收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人源肝癌单链抗体的筛选与鉴定

薛国柱  
【摘要】:利用细胞融合技术成功制备的杂交瘤单克隆抗体(mAb)在疾病的预防和诊治等方面显示出了重要作用,但在体内的应用则有诸多限制。抗体库技术为制备高亲和性的抗体提供了有力工具。该技术无需免疫即可制备全人源性抗体,可有效避免鼠源性抗体在人体应用时诱发HAMA产生不良反应。对于无法提纯或抗原性质不确定的肿瘤抗原,必须采用新的筛选系统。抗体与抗原结合后可以经细胞内化的方式将抗原与抗体的复合物吞入细胞内。内化筛选方法可筛选到对于肿瘤导向治疗具有重要作用的内化抗体。目的: 对菌落PCR方法进行研究,探讨在抗体库筛选中的应用价值。筛选出的抗体需要用ELISA方法检测其与抗原的结合能力,对ELISA反应的抗体浓度和作用条件等进行优化,建立稳定的细胞ELISA方法。噬菌体抗体库筛选过程中洗涤液、洗脱液、封闭液、筛选体积以及细胞状态等均对筛选结果产生影响,对筛选条件进行优化,以避免特异性抗体的丢失,同时尽可能减少非特异性抗体。构建大容量的次级噬菌体抗体库,采用细胞内化的方法,筛选可以内化进入肝癌细胞的特异性噬菌体抗体。对筛选出的抗体进行序列分析,进一步对筛选出的抗体进行特异性和抗原定位研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 何光志;田维毅;高英;王平;王文佳;奚锦;俞琦;王乾宇;黄高;;抗蛔虫人源单链抗体库的构建及鉴定[J];湖南师范大学自然科学学报;2011年03期
2 徐宏勇;徐立;李开宗;;一种新型胃肠道癌特异性单链抗体的表达及其在胃癌中的检测[J];胃肠病学和肝病学杂志;2011年08期
3 牛坚;张业伟;刘斌;;抗人AFP单链抗体的制备、鉴定及其免疫学活性的测定[J];肝胆胰外科杂志;2011年04期
4 苏雪莹;赵振富;徐杰;汪华侨;初国良;;人源性老年痴呆单链噬菌体抗体库的构建[J];中国老年学杂志;2011年17期
5 林晓思;许健;王生育;颜江华;;抗CD5单链抗体的基因构建、蛋白纯化及活性鉴定[J];中国生化药物杂志;2011年04期
6 谷铁军;张海玉;段冶;韩明明;卫巍;姜春来;吴永革;孔维;;抗狂犬病病毒糖蛋白单链抗体Fv57多克隆抗体的制备[J];中国生物制品学杂志;2011年09期
7 王江涛;王捷;;利用人源化噬菌体抗体库筛选骨唾液酸蛋白的单链抗体[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年09期
8 高国辉;黄奇迪;王金丹;杨纪锋;包兵兵;胡孝渠;;Anti-HER2-ScFv-GFP融合蛋白靶向结合体外乳腺癌细胞表面受体的研究[J];中国细胞生物学学报;2011年05期
9 王乃东;袁安文;邓治邦;屠迪;许道军;夏南松;杨大为;薛立群;;血清学检测的雄性特异性抗原Fab抗体的特异性鉴定[J];畜牧兽医学报;2011年08期
10 王辉;于立君;毕晓君;张利军;;具有疫苗算子的可变模糊匹配阴性选择算法[J];哈尔滨工业大学学报;2011年06期
11 周烨;陈振瑞;贺微;娄海波;张哲欢;刘叔文;姜世勃;吴曙光;李长征;周辰;;哺乳动物细胞表面展示全长类风湿关节炎抗体库的构建[J];南方医科大学学报;2011年08期
12 杨喜佳;王平;;肿瘤人源单克隆抗体药物的研究进展及临床应用[J];云南医药;2011年03期
13 张松江;邬力祥;高剑峰;尚立芝;王红伟;薛红;刘永;张文靖;王峰;;阿尔茨海默病的免疫治疗问题[J];免疫学杂志;2011年08期
14 袁丰瑞;张敏静;仝雷;苏志坚;项琪;黄亚东;;抗Her-2抗体与人β防御素Ⅱ融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定[J];中国药科大学学报;2011年03期
15 赵红蕾;刁昱文;冯新;高宇;刘珊珊;顾敬敏;雷连成;韩文瑜;;噬菌体展示肽库技术及其在分子病原细菌学研究中的应用[J];河北科技师范学院学报;2011年01期
16 王福利;赵爱志;韩月恒;温伟红;刘建平;董青川;秦卫军;;T4DNA连接酶对电转化效率的影响[J];中国现代医学杂志;2011年17期
17 熊婧;白杨;;噬菌体治疗耐药性幽门螺杆菌的研究进展[J];胃肠病学和肝病学杂志;2011年06期
18 邵继平;姜世勃;刘叔文;;基于gp41的HIV亚单位疫苗研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年09期
19 江海飞;陈建华;顾觉奋;;烯二炔类抗生素及其靶向药物研究新进展[J];国外医药(抗生素分册);2011年04期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王长军;唐家琪;李先富;潘秀珍;操敏;;抗人红细胞血型抗原噬菌体单链抗体的研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
2 王洪利;舒建昌;;单链抗体在肝脏疾病中应用的研究进展[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
3 薛峰;郑捷;潘萌;李卫平;;鼠抗天疱疮抗原(PVA)单链抗体的构建与筛选[A];2002中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2002年
4 孙娜娜;王欲晓;周丽君;王刚;;人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A单链抗体的构建及表达[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
5 张惠中;;细胞内生成的抗整合酶单链抗体阻断HIV-1复制的实验研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
6 王欲晓;乔媛媛;周丽君;;人源性抗蓖麻单链抗体的分离纯化和活性鉴定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
7 汪世华;胡开辉;杨燕凌;邱君志;;基因工程单链抗体研究[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
8 林志伟;汪世华;王宗华;;抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单链抗体(DON-ScFv)在枯草芽孢杆菌中高效表达与分泌[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
9 杨燕凌;;酶(蛋白)融合技术研究[A];华东地区农学会学术年会暨福建省科协第七届学术年会农业分会场论文集[C];2007年
10 陈立;宋今丹;;抗人大肠癌重组单链抗体的研制[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 薛国柱;人源肝癌单链抗体的筛选与鉴定[D];第四军医大学;2005年
2 盛唯瑾;抗EGFR单链抗体与力达霉素融合蛋白的构建及其抗肿瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2009年
3 赵爱志;人源性肝癌单链抗体库的构建[D];第四军医大学;2002年
4 胡学军;抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)单链抗体基因克隆及其在大肠杆菌和烟草中的表达[D];大连理工大学;2002年
5 田媛;前列腺癌细胞结合单链抗体的筛选、表达纯 化及其功能初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
6 李月红;抗ICAM-1单克隆抗体与单链抗体的制备及其生物学特性研究[D];吉林大学;2005年
7 陈德宇;前列腺素D合成酶在男性生殖中的基础及应用研究[D];南京师范大学;2005年
8 熊盛;重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定[D];华南理工大学;2002年
9 邵长利;抗人红细胞单链抗体融合HIV-1gp41抗原肽双功能分子的制备与鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
10 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李淼;从大容量人源噬菌体抗体库中筛选抗黑素瘤特异性抗体[D];第四军医大学;2005年
2 侯云霞;抗恶性疟原虫HRP-II单链抗体库的构建、筛选[D];第一军医大学;2001年
3 徐飞虎;抗肺癌单链抗体偶联绿色荧光蛋白基因的构建及表达研究[D];浙江大学;2003年
4 杨乃娣;全人源胃癌噬菌体单链抗体库的构建及其初步筛选[D];浙江大学;2010年
5 赵蕾;抗鸡传染性支气管炎病毒单链抗体原核表达质粒的构建及其间接ELISA筛选方法的建立[D];上海交通大学;2011年
6 才琳;抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体和单链抗体的制备及活性研究[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
7 张薇;抗T-2毒素单链抗体的制备及该毒素对细胞毒性影响的初步研究[D];福建农林大学;2010年
8 王溪桥;大容量人源肝癌核糖体展示单链抗体库的构建[D];兰州大学;2010年
9 江淼;抗活化血小板表面受体全套单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选[D];苏州大学;2003年
10 朱琳琳;全合成人源抗体库的构建及抗BHL-1单链抗体的初步筛选[D];吉林大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王飞雁;义翘神州:做全球最大的抗体库[N];北京日报;2011年
2 北京市医疗器械检验所 康娟 刘毅;临床检测仪器新面孔[N];健康报;2010年
3 本报记者 吴红梅;江苏开始参与“国际研发分工”[N];新华日报;2010年
4 张木 魏于全;前进中的我国生物医药产业[N];科技日报;2002年
5 本报记者 杨田;我国可望成生物技术产业聚宝盆[N];医药经济报;2000年
6 记者汪敏华;申城建成首个抗体基因库[N];解放日报;2003年
7 汤宏;科海搏浪[N];解放军报;2000年
8 本报记者 李建荣;雏鹰展翅向蓝天[N];大众科技报;2011年
9 曹勇;方兴未艾的药物释放领域[N];中国医药报;2002年
10 记者 张学全;上海建成康复病人血液抗体基因库[N];新华每日电讯;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978