大学学报;2006年03期
6 杨继勇;沈定霞;;马红球菌酵母双杂交基因组文库的构建[J];中华医院感染学杂志;2007年10期
7 白芳;殷腾飞;徐海津;乔明强;;用酵母双杂交系统研究铜绿假单胞菌EtfA和EtfB蛋白的相互作用[J];南开大学学报(自然科学版);2008年02期
8 徐向红;李斌元;马云;廖永强;何淑雅;;耐辐射奇球菌基因组DNA表达文库的构建与鉴定[J];现代生物医学进展;2009年05期
9 秦少溥;;酵母双杂交及其衍生系统[J];生物学通报;2009年12期
10 乔勤勤;孙云燕;陈玲玲;陆萌;丰有吉;;DLX4基因酵母双杂交系统的构建及自激活检测[J];上海交通大学学报(医学版);2010年12期
11 康巧华,陈巧林,刘峰,任宏伟,茹炳根;酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用[J];北京大学学报(自然科学版);2002年02期
12 刘芳;杜志银;余秋波;王应雄;;应用酵母双杂交系统筛选DAXX相互作用蛋白[J];中国细胞生物学学报;2010年04期
13 陈坚,张晓琴,傅继梁;组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建[J];第二军医大学学报;1999年04期
14 齐兵,齐义鹏,M.Yutsudo,刘青珍;用酵母双杂交系统分离一个新的人类细胞凋亡诱发基因[J];中国科学C辑;2000年02期
15 胡又佳;高枫;朱春宝;朱宝泉;;随机序列八肽库的构建及其在双杂交系统中的应用[J];生物技术;2007年02期
16 李先昆;聂智毅;曾日中;;酵母双杂交技术研究与应用进展[J];安徽农业科学;2009年07期
17 马清钧,苏国富,刘传暄,黄培堂,徐永强,熊凌霜,于秀琴,周建光,蔡亚力,黄翠芬,王庭桂,刘荣京,牛凤霞;乙型肝炎病毒adw亚型基因组在大肠杆菌中的克隆[J];中国生物化学与分子生物学报;1985年02期
18 房德兴,甘人宝,李载平,段恕诚;乙型肝炎病毒的表面抗原126位Ilie→Ser变异株[J];生物化学与生物物理学报;1996年04期
19 张树民,陈英碚;酵母双杂交体系的新发展[J];国外医学.遗传学分册;1999年05期
20 林君英;乙型肝炎病毒S基因变异的研究进展[J];中国计划免疫;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄育华;盛国光;张建军;;海珠益肝胶囊的抗乙型肝炎病毒作用疗效观察[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
2 刘建容;;对乙型肝炎患者的心理护理及健康教育[A];全国传染病护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2004年
3 李晓鸥;过建春;张松平;;慢性重型病毒性肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的测定及其意义[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
4 屈振亮;崔乃强;吴咸中;秦明放;孔棣;周振理;;胆管癌患者合并肝炎病毒感染的回顾性研究[A];第九届全国中西医结合普通外科学术交流大会暨胆道胰腺疾病新进展学习班论文汇编[C];2005年
5 张昕;聂为民;秦恩强;周志平;张新伟;赵鹏;叶文华;范荣;赵敏;;阿德福韦酯片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床研究[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
6 崔建军;蒋小玲;许成;何清;谢成渝;范平;;聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎研究[A];第一次全国中西医结合传染病学术会议论文汇编[C];2006年
7 张晓刚;吕志平;;慢性乙型肝炎隐证型可能是肝郁脾虚证的前期阶段[A];中华中医药学会第十三届内科肝胆病学术会议论文汇编[C];2008年
8 吴福宁;李猛;;慢乙肝中医证型与肝功能指标的相关性研究[A];第十二次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2003年
9 谭太昌;;HBsAg和HbcAb阳性患者血清前S1抗原检测的临床意义[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
10 扈晓宇;吴疆;李运东;钟森;刘光伟;;清肝解毒法对慢性重型肝炎病情及MELD预后的改善作用[A];中华中医药学会第十三届内科肝胆病学术会议论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 凌宁;截短的乙型肝炎表面抗原分子的表达及其抗原特性的研究[D];重庆医科大学;2002年
2 陈公英;HBV影响IFN-γ受体表达及降低IFN-γ/p-Stat-1信号敏感性的研究[D];浙江大学;2004年
3 李玲;激活诱导细胞死亡在乙型肝炎发病机制中的意义[D];第三军医大学;2001年
4 倪宏;乙型肝炎病毒感染与肝细胞凋亡的关系研究[D];第一军医大学;2001年
5 邵俊斌;乙型肝炎病毒细胞核转位动态监测及HBV cccDNA荧光定量PCR分析研究[D];浙江大学;2004年
6 陆荫英;乙型肝炎病毒相互作用蛋白编码基因的克隆化及新基因功能的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
7 吴玉水;基因工程重组乙型脑炎病毒E蛋白作为候选疫苗和诊断抗原的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
8 王文艳;用酵母双杂交系统从大鼠心肌细胞cDNA文库中筛选与血管紧张素-(1-7)相互作用的因子[D];浙江大学;2005年
9 姚津剑;基于SNP-MaP慢性乙型肝炎不同临床转归全基因组关联研究和乙型重型肝炎预后模型的构建[D];华中科技大学;2010年
10 杨月艳;从湿、热、瘀、毒辨治慢性乙型病毒性肝炎[D];南京中医药大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张伟;乙型肝炎病毒前S区不同片段的克隆、鉴定及与PreS1基因相互作用蛋白在酵母双杂交系统中的筛选[D];第四军医大学;2002年
2 王晓黎;乙型肝炎病毒DNA逆转录酶基因特异基因变异检测方法的建立及评价[D];河北医科大学;2003年
3 张胜权;N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗乙肝病毒(HBV)作用[D];安徽医科大学;2001年
4 王东平;乙型肝炎病毒感染对造血干细胞移植的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
5 葛军辉;乙型肝炎病毒变异型s基因疫苗逆转转基因小鼠免疫耐受的研究[D];第二军医大学;2003年
6 贺启贵;门脉高压性胃病病理初步分析[D];山西医科大学;2003年
7 赵书民;乙型肝炎病毒pres_2-s基因(ayw亚型)转基因小鼠的建立[D];第二军医大学;2002年
8 杨淑丽;孕妇乙型肝炎病毒(HBV)携带者及其胎儿组织和细胞HBV标志物检测及意义[D];第三军医大学;2003年
9 王启辉;LPS_p对乙型肝炎表面抗原诱导小鼠抗体产生的影响[D];广西医科大学;2004年
10 曾国兵;中国大陆地区乙型肝炎病毒基因型地理分布及临床相关研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;乙型肝炎病毒宫内感染的早期诊断[N];科技日报;2005年
2 ;青光眼药物乙型阻滞济可能有副作用[N];中国高新技术产业导报;2002年
3 杨杰;预防乙脑的最好方法[N];农村医药报(汉);2006年
4 李民 阿不力克木·土尔逊 土逊克孜;重视肝病的防治[N];喀什日报(汉);2005年
5 孙克伟;警惕酒精性肝炎[N];大众卫生报;2007年
6 王振坤;乙型脑炎与蚊子、猪[N];卫生与生活报;2008年
7 本报记者 李颖;血友病,你知道多少[N];科技日报;2009年
8 王敏;病毒性肝炎的诊断[N];农村医药报(汉);2007年
9 本报记者  孙燕明;成人流感患者谨防肺炎并发症[N];中国消费者报;2006年
10 陈艳阳;今冬重点防范三大流感毒株[N];大众卫生报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978