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表皮生长因子对急性胰腺炎大鼠胰腺及肠屏障保护作用机理的实验研究

陈冬利  
【摘要】: 研究一、EGF对AP大鼠保护作用机理的实验研究 目的:检测表皮生长因子(EGF)对急性胰腺炎(AP)大鼠腹水量、血清淀粉酶、胰腺组织形态学改变的影响,以及EGF对AP大鼠空肠和胰腺凋亡指数、丙二醛(MDA)含量的影响,探讨EGF对AP大鼠保护作用的机理。方法:SD大鼠72只,采用戊巴妥钠(35mg·kg~(-1))腹腔注射麻醉,常规消毒,无菌技术作腹正中切口,找到胰胆管,分别于入十二指肠及出肝门端用小动脉夹暂予阻闭,于肝 第四军医大学博士学位论义 门端将 4号头刺入胰胆管,恒压下 1分钟内注入 3 5 mg .L‘ 牛磺胆酸钠Q.0ml叶g‘人穿刺部位以生物蛋白胶封闭, 注闭5 min后去除胰胆管两端动脉夹,诱导AP模型,逐 层关腹。大鼠诱导AP模型后,随机分为3组:对照组(仅 开腹翻动胰腺,n=24)、AP组(n=24)及吁-EGF组(n=24), AP-EGF组动物在导致M 模型后皮下注射EGF O.lp g·g‘ 体重,其余两组动物皮下注射与EGF相同体积的生理盐 水。动物每次有8只分别于术后6h、12h、24h剖杀取材, 经心脏取血2ml,采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶, 以干纱布吸沾腹水,腹水量为浸满腹水的纱布重量与干纱 布之差。各时相剖腹作大体观察,采取相同部位的胰腺组 织检测胰腺MDA含量,并观测胰腺组织学改变和细胞凋 亡。同时从屈氏韧带远侧 10 cm处开始取 Zcm空肠,观测 空肠组织细胞凋亡;另取 10 cm空肠,以预冷的生理盐水 冲洗干净肠内容和血迹,滤纸吸干多余水分及粘液,在冰 面上用玻片刮取空肠粘膜,检测空肠粘膜MDA含量。 结果:1.AP+EGF组动物病理形态损伤较AP组轻微;2. 术后 12h及24h,AP-EGF组动物腹水量(4.53士1.29 SS 6.78土1.47,7*8士1.85 vs 11.96士2二3,g)显著低于AP组 -3- 第凹军医大学博士学位论义 (P<0*5,P<0*1),AP-BGF组动物血清淀粉酶(*2.0 士8.3 vs 187.9士10.4,194.3士10.4 vs 253.3士8.6)也 显著低 于 AP组(P<0.05,P<0.of); 3.术后 24h,AP-EGF 组动物血浆(1.85土0.29。2 12士0.27,2.34士0.23。3.15 士0.38,11*。l·s\ P<0刀5)、空肠(1互 士0二svsl.31士0.24, 1.48士 0.32 g 2.15士 0.57,11 mol·g\ P<0刀5)及胰腺(4石9士 l。28 vs 5* 士1.54,5.ZI士1.46 vs 7石8士1.63,u mol.g1, P<0*5)组织MDA含量均显著低于M 组;4.术后各时相, APEGF组动物胰腺组织凋亡指数显著高于吁组 门.22 士3.53 vs 7.35士1刀4,11.67士2.40 vs 481士0.86,6.38土 1.*vsl.97士0.21,%,P<0*1),术后12h及2*,空肠 粘膜凋亡指数却显著低 于” 组(2.15 f 0.26 VS 4,78士 O.39,5.71士1.34 vs 9.56士2.01,%,P<0口1)。 结论:1.穿刺胰胆管顺行注射牛磺胆酸钠诱导AP的方法 简单易行,便于操作,模型稳定,重复性好,是一种研究 AP病因学和发展机理的可靠模型。LEGF能促进胰腺细 胞的损伤修复,减轻AP时动物胰腺的病理形态损伤,改 善AP时因胰腺微循环损害所致的胰腺出血及水肿,减少 腹腔内渗出,迅速恢复血清淀粉酶正常活性。3.EGF可 -4- 第四军医大学博士学位论文 明显降低AP大鼠血浆、胰腺及肠粘膜组织MDA含量, 减轻AP时氧自由基的损害作用。4.EGF可通过诱导AP 时腺体细胞的凋亡发挥对胰腺的保护作用,并能减轻AP 所致的肠粘膜细胞凋亡损害。


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