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天然抗体IgM 3B4体外抑制白念珠菌与宿主细胞相互作用的实验研究

陈新辉  
【摘要】: 天然抗体(natural antibodies, NAbs)是指正常机体在没有任何抗原刺激的情况下由胚系基因编码的,正常机体产生的针对一种或多种自身和(或)外源性抗原的抗体,具有多反应性和低亲和力的特征。自NAbs被发现以来,人们对其可能具有的功能进行了一系列的深入研究。研究结果表明,NAbs是构成机体天然免疫系统的重要组成部分,在肿瘤监视、自身免疫、异体排斥、抗感染等方面均发挥着重要的作用。 近年来,随着抗生素、皮质类固醇激素、免疫抑制剂等的广泛应用,以及HIV感染者增加、异种移植术的开展、肿瘤发病率的上升,真菌感染呈明显上升趋势,特别是白念珠菌引起的感染明显上升,越来越引起人们的重视。人们逐渐认识到体液免疫在抗真菌感染中起着重要作用,而天然体液免疫又构成了机体抵御外来感染的第一道防线,天然抗体的作用逐渐引起人们的重视。虽然有部分事实表明天然抗体可能具有抗真菌免疫的作用,但还缺乏直接的证据,为此倍受医学界学者的广泛关注。 本课题组在国家自然科学基金(30330510、30300318, 30330550, 30425015)的支持下,应用未免疫小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合,成功筛选到了3株分泌IgM型天然抗体的杂交瘤细胞,它们的可变区基因与胚系基因高度同源,其中以天然抗体IgM 3B4与抗原的结合活性最好,并且已经证实在体外天然抗体IgM 3B4可以调理吞噬细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬作用和天然抗体IgM 3B4可以与白念珠菌孢壁的糖蛋白抗原结合。本研究在前期工作的基础上利用纯化得到的天然抗体IgM 3B4,在体外以白念珠菌为对象,初步探讨天然抗体IgM 3B4抗真菌感染的作用机制。 本研究利用纯化得到的天然抗体IgM 3B4在体外证实:1在体外,不同浓度的天然抗体IgM 3B4可以抑制白念珠菌芽管生成,2在体外,天然抗体IgM 3B4可以抑制白念珠菌与宿主细胞之间的粘附;3采用ELISA和RT-PCR方法检测了天然抗体IgM 3B4在体外对感染了白念珠菌的脐静脉血管内皮细胞IL-6、IL-8、ICAM-1和VCAM-1表达和分泌的影响,证实天然抗体IgM 3B4明显促进了脐静脉血管内皮细胞上述细胞因子的表达和分泌。从而证实了天然抗体IgM 3B4抵抗白念珠菌感染的能力与其抑制白念珠菌芽管生成、抑制白念珠菌与宿主细胞之间的粘附以及促进脐静脉血管内皮细胞IL-6、IL-8、ICAM-1和VCAM-1的表达和分泌有关。


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