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大黄多糖对实验性脑挫裂伤大鼠的脑保护作用及其机制研究

王志鹏  
【摘要】: 研究背景:大黄是一味作用广泛的中药,临床应用已有两千余年历史,疗效可靠。业已证明,大黄对消化系统、心血管系统、泌尿系统、免疫系统、中枢神经系统疾病等疗效显著。临床应用大黄治疗脑损伤和脑缺血,具有神经细胞保护作用,能降低毛细血管通透性,能改善脑缺氧。脑外伤作为神经外科常见急症重症,其病理生理过程包括机械性冲击造成的损伤和损伤后启动的一系列生化过程引起的进行性细胞损伤。目前主要采用钙离子通道拮抗剂、NMDA受体拮抗剂、自由基清除剂、抗炎药、细胞凋亡抑制剂等进行治疗。临床报道,用大黄制剂口服治疗严重脑外伤并发高热、肾衰、上消化道出血或颅内压升高的病人疗效显著,具有降低颅内压和体温,减少胃肠道出血发生频率和出血量等多重作用。多糖作为大黄水溶性成分之一,对脑外伤是否具有保护作用?尚未见文献报道。本课题拟观察大黄多糖的脑保护作用,并初步探讨其作用机制,为大黄治疗严重脑外伤提供理论依据。 实验方法 灌胃给予不同剂量(100、200和400 mg.kg~(-1))的大黄多糖 门dd”’)5天后,复制大鼠颅脑挫裂伤模型。分别于伤后6小时、24 ’J’时、48小时处死动物,应用干湿重法测定大脑含水量,应用组织学 方法观察脑组织病理改变与神经细胞超微结构的差别,同时测定大鼠 脑皮层组织 Na+K+ATP酶、SOD活性和 MDA水平,评价大黄多糖对 脑外伤大鼠的脑保护作用。为进一步探讨大黄多糖的脑保护作用机 制,利用免疫组织化学方法观察大黄多糖对脑外伤大鼠大脑皮层 HSP70 阳性细胞数目的影响;Western七lot方法测定大脑皮层HSP70 含量的变化;分离培养胎鼠大脑皮层神经细胞,应用激光共聚焦技术 观察大黄多糖对神经细胞内游离钙离子浓度的影响。 实验结果 大黄多糖可显著降低脑外伤大鼠脑组织含水量h的.of厂 可提高大脑皮层 Na+-K+ATP酶和 SOD活性,降低 MDA水平,减少大 脑内出血和神经细胞坏死;并可减轻神经细胞线粒体肿胀,减轻线粒 体峭溶解,对抗溶酶体增生。免疫组化结果显示,大黄多糖治疗能促 进热休克蛋白(HSP)的表达,增加 HSP70阳性细胞数,并能加速 HSP70恢复正常。损伤后6小时,HSP70阳性细胞数目明显高于模型 组(P<0.01),损伤后 24 小时趋于恢复,显著低于模型组 (P<0.of);与 HSP70表达量平行相关。对原代培养的神经细胞应用 大黄多糖,无论细胞外液含钙与否,大黄多糖均可降低细胞内游离钙 离子浓度(p(.01)。 结论 大黄多糖对实验性脑外伤具有良好的保护作用,能显著减轻脑 水肿,升高大脑皮层 SOD、Na+-K+ATh酶活性,降低 MDA水平,减 轻神经细胞内钙超载。其作用可能通过促进HSP70的表达,启动内源 性保护机制,对抗二次损伤,促进脑外伤修复。大黄多糖可能是大黄 治疗脑外伤的有效成分之一。


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