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CD147分子在卵巢癌的表达及其反义核酸抑制肿瘤侵袭作用的初步研究

杨红  
【摘要】: CD147分子,又名EMMPRIN,(细胞外基质金属蛋白酶诱导因子),其功能是刺激成纤维细胞(fb)产生基质余属蛋白酶(MMPs),而MMPs可降解细胞外基质,因而与肿瘤的转移与侵袭密切相关。经实验证实该分子在卵巢癌细胞中高表达,本试验拟构建CD147分子反义载体,从分子水平抑制CD147分子的表达,从而抑制MMPs的表达,以期分析其抑制肿瘤侵袭的作用。 本试验主要分四部分:1.了解CD147分子在卵巢癌细胞中的表达情况。2.构建CD147反义表达载体。3.转染卵巢癌细胞系8910。4.观察其抑制肿瘤侵袭作用。首先鉴定CD147分子在卵巢癌细胞中的表达情况,然后双酶切已构建的克隆载体pbluescript sk(+)CD147(含CD147cDNA全长),将其反接到真核表达载体PCDNA3.1(+)上,转染高表达CD147的卵巢癌细胞株中,G418筛选,有限稀释法筛出单个克隆,扩大培养,RNAdotblotting、免疫组化SP法及流式细胞仪鉴定,观察卵巢癌细胞株膜抗原CD147被封闭情况,并通过明胶酶谱法鉴定 第IJg车【人学协卜学h沦义 CDI扑表达彼封闭后,r型胶原酶分泌下降情况。侵袭力试验及动物试 验验证其抑制肿瘤侵袭力的作用。结果显示:载体构建成功,CD147的 表达被有效封闭,厂型胶原酶分泌降低,肿瘤侵袭力下降。结论:从分 于水平抑制了CD147的表达;将其封闭后,其刺激人成纤维细胞分泌基 质金属蛋白酶(**k)的功能下降,从而间接抑制了卵巢癌细胞的浸 润转移O


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