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缺失突变HCV核蛋白DNA免疫效果的初步评价

洪沙  
【摘要】:丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染已成为困扰全球人口健康的一大问题,超过1.7亿人有HCV感染。HCV感染后85%将发展为慢性,约20%最终发展为终末期肝病。到目前为止尚无切实有效的预防和治疗方法。因此,迫切需要开发切实有效的疫苗来预防感染和寻求新的治疗途径。 长期以来,HCV核蛋白作为抗HCV疫苗的备选抗原一直受到关注。DNA免疫研究揭示编码HCV核蛋白的DNA疫苗能够诱导特异性抗体产生和Th1类细胞免疫反应,然而由于完整的核蛋白基因疫苗免疫原性十分有限,促使研究者寻求多种策略进行优化,但仍然未达到理想的效果。核蛋白DNA疫苗在细胞内表达量不足和核蛋白本身对免疫功能的抑制作用可能是影响提高核蛋白特异性免疫的两个重要因素。本研究着眼于对核蛋白自身结构的改造,试图通过提高核蛋白在真核细胞内的表达水平、去除影响免疫细胞对核蛋白有效识别的肽段,达到增强核蛋白特异性免疫反应的目的。 实验方法和结果: 1.通过RT-PCR方法从西安地区慢性丙型肝炎患者血清中扩增了HCV C区及部分E1区cDNA,将其插入pGEM-Teasy载体中,采用酶切


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