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p38MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段及实验性隐睾中的表达

蒋尔鹏  
【摘要】: 哺乳动物的精子发生过程包括:精原细胞经有丝分裂增殖分化为初级精母细胞,后者进而经过两次减数分裂,分化为次级精母细胞直至精子细胞;精子细胞变态,再由圆形精子细胞发育为形似蝌蚪状的成熟精子。而在上述过程中生精细胞主动退化的重要机制就是细胞凋亡。这些过程受到多种因素的调节,但目前对其中涉及的分子机理尚未完全阐明。 丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路在生精细胞增殖分化中的作用正日益受到人们的关注。作为细胞内重要的信号传递者,MAPK在细胞发育、分裂、凋亡以及细胞间功能同步过程中都发挥了关键性的作用。在哺乳动物细胞中已证实至少有四个MAPK亚族,即ERK、JNK/SAPK、ERK5/BMK1和p38 MAPK。细胞内每条MAPK信号转导通路都具有相对独立的功能,但各通路之间也存在着相互作用。其中,p38MAPK亚族在应激、炎症、细胞增殖分化以及凋亡中具有调节作用,因此已成为该领域近年来的一个研究热点。但目前对于p38 MAPK在小鼠睾丸发育过程中的表达及其变化尚未 —— 见研究。 为探讨p38 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段以及实验性隐宰 中的表达,我们进行了以下研究: 应用蛋白质免疫印迹杂交技术和免疫组织化学SABC法检测 1至7周龄小鼠睾丸p38 MAPK的表达及发育变化,并通过图像 分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。 建立小鼠单侧隐睾模型,并以未手术侧拳丸作为对照。应用 免疫组织化学 SABC法检测隐睾术后 5、10、15、20天各组标本 中p38MAPK的表达变化,并通过图象分析技术对免疫组织化学 结果进行统计学分析。 通过以上研究,我们得出了以下结果 门)通过免疫印迹杂交发现,p38 MAPK在 2~7周龄小鼠 睾丸中均有表达。免疫组织化学结果显示,在2周龄小鼠睾丸生 精小管上皮中即可观察到 p3 8 MAPK免疫反应阳性表达,免疫反 应阳性细胞为精原细胞;3、4、5 周龄小鼠睾丸仅有个别生精小 管上皮可见p38 MAPK兔疫阳性反应;6、7周龄小鼠摹丸中p38 MAPK表达较丰富,免疫反应阳性细胞为精原细胞和初级精母细 胞,兔疫反应阳性物质均主要位于细胞核内。在7周龄小鼠睾丸 中还可见到部分间质细胞的细胞质亦呈 p3 8 MAPK阳性。 ()隐睾术后 5天,隐睾侧 p3 SMAPK的表达与对照侧相比 无显著差别;自术后10天起,隐睾侧生精小管的形态出现不同程 度的破坏,p38MAPK的表达也较对照侧显著下降。图象分析的 统计结果显示,p3 SMAPK的表达随术后时间的推移逐渐减少。 这些结果提示,p3 8 MAPK可能在促进和维持摹丸组织的发 育成熟以及精子发生过程中具有重要的作用。P38 MAPK是一种 2 一 重要的信号转导系统,可将细胞外的刺激信号转导入细胞内,促 使调控细胞增殖、分化等过程的特定基因表达,从而使相应细胞 发生增殖、分化,因此它在细胞分裂、增殖过程中具有重要的调 控作用。p3 8 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段及实验性隐睾中的 表达定位以及变化提示,该MAPK亚族可能对哺乳动物生精细胞 的增殖分化具有调控作用,并可能参与了生精细胞凋亡过程的调 节。这为进一步从分子水平探讨 p3 8 MAPK对精于发生和睾丸功 能的调节机制奠定了基础,对于全面认识 p3 8 MAPK信号转导通 路对生殖调控的作用机理也具有重要的意义。


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