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NDRG2在人甲状腺肿瘤中的表达及其对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响

赵华栋  
【摘要】: 甲状腺肿瘤是临床上的常见病和多发病。虽然甲状腺恶性肿瘤占人类所有癌的1%左右,但仍是内分泌系统最常见的恶性病变,严重威胁着人类的生命健康。除乳头状甲状腺癌经包括手术切除、内分泌治疗及放射性核素治疗在内的临床综合治疗后,可望获得较好的预后外,其他病理类型的甲状腺恶性肿瘤,预后仍然较差。而继续对甲状腺肿瘤进行深入研究,进一步取得对甲状腺恶性肿瘤发生、发展的分子机制的更深入的认识,包括寻找与其密切相关的新基因,仍显得十分必要。 人NDRG2是我校生物化学与分子生物学教研室首先克隆并报道的一个新基因。对其进行深入研究结果表明,其在多种正常组织均有表达,而在结肠癌、胶质瘤、白血病、淋巴瘤和腮腺癌等10余种肿瘤组织或细胞系中无表达或低表达,是多种肿瘤及相应正常组织细胞的差异表达基因,因此推测该基因可能和肿瘤的发生、发展有关,被列为一新的抑癌候选基因。并且最近的研究结果证实,NDRG2的表达是受到Myc的调控。 NDRG2与人甲状腺肿瘤的关系先前并无明确报道。NDRG2在人甲状腺肿瘤中有无表达及其表达模式如何,是首先需要明确的问题。本实验的第一部分就围绕着这一问题进行展开。我们首先运用组织芯片技术对NDRG2在人甲状腺肿瘤中的表达进行了免疫组织化学染色检测,结果发现,NDRG2在正常甲状腺组织中呈高表达,在甲状腺腺瘤组织中呈弱表达或中等强度表达,而在多种病理类型的甲状腺癌组织中呈不表达或极低表达。其次通过收集临床标本进行免疫组织化学染色和western印迹检测,得到了相似结果,这就说明NDRG2在蛋白表达水平上呈差异性表达。此发现也鼓励我们进一步对NDRG2在甲状腺肿瘤中的RNA表达水平进行了检测,通过RT-PCR、real-time PCR方法对收集来的临床肿瘤标本的检测,结果和上述实验结果一致。从而证明NDRG2在正常甲状腺组织及甲状腺癌组织中是一明显差异性表达性基因。 为进一步了解NDRG2在甲状腺肿瘤发生、发展中所起的作用。我们运用NDRG2的过表达腺病毒载体,感染甲状腺滤泡状癌细胞株FTC-133从而实现NDRG2的过表达,通过RT-PCR和Western-blot检测感染成功后,对甲状腺癌细胞株进行了MTT、平板克隆形成检测及细胞周期测定,结果表明,过表达NDRG2可以明显抑制甲状腺癌细胞株的增殖。通过Trans-well和细胞划痕实验检测,结果显示,过表达NDRG2可以明显抑制甲状腺癌细胞株的侵袭能力。 我们的实验结果证明了NDRG2在正常甲状腺组织及甲状腺癌组织中是一差异性表达性基因,过表达的NDRG2对甲状腺癌细胞株的增殖、侵袭能力呈现明显的抑制作用。由此推断,NDRG2可能参与了甲状腺肿瘤的发生、发展。丰富了对NDRG2和甲状腺肿瘤的认识,从而为以后对甲状腺肿瘤的深入研究奠定了实验基础。


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