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相对静息期增生性瘢痕、瘢痕疙瘩瘢痕凋亡相关抗原的表达及相关因素的影响

周智  
【摘要】: 瘢痕是创伤修复的必然产物,是由肉芽组织逐渐发展和演变而来的,主要由胶原纤维组成的血管稀少的具有透明变性改变的纤维组织,瘢痕从形态和转归方面可以分为普通瘢痕和病理性瘢痕,病理性瘢痕又分为增生性瘢痕(Hypertrophic scar HS)和瘢痕疙瘩(Keloid K)两种。而瘢痕根据其发展时间和自身发展的特点,我们又可以分为生长活跃的瘢痕和相对静息期的瘢痕,相对静息期的瘢痕中,血管常常硬化闭锁,小血管、皮肤附件和成纤维细胞的结构大多消失,瘢痕主要由透明变性的胶原纤维组成。对于瘢痕的发生和演变过程和原因目前尚没有一个完整的解释,而瘢痕之间又存在着不同的生长转归特性,研究不同瘢痕之间的增殖和转化规律就成为研究瘢痕本身特质的方向。 以往的研究把目光大多投到了瘢痕的增生阶段,这个阶段瘢痕中细胞数量很多、细胞功能活跃、相关影响因素复杂,既为研究提供了机遇,但同时也增加了研究的难度和成本。在实践中我们注意 第四军医大学博士学位论文 到,并不是所有的静息期疲痕都是稳定的和一成不变的,在一定的 刺激因素下他们仍然会复发和重新拥有增殖和分泌的活性。对于静 息期癫痕的研究国内目前尚没有报道,国外也罕见文献,我们研究 相对静息期病理性癫痕,就是试图找出在癫痕相对稳定的时期本身 所具有的增殖和凋亡潜质,这对于揭示病理性疲痕的性质是一个新 的研究思路和提示。 由于成熟的癫痕的固有特征,在这个阶段,瘤痕相对稳定、细 胞数目少、增殖等生理活性降低,基本上由胶原纤维组成。在研究 中我们更多的使用了免疫组化检测抗原表达的方式,通过对静息期 病理性瘫痕中影响增殖和凋亡的相关抗原表达的检测和分析,我们 得到了一些有益的结果。 一、我们通过常规病理染色在镜下确定了研究的对象,将实验 的标本定位在处于相对静息期的病理性瘟痕上,并确定了可能影响 静息期瘤痕转归的因素,即疲痕中残存的血管及皮肤附件周围具有 增殖活性的成纤维细胞。为继续的研究提供了良好的思路和方向。 同时发现HS和K有着不同的镜下胶原纤维的形态特征,即:HS大多 为松散的,旋涡状、结节状结构。而K 中,为相对平行的,均质样 结构。两者均表现出明显的玻璃样变性的特点。 4 第四军医大学博士学位论文 二、检测了凋亡相关基因仇 1-2、Bax在相对静息期 HS、K中的 表达及分布。通过实验发现:HS和 K的成纤维细胞中他们的表达强 度及分布有所不同,在 HS中,BC-2主要分布在瘫痕上皮基底层, 真皮浅层也有少量散在表达分布,但是表达较弱;BSX表达阳性率及 强度较 k-2 高,多在上皮基底层及小血管的附近、皮肤附件周围 的成纤维细胞中出现,镜下可见的少量的游离成纤维细胞上也有表 达;而在K中,BCI-2的表达也主要在瘫痕上皮的棘细胞层和基底细 胞层,在血管周围的成纤维细胞内也有少量表达;中央区罕见的成 纤维细胞中也能看到Bcl-2着色。同时Bax的表达较k-2的弱, 而且多发生在基底细胞层。观察中,有两个K标本在瘤痕深处发现 了有凋亡抗原仇-2的染色(弱表达)。我们认为凋亡基因在癫痕表 面上皮、微小血管周围、皮肤残留附件上的表达,提示着我们,它 们在相对静息期疲痕未来的转归中可能扮演着重要的角色。 三、我们检测了相对静息期的HS、K中IV型胶原的分布及表达, 这在国内尚没有报道,结合文献我们认为IV型胶原的分布及表达对 于癫痕的转归应该有着重要的影响。实验中我们发现:在所有的病 理性疲痕标本中均有IV型胶原的表达。在HS中血管壁中可看到深褐 色的较为粗大的颗粒样物质存在,而同样在K 中的表达无论色彩深 5 第四军医大学博士学位论文 度及浓密度都远不如 HS。在对皮肤残留附件、癫痕表皮组织中的表 达的观察中我们也得到了与在血管壁上观察到的几乎相似的结论。 结合文献,我们认为在静息期的疲痕中,IV型胶原也是诱发疲痕转 归的重要的因素,但是它本身的转归和以及在活跃期痰痕中的作用 还有待进一步研究。同时我们结合所观察到的结果并结合文献提出 了以下的假设:①IV型胶原或许是在成熟期决定瘫痕走向及增生性 瘫痕消退的重要因素;②IV型胶原对于成纤维细胞分泌的I、Ill型 胶原的比例及转归可能有一定的影响作用;③w型胶原的高表达对 于上皮细胞的反馈作用也应该对上皮细胞,并通过上皮细胞对疲痕 本身的转归产生作用;④IV型胶原可能是未来诱发痰痕凋亡转归的 诱发因素。 四、我们进行了相对静息期HS爪核仁形成区嗜银染色ug-NORS) 及增殖细胞核抗原(PCNA)的检测,发现在相对静息期的HS 中 AS-NORs染色阳性区主要集中在小血管和附件周围的细胞区域,在分 布区域上K与HS相同,两者在表达强度上无显著差异。PCNA检测中 HS和K的抗原表达在分布区域上没


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