RP-HPLC法监测生化汤制剂及其药代动力学研究

【摘要】：对中药进行现代化研究是当今我国生命科学研究的重点项目之一。中药药理学作为解决中药尤其是中药复方药效作用原理这一关键环节的重要学科,是当前中药现代化研究的热点之一。目前,我国对中药复方药理学的研究虽有很大的进展,但相当一部分还是局限于某种药效的观察,对作用机制的研究比较薄弱。本研究以“证治药动学”和“方剂血清成分谱”假说为指导,将传统中医理论与现代医学理论相融会,选择组方严谨、疗效确切的生化汤、冠心Ⅱ号为工具药方,在严格药材质量、煎煮工艺等质量控制的前提下,进行生化汤临床药代动力学研究及冠心Ⅱ号体内外成分谱对照初探。 方法:1.RP-HPLC法,采用Inertsil ODS-3柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,甲醇-水(含1%乙酸)(45:55,v/v)为流动相,流速1.0ml·min~(-1),检测波长为321nm,外标法定量。比较生化汤单煎液与共煎液中阿魏酸的含量;考察由甘草和干姜的不同炮制品与生化汤中其它三味药组合构成的4种样本中阿魏酸含量的变化;比较不同溶媒煎煮生化汤中阿魏酸含量的变化。2.水浴法处理血清样品,以对羟基苯甲醛为内标,Inertsil ODS-3柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,甲醇—水(含0.6%冰醋酸)(43:57,v/v)为流动相,流速为1.0ml/min,321nm波长下检测,以RP-HPLC法测定健康女性志愿者口服生化汤后血清FA浓度,用3P97程序计算药动学参数。3.用水浴法、乙腈、甲醇处理健康男性志愿者口服冠心Ⅱ号汤剂30min的含药血清,采用恒流和梯度洗脱两种方法进行色