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催产素受体的研究和大鼠下丘脑大细胞神经元中神经递质的受体研究

金亮  
【摘要】:催产素(OT)是一种9肽神经内分泌激素,在中枢神经系统(Central nervous system, CNS)中,主要在下丘脑视上核(Supraoptic nucleus, SO)、室旁核(Paraventricular nucleus, Pa)的大细胞内分泌神经元中合成,并经神经垂体释放入外周血,作用于其靶组织如乳腺和子宫平滑肌等,发挥促射乳(Milk eiection)、促宫缩等作用。在CNS外,OT还分布在卵巢、睾丸和附睾等生殖器官中,对生殖细胞的发育起调节作用;此外,在胸腺、肾上腺和心血管系统中,也存在OT,并可能有一定的生理功能。 传统认为,OT的生理功能局限于促射乳和促宫缩作用。最近的研究发现,除这些作用之外,OT还参与调节哺乳动物的母性行为、择偶行为及社会交往、记忆等活动。而且,在多种生理和心理应激条件下,下丘脑OT能神经元被激活,并释放大量OT入外 第四军医大学博士学位论丈 周血和脑内的神经细胞外间质。有证据表明,应激后脑内OT浓度 的升高可参与调节下丘脑一垂体一肾上腺轴 (HyPothalamus一Pitutary一adrenal gland axis,HPA轴)。 oT的各种功能是由OT受体(Oxytoein reeeptor,OTR)介导 的。OTR是由一条多肤链构成的G蛋白藕联七次跨膜受体,在OT 和OTR结合后,可以激活磷脂酶C一蛋白激酶C等系统,并通过增 加内源性Ca2+浓度等途径以产生一系列生物学效应。我们克隆了 人OTR编码区的梭基端片段并进行了原核表达;此外我们还克隆 了人OTR编码区的全长,并在COS一7细胞中进行了瞬时真核转染 研究。 OT能和精氨酸加压素(Arginine vasopressin,AVp)能神经元 组成了Pa的大细胞部和几乎整个50。它们的空间分布非常接近 且各有特点。OT能神经元基本只表达OT,AVP能神经元基本只 表达AVP。这两种神经元的细胞膜表面表达多种神经递质和调质 的受体,并接受多种不同来源的神经纤维的支配,因此,多种神 经递质或调质可以影响OT或AVP能神经元的生理功能。我们用 免疫组化的方法发现,a3和/或a5型烟碱型乙酞胆碱受体 (Nicotinie acetyleholine reeeptor,N一AehR)亚单位在大鼠下丘脑 OT能神经元中呈优势性的表达,这与上世纪八十年代英国学者 Mason类似工作的结论不一致;而且我们还发现a3和/或a5型 N一AChR亚单位还表达在OT能神经元的轴突,此阳性免疫反应的 轴突一直延续到正中隆起和神经垂体的末端;在新生7天大鼠的 下丘脑,a3和/或a5型N一AChR亚单位的分布类似成年鼠。在高 渗透压应激的大鼠下丘脑,a3和/或a5型N一AChR亚单位的优势 性分布没有变化;而此时在50,表达N一AchR样免疫反应性的OT 能树突增多。 有趣的是,我们用免疫组化的方法,在大鼠下丘脑大细胞神 经元中,发现TP物质受体(substanee P reeeptor,SPR)的分布 极其类似于a3和/或a5型N一AChR亚单位,也是呈优势性地分布 第四军医大学博士学位论文 于OT能神经元中,而且存在于轴突中。我们还用包埋前ABC免 疫电镜的方法研究了SPR在50和Pa的OT能神经元超微结构中 的分布。


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