收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Survivin启动子克隆及其在肿瘤特异性基因治疗中的应用

吴冰  
【摘要】:目的:克隆survivin启动子构建survivin启动子调控的siRNA真核表达载体,探讨survivin启动子在在肿瘤特异性基因治疗中的应用。 方法:(1)以HeLa细胞基因组DNA为模板,PCR扩增survivin启动子,回收扩增产物并插入pGEM-TEasy载体(T/Surp),测序鉴定。(2)SacⅠ和HindⅢ分别双酶切T/Surp载体和pGL3Basic,回收survivin启动子酶切片断及pGL3Basic酶切片断,连接回收产物构建携带survivin启动子pGL3Basic真核表达载体(pGL3Basic/Surp),酶切鉴定。(3)纯化pGL3Basic/Surp质粒,用脂质体法转染HeLa细胞和正常血管内皮细胞ECV304,48h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性。(4)合成两对干涉stathmin基因的siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接入经BamHI和HindⅢ双酶切后的pSilencer4.1-CMV neo真核表达载体(pSilencer4.1-CMV neo-S1和pSilencer4.1-CMV neo-S2)。PCR扩增带有EcoRI和BamHI酶切位点的survivin启动子,双酶切后连接入pSilencer4.1-CMV neo-S1和pSilencer4.1-CMV neo-S2(pSilencer4.1-Surp


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘畅,谭晓华,刘端祺;树突状细胞与肿瘤免疫治疗的现状[J];华北国防医药;2005年05期
2 吴霞,李大金;肿瘤免疫编辑[J];现代免疫学;2005年06期
3 李新民;尉继伟;;热疗对荷VX_2瘤兔血清白细胞介素2,6,8的影响[J];中国临床康复;2005年42期
4 刘东;陈云昭;李锋;;microRNA在肿瘤表观遗传学中的研究进展[J];临床与实验病理学杂志;2010年06期
5 朱林波;傅庆国;;HSP70-PCs的抗肿瘤作用[J];中华全科医学;2011年08期
6 朱炳法;用瘤内依赖IL_2的淋巴细胞治疗肺癌[J];国际肿瘤学杂志;1987年06期
7 乔健;肿瘤特异性主动免疫治疗研究进展[J];国外医学.肿瘤学分册;1994年03期
8 谢庆军;肿瘤特异性调控元件在基因治疗中的研究进展[J];国外医学.肿瘤学分册;1997年05期
9 吴燕;肿瘤特异性独特型疫苗对B细胞淋巴瘤的长期疗效[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1998年06期
10 焦维克,薛青,邓新宇,黄康健;血清肿瘤特异性生长因子与癌胚抗原联合检测对肺癌的诊断价值[J];中国煤炭工业医学杂志;2001年04期
11 邱历伟,姚登福,吴信华,吴玮,卜召祥;血管内皮生长因子和肿瘤特异性生长因子对恶性肿瘤的诊断价值[J];胃肠病学和肝病学杂志;2004年05期
12 盘鹰;张锦堃;;树突状细胞介导的肿瘤基因免疫治疗[J];癌变.畸变.突变;2006年06期
13 浦颖艳;方琳;沈权;孙丽君;胡小翠;王艳;曹祥荣;苏长青;;肿瘤特异性溶瘤腺病毒载体的构建及其在肿瘤细胞中特异性的表达[J];南京师大学报(自然科学版);2008年02期
14 王沛;人转移乳腺癌肿瘤相关淋巴细胞的肿瘤特异性及HLA—A2限制性杀伤作用[J];华北国防医药;1996年04期
15 刘美娜;卵巢癌患者树突状细胞体外诱导肿瘤特异性HLA-Ⅰ型CD_8~+细胞毒性T淋巴细胞反应[J];国外医学.妇产科学分册;2001年05期
16 赵雪倩 ,赵晶;疫苗:肿瘤特异性杀伤(T淋巴)细胞CTLs的有益助手[J];国外医学.免疫学分册;2005年01期
17 贲松彬,赵洪礼,聂晶,李红扬;肿瘤特异性凋亡基因诱导人淋巴瘤细胞凋亡的机制[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年04期
18 王家银;关向宏;;黑色素瘤抗原基因与肿瘤[J];山东医药;2006年10期
19 吴志刚;;树突状细胞介导的肿瘤免疫治疗[J];现代诊断与治疗;2006年04期
20 钟英强;朱兆华;;树突状细胞疫苗治疗肿瘤的研究现状和展望[J];国外医学(内科学分册);2006年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 向荣;;肿瘤特异性靶向小分子藕联纳米颗粒对乳腺癌的治疗作用[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
2 曾永秋;赵矫;刘岚;余红;陈绍坤;税青林;;Survivin启动子调控的hTERT基因shRNA表达载体的构建及对肿瘤特异性靶向作用研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
3 王阿慧;毕昊;孙军;彭冬君;田俊;狄勇;宗义强;屈伸;;利用6His-VP3融合蛋白捕获肿瘤细胞中与其相互作用蛋白的初步探讨[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年
4 徐洪亮;杨丹;李函蔚;李兵直;冯晶;李桂英;;肿瘤特异性抗CDK4胞内抗体的体内外抑瘤效应分析[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
5 赵祯;黄蕤;匡安仁;;Survivin启动子调控hNIS基因介导肿瘤核素显像和治疗的基础研究[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
6 陈成;朱一蓓;;B7-H3分子上调性表达在CD40活化的树突状细胞介导抗肿瘤免疫应答中的作用[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
7 蔡辉;黄智华;石磊;李艳梅;;新型MUC1糖肽肿瘤疫苗的研究进展[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年
8 倪兵;唐艳;吴玉章;;人肿瘤特异抗原MAGE-3的克隆与表达[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
9 李双;陈帅;杨耀琴;陶惠红;杜逸峰;赵培林;;自杀基因hTERTp-tk/GCV系统联合中药鸦胆子对人肺癌A549细胞的杀伤效应[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
10 黎鹏;赵飞兰;王延伟;蓝玲;陈大美;谢小薰;罗国容;;广西肝细胞癌SCP-1基因表达的免疫组化研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 肖樟生;由肿瘤特异性启动子mTERT promotor驱动的m4-1BBL基因治疗小鼠肝细胞肝癌的实验研究[D];苏州大学;2009年
2 刘连杰;肿瘤特异性增殖型腺病毒携带白细胞介素-12基因治疗大肠癌的实验研究[D];第二军医大学;2001年
3 崔乃鹏;基因半相合肿瘤特异性T淋巴细胞在肿瘤免疫治疗中的应用研究[D];河北医科大学;2012年
4 葛科立;依赖hTERT启动子的新型溶瘤单纯疱疹病毒的构建和功能研究[D];北京协和医学院;2013年
5 韩志强;选择性封闭肿瘤STAT3的新型溶瘤腺病毒M3的构建及应用[D];华中科技大学;2007年
6 狄勇;HSPA9抑制Apoptin诱导HepG2细胞凋亡[D];华中科技大学;2009年
7 张永红;双自杀基因CDTK载体的构建及其对人视网膜母细胞瘤株Y79的杀伤作用[D];中南大学;2008年
8 杨阔;慢病毒介导对TGF-β失敏感的肿瘤特异性CTL在前列腺癌免疫治疗中的实验研究[D];天津医科大学;2008年
9 黄仲曦;生物信息学初步探索鼻咽癌发病机理[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
10 黄兰青;小鼠点突变p53抗原肽的预测及其诱导肽特异性CTL的研究[D];中国协和医科大学;1997年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王琦;人类肿瘤特异性启动子计算机识别技术研究[D];第一军医大学;2004年
2 余夏;负载mIP-10基因叶酸偶联的壳聚糖纳米粒子提高肿瘤特异性CD8~+CD28~+T细胞抗肿瘤作用及其机制研究[D];广西医科大学;2013年
3 任继鸿;新一代肿瘤条件复制腺病毒构建及其喉癌生物治疗研究[D];第四军医大学;2010年
4 徐磊;肿瘤特异性MAGE-A3基因重组质粒的构建[D];浙江大学;2007年
5 王阿慧;利用6His-VP3融合蛋白捕获肿瘤细胞中与其相互作用蛋白的初步探讨[D];华中科技大学;2007年
6 梁晨;携带LAPTM4B-24的溶瘤腺病毒对肝癌治疗效果的研究[D];浙江理工大学;2011年
7 陈洁;肿瘤特异性增殖型腺病毒携带mIFN-γ基因治疗实体瘤的实验研究[D];第四军医大学;2002年
8 李奕璇;肿瘤特异性启动子调控SEA基因抗肺癌的实验研究[D];重庆医科大学;2008年
9 郭荫广;肿瘤特异性锚定型α-gal模拟表位真核表达质粒的构建及功能研究[D];重庆医科大学;2010年
10 张旭朏;新型自身免疫抗体在恶性间皮瘤联合诊断中的研究[D];河北大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王柱彬;早诊乳腺癌又添“试金石”[N];健康报;2001年
2 上海南洋胸心疾病研究中心 吕晓萍;不明原发灶的转移癌[N];解放日报;2000年
3 庄愉;基因疫苗研究的第三次革命[N];医药经济报;2001年
4 柳斌;抗癌英雄T细胞[N];大众卫生报;2002年
5 ;恶性肿瘤有望用疫苗防治[N];中国高新技术产业导报;2002年
6 范晓艳;Cyp B肽肿瘤疫苗临床试验结果不尽人意[N];医药经济报;2003年
7 李立安;KAI1基因与喉鳞癌发生发展相关[N];中国医药报;2003年
8 记者 白毅;HER2抗体抗肿瘤效应免疫新机制被发现[N];中国医药报;2010年
9 本报记者 白毅;多胺可作为载体将药物转运至癌细胞[N];中国医药报;2011年
10 李洁尉 朱丹萍;疟疾可能用于肺癌免疫治疗[N];广东科技报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978