CD226分子表达于造血干/祖细胞和巨核细胞谱系及神经细胞谱系参与巨核细胞倍体化调控

【摘要】：[目的]本课题旨在研究CD226分子在造血干/祖细胞和相关粒系,红系和巨核细胞谱系细胞上的表达,及造血干细胞跨胚层向神经细胞分化后,CD226分子表达的变化,探索了CD226分子在巨核细胞成熟过程中的作用及与淋巴细胞功能相关抗原-1的关系。 [方法]使用血小板生成素(thrombopoietin,TPO)和粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)分别诱导成人和胎儿CD34~+细胞向巨核细胞和粒细胞分化。使用红细胞生成素(erythropoietin,EPO)诱导胎肝单个核细胞和成人CD34~+细胞向红细胞分化。使用含TPO的无血清培养基中长期培养扩增人胎肝CD34~+细胞,将扩增细胞置于Neurobasal培养基中,诱导其向神经细胞分化。使用RT-PCR,流式细胞术和免疫组化技术分析CD226分子和淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function associated antigen 1,LFA-1)α亚单位(CDlla)在造血过程中表达的变化。使用抗体交联技术研究CD226分子和LFA-1分子在巨核细胞倍体化过程所起的作用。使用流式细胞仪和免疫组化染色技术分析CD34~+细胞向神经细胞分化过程中,CD226分子以及造血和神经细胞相关抗原表达的变化。