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肝癌相关抗原HAb18G/CD147的分离纯化及其糖基化的初步研究

余晓玲  
【摘要】:目的 HAb18G是本研究中心用抗人肝癌单克隆抗体HAb18筛选人肝癌细胞cDNA文库,获得的一个新的肝癌相关抗原。HAb18G是一个高度糖基化的跨膜蛋白,其cDNA序列开放读码框与CD147分子完全一致,与基质金属蛋白酶诱导因子((Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer, EMMPRIN)、Basigin、5A11/HT7等为同一蛋白在不同组织细胞中的表达形式,同属CD147家族。HAb18G具有刺激成纤维细胞产生基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase, MMPs)的功能,可能在肝癌浸润、转移过程中扮演了重要的角色。由于HAb18G/CD147是一个高度糖基化的膜蛋白,糖基化修饰对该分子功能活性的发挥可能具有重要影响,研究HAb18G/CD147分子在肝癌组织或细胞中的糖基化修饰特性,可以为深入认识该分子,阐明其在肝癌浸润和转移过程中的作用机制提供依据。因此,本课题的研究目的是:1.建立一种高效的分离纯化方法,以获得高纯度、天然结构的HAb18G分子;2.研究天然HAb18G糖蛋白在肝癌细胞中的糖基化修饰特性,以及这种修饰对该分子的结构和功能活性的影响。 方法 1.肝癌相关抗原HAb18G/CD147的分离纯化及功能鉴定 将特异性结合HAb18G膜抗原的单抗交联到rProteinA层析介质上,


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