部分代谢综合征组分的实验研究和临床分析

【摘要】：代谢综合征是由遗传和环境因素共同作用所致的，主要包括糖尿病、肥胖、高血压、高尿酸血症、高甘油三酯血症及低的高密度脂蛋白胆固醇等一系列临床表现的综合征。各代谢综合征组分之间相互影响的关系，尤其是尿酸与其它代谢综合征之间的关系还不完全明确。本研究应用细胞培养技术及临床流行病学调查的方法，观察部分代谢综合征组分之间的关系，探讨其间的作用及可能的机制。本实验分两部分： 第一部分 基础实验：葡萄糖、氧化型低密度脂蛋白、胰岛素和尿酸对血管内皮细胞的增殖及产生NO的影响。 目的 了解葡萄糖、氧化型低密度脂蛋白、胰岛素和尿酸对人脐静脉内皮细胞系(ECV304)的增殖及产生NO的影响。 方法 用不同浓度的葡萄糖、氧化型低密度脂蛋白、胰岛素及尿酸作用于ECV304，测定MTT值及NO含量。 结果 1．葡萄糖促进ECV的增殖，以22mM促增殖的作用最明显。不同浓度葡萄糖组24h(5mM，10 mM，22 mM，33 mM)MTT检测的OD值分别为0.66±0.05，0.86±0.57，0.89±0.23，0.81±0.15；22mM葡萄糖24h，48h，72h使ECV304增殖率分别为34.8％，30.5％，72.5％；不同浓度葡萄糖组作用24h于ECV304产生NO量分别为7.9±0.3uM，19.0±3.0 uM，6.9±0.9uM，2.4±0.5uM。 2．不同浓度胰岛素组(0，10~(-9) M，10~(-8) M，10~(-7)M)24h MTT检测的OD值分别为0.66±0.05，0.77±0.12，0.86±0.14，0.93±0.17；10~(-8)M胰岛素24h，48h，72h增殖率分别为30.3％，21.9％，23.5％；不同浓度胰岛素作用ECV304 24h产生NO量分别为7.9±1.1uM， 第四军医大学硕士学位论文 13.2士1.8 uM，10.6士0.6 uM，5.8士0.guM。葡萄糖和胰岛素 刺激细胞产生NO均是先升高后降低。 3.不同浓度ox一LDL 24h(0 mg/L，6.25 mg/L，12.5 mg/L， 25 mg/L，50mg/L)MTT检测的OD值分别为0.80士0.05，0.73士 0.15，0.66士0.01，0.19士0.03，0.17士0.04;50mg/L ox一LDL 24h， 48h，72h抑制率分别为8%，22.9%，78.8%;0 mg/L，12.5 mg/L， 25 mg/L，50mg/L ox一LDL产生NO量分别为28.9士1.2 uM，27.2 士2.ZuM，15.0士4.ouM，6.06士1.ZuM。提示ox一LDL对细胞生长 及NO释放均有抑制作用，且呈浓度及时间依赖性。 4.尿酸促进细胞增殖且呈浓度依赖性。不同浓度尿酸组(0 mM，0.lmM，0.ZmM， 0.4耐)24h附T检测的OD值分别为1.72士0.02， 1.81士0.03，1.83士0.16，1.88士0.08:0.4InM尿酸24h，48h， 72h增殖率分别为9.3%，23.3%，4.7%;产生NO量分别为6.86士 1.4luM，12.5士2.7uM，18.9士1.suM，21.1士1.4uM。说明尿酸促 进细胞增殖及NO产生，且呈浓度依赖性。 5.ox一LDL与LDL作用于血管内皮细胞24h产生丙二醛分别为 7.821士1.063nmol/ml，3.718士1.26 nmol/ml，说明ox一LDL的氧 化模型成功;不同浓度尿酸(0mM，0.lmM，0.2耐，0.4mM)作 用24h后，丙二醛分ZIJ为2.556士9.8 X 10一，nmol/ml，2.889士 8 .6 x 10一，皿01/ml，2.778士9.9 x 10一，nmol/ml，2.444士2.9 X 10一， nmol/ml，提示在此浓度范围，尿酸具有浓度依赖性的抗氧化能力。 结论1.葡萄糖与胰岛素对内皮细胞具有双面影响，一定浓度范围 可能有益，继续增加浓度则出现有害作用。 2.ox一LDL可能是内皮细胞的有害因素。 3.尿酸可能是血管内皮细胞的保护剂。 第二部分临床分析:部分代谢综合征组分之间的关系。 月的通过对临床资料的收集与分析，观察2型糖尿病伴/不伴动 脉粥样硬化时的血尿酸差异;肥胖、2型糖尿病对血尿酸的影响; 肥胖与血脂、血压的关系。 方法(l)应用病例对照流行病学研究方法，将102例2型糖尿 第四军医大学硕士学位论文 病人按动脉粥样硬化的有无分为2组，检测血压、血脂、尿酸、体 重指数等指标。(2)将205例病人根据体重指数及血糖水平分为3 组(2型糖尿病体重正常组，2型糖尿病肥胖组与单纯肥胖组)，测 定其血尿酸、血脂等指标。(3)采用横断面调查研究的方法，对西 京医院门诊体检的235人的体检结果进行统计学分析。 结果(1)年龄，病程、空腹及餐后血糖、血压、体重指数、胆 固醇、甘油三酷均衡后，2型糖尿病合并动脉粥样硬化组较单纯糖 尿病组血尿酸水平明显升高(只0.01)。(2)2型糖尿病肥胖组与2 型糖尿病体重正常组相比，前者血尿酸明显增高(只0.01)，与单 纯肥胖组相比，血尿酸的差异无统计学意义(乃0.05)。(3)男性 肥胖的患病率高于女性(只0.01);超重及肥胖组血压、血脂水平 明显高于对照组(只0.01，只0.05);肥胖组两性间腰臀比，高密 度脂蛋白的差别有显着的统计学意义。 结论(1)2型糖尿病伴动脉粥样硬化时血尿酸水平升高。 (2)肥胖较2型糖尿病与血尿酸关系更为密切。 (3)肥胖者血脂、血压明显升高。